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荧光原位杂交应用于胎盘滋养细胞染色体数目检测的研究

作　者: 张元宝
导　师: 丛林
学　校: 安徽医科大学
专　业: 围产医学
关键词: 胎盘绒毛 荧光原位杂交(FISH) 产前诊断
分类号: R714.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 52次
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内容摘要


目的探讨一种以胎盘绒毛取样进行荧光原位杂交(FISH)快速诊断染色体数目的方法。方法采用健康产妇分娩后的离体胎盘组织,经消化低渗预固定解离和固定制片,进而进行荧光原位杂交(FISH)实验。实验采用染色体着丝粒特异性探针(18、CSPX、CSPY探针),以检测相应的染色体数目,并与产后的新生儿性别及有无18三体畸形作相应的对照。①制片方法:分别采用了产后离体胎盘绒毛剪碎取样法,产后离体胎盘的模拟穿刺法,以及产后离体胎盘组织匀浆机制备的三种方法制备实验标本玻片,进而进行下一步的FISH实验。②FISH实验采用的是羊水标本FISH标准程序,其具体步骤在实验的基础上略作探索性的改动,均经试验证实是有效的改动。③所有的实验图像均经cutefish软件拍摄并处理,完成后记录于荧光原位杂交专用电脑中。④实验结果图像的评判:以荧光信号在间期细胞核出现的个数来判断相应染色体的条数。信号点之间的距离必须大于其直径,否则视为同一染色体的噪点。每张玻片计数约100-200个间期核内荧光信号点的数目。结果10例标本均为正常杂交信号,图像清晰,未发现相应的数目异常;胎儿性别与临床无异,准确率100%,成功率90.9%(取材11例,1例实验失败,未见杂交信号),其中1例男胎中出现了2/200个间期细胞核的XX信号,考虑为母体细胞的嵌合型。结论:以胎盘绒毛为标本,应用FISH技术,能快速检出胎儿的染色体数目:以胎盘绒毛进行FISH技术可省略细胞培养的繁琐过程,能够快速的对染色体数目进行诊断;因存在取材安全性问题及胎盘嵌合体的问题,该实验尚有待于进一步的后续研究才能真正的应用于临床工作之中。

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-7
英文摘要  7-9
前言  9-10
材料与方法  10-14
结果  14-17
讨论  17-21
结论  21
参考文献  21-24
附录  24-25
致谢  25-26
综述  26-39
  参考文献  34-39
附图  39

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 产科学 > 胎儿
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