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Bcl-2、Bax在乳腺增生组织的表达及温阳散结法治疗乳腺增生病的机理研究

作　者: 考书钢
导　师: 孙贻安
学　校: 山东中医药大学
专　业: 中医外科学
关键词: 乳腺增生病 温阳散结法 Bcl-2 Bax
分类号: R271.44
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 63次
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内容摘要


目的:临床观察人体乳腺增生病、乳腺癌癌前病变、乳腺癌中凋亡基因Bcl-2、Bax的表达,动物实验研究温阳散结法对大鼠乳腺增生病的治疗作用及对抗凋亡基因(Bcl-2)与促凋亡基因(Bax)的影响,从促进细胞凋亡方面研究中药治疗乳腺增生病的机理。方法:临床研究选取人体乳腺增生病、乳腺癌癌前病变、乳腺癌蜡块标本,免疫组化法观察Bcl-2、Bax在各病理类型组织中的表达情况。实验研究将100只Vister雌性大鼠随机分为5组,每组20只:空白组、对照组,中药组,乳增宁组,三苯氧胺组。除空白组其他各组动物后腿内侧肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg/d,连续25天,然后肌注黄体酮4mg/kg/d,连续5天造模。将造模成功后空白组、对照组大鼠予生理盐水1ml/100g/d;乳块消汤组予乳块消汤2ml/100g/d;乳增宁组予乳增宁溶液1.5g/100g/d;三苯氧胺组予三苯氧胺溶液0.2mg/100g/d,连续治疗4周。取大鼠乳房腺体,通过HE染色、免疫组化等方法,观察乳腺组织形态学表现,及细胞抗凋亡基因(Bcl-2)与促凋亡基因(Bax)的表达情况。结果:(1)Bcl-2在乳腺增生病、乳腺癌前病变及乳腺癌的阳性表达率(%)分别为90.40±3.02、95.20±1.32、77.65±4.09,表达有明显差异(p<0.05);Bax在乳腺增生病、乳腺癌前病变及乳腺癌的阳性表达率(%)分别为76.75±3.51、64.10±3.02、38.95±2.87,表达有明显差异(p<0.05)。(2)大鼠空白组、对照组、乳块消汤组、乳增宁组、三苯氧胺组乳腺组织形态评分分别为1.00±0.00、3.38±0.39、1.55±0.22、2.10±0.19、1.33±1.43,对照组与空白组比较,具有明显差异(P<0.01),说明造模成功;乳块消汤组与对照组、乳增宁组、三苯氧胺组比较,均具有明显差异(P<0.01)。(3)大鼠空白组、对照组、乳增宁组、乳块消汤组、三苯氧胺组Bcl-2表达率分别为93.30±1.08、96.25±2.69、92.70±2.03、91.40±1.64、91.25±2.02,Bax的表达率(%)分别为75.60±0.99、72.15±2.92、74.40±1.29、73.35±2.03、73.00±2.22,乳块消汤组与对照组、乳增宁组Bcl-2、Bax的表达比较,均具有明显差异(P<0.01),乳块消汤组与三苯氧胺组Bcl-2、Bax的表达比较,具有差异(P<0.05)。结论:临床研究显示Bcl-2的表达水平在乳腺癌前病变达到最高,在乳腺增生病、乳腺癌分别降低;Bax的表达水平随着乳腺增生-癌前病变-乳腺癌病变程度的加重而降低。动物实验研究显示通过对照组与空白组组织病理形态及Bcl-2、Bax的比较,具有明显差异,说明雌激素、黄体酮联合诱导建立大鼠乳腺增生模型造模成功;应用温阳散结法治疗大鼠乳腺增生,在组织形态学上可减轻乳腺增生的病变程度,在分子水平上可下调Bcl-2、上调Bax的表达。

全文目录


提要  3-5
Abstract  5-9
引言  9-10
技术路线图  10-11
临床研究  11-15
  1 资料与方法  11-12
    1.1 临床资料  11
    1.2 主要仪器和设备  11
    1.3 主要试剂  11
    1.4 研究方法  11-12
      1.4.1 取材方法  11
      1.4.2 切片方法  11-12
      1.4.3 免疫组化（SP 法）检测方法  12
      1.4.4 免疫组化结果评判标准  12
    1.5 统计方法  12
  2 结果  12-15
    2.1 BCL-2 在乳腺增生病、乳腺癌前病变、乳腺癌中的表达情况  12-13
    2.2 BAX 在乳腺增生病、乳腺癌前病变、乳腺癌中的表达  13-15
实验研究  15-21
  1 资料与方法  15-18
    1.1 实验动物  15
    1.2 主要仪器和设备  15
    1.3 主要试剂、药品及给药方法  15-16
      1.3.1 主要试剂  15
      1.3.2 主要药品  15-16
    1.4 实验方法  16-18
      1.4.1 动物分组方法  16
      1.4.2 造模方法  16
      1.4.3 给药方法  16
      1.4.4 取材和切片方法  16
      1.4.5 大鼠组织蜡块的制作方法  16-17
      1.4.6 HE 常规染色法  17
      1.4.7 动物乳房组织形态学评分方法  17-18
      1.4.8 免疫组化（SP 法）检测方法  18
      1.4.9 免疫组化结果评判标准  18
      1.4.10 统计学分析方法  18
  2 结果  18-21
    2.1 各组大鼠乳腺组织形态学表现  18-19
    2.2 各组大鼠乳腺组织BCL-2 的表达情况  19
    2.3 各组大鼠乳腺组织BAX 的表达情况  19-21
讨论  21-29
  1 中医对乳腺增生病病因病机的认识  21-23
    1.1 乳腺增生病中医病因  21
    1.2 乳腺增生病中医病机  21-23
    1.3 乳腺增生病中医辨证治疗  23
  2 西医对乳腺增生病的认识  23-24
    2.1 基本病因  23-24
    2.2 西医治疗本病的现状  24
  3 细胞凋亡因子BCL-2、BAX 与乳腺增生病关系的研究  24-26
    3.1 细胞凋亡的定义及意义  24-25
    3.2 BCL-2、BAX 基因的研究  25
    3.3 细胞凋亡与乳腺增生病的关系  25-26
    3.4 BCL-2、BAX 与乳腺增生病的关系  26
  4 乳块消汤组方意义及药理研究  26-29
    4.1 乳块消汤组方意义  26-27
    4.2 临床药理研究  27-29
结语  29-30
参考文献  30-32
综述  32-38
  参考文献  35-38
附录  38-40
致谢  40-41
详细摘要  41-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医妇产科 > 产科病 > 乳病
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