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Ⅳ诱导的小鼠肺炎模型（肺气虚）建立及玉屏风散干预对AQP4作用机制研究

作　者: 关艳楠
导　师: 王雪峰
学　校: 辽宁中医药大学
专　业: 中医儿科学
关键词: 玉屏风散肺气虚免疫组化 AQP4
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:本研究采用烟熏法复制小鼠肺气虚模型,在此基础上通过流感病毒诱导复制肺气虚小鼠肺炎模型。通过该复合模型的成功复制来观察玉屏风散对其作用,并通过小鼠肺组织AQP4表达量的不同,从水通道蛋白角度探讨其对肺气虚小鼠保护作用的部分可能机制,从而为玉屏风散防治肺气虚所致疾病提供实验依据。方法:1.采用烟熏法复制小鼠肺气虚模型,通过观察小鼠一般状态、肺指数及小鼠肺组织的病理变化来验证该模型。2.采用烟熏法复制小鼠肺气虚模型,然后用一定浓度的流感病毒稀释液滴鼻制备急性流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过呼吸、皮毛、饮食及体重等方面的改变,肺组织外观、肺组织病理光镜下结果及肺指数测定验证肺气虚肺炎模型。3.采用免疫组织化学技术检测正常组、模型组及玉屏风散高、中、低剂量组各组小鼠肺组织中AQP4的蛋白表达。比较各组小鼠在感染流感病毒后AQP4表达量改变情况,为玉屏风散防治肺气虚所致疾病提供实验佐证。结果:1.正常组基本保持较好状态,模型组因烟雾刺激出现呼吸、皮毛、饮食等方面的改变。烟雾刺激10天后,模型组肺组织病理及外观均出现了改变。两组小鼠肺指数比较有显著性差异(P<0.05)。2.模型组小鼠因烟雾刺激及流感病毒感染出现呼吸、皮毛、饮食及体重等方面的改变。从肺组织病理来看,正常组小鼠肺泡腔大小较一致,支气管上皮完整,管腔无分泌物,外周未见炎性细胞浸润,肺泡壁不增厚;模型组小鼠肺泡、肺泡囊、肺泡管等正常组织结构消失,肺泡间隔增厚、水肿,有大量炎细胞浸润,肺泡壁毛细血管扩张充血,有大量单核细胞浸润。3.肺指数测定结果:模型组小鼠因烟雾刺激及流感病毒感染肺脏明显充血,肺重增加,肺指数增大。正常组及模型组比较有显著差异(P﹤0.05)。4.不同时间点两组小鼠存活只数比较观察接毒后7天两组小鼠存活情况,正常组全部存活。模型组7天内共死亡4只,在第5天达到死亡高峰,与正常组比较有显著性差异(P<0.05)。5.玉屏风散高、中、低剂量均可改善小鼠一般状态,减轻肺部炎症,降低肺指数。在降低肺指数方面玉屏风散高剂量组作用优于玉屏风散中剂量组及玉屏风散低剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05);玉屏风散中剂量组与玉屏风散低剂量比较,无统计学意义(P>0.05);无统计学意义;与模型组相比,正常组及玉屏风散各组肺指数低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.肺组织AQP4蛋白表达情况正常组可检测到大量AQP4蛋白表达;模型组与正常组比较,肺组织AQP4表达明显减低,差异具有统计学意义(P<0.05);玉屏风散高剂量组、玉屏风散中剂量组、玉屏风散低剂量组AQP4表达量低于正常组,差异具有统计学意义。与模型组相比,玉屏风散各组AQP4表达量高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);玉屏风散中剂量组与玉屏风散低剂量组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:1.模型组小鼠因烟雾刺激出现呼吸、皮毛、饮食等方面的改变,肺指数、肺组织外观及肺组织病理光镜下结果表现为模型的鉴定提供了可靠的客观依据。通过烟雾刺激法可成功复制小鼠肺气虚模型,方法简便。2.模型组小鼠因烟雾刺激及流感病毒感染出现呼吸、皮毛、饮食及体重等方面的改变,肺组织外观、肺组织病理光镜下结果及肺指数测定为肺气虚肺炎模型的鉴定提供了客观依据。流感病毒鼠肺适应株滴鼻感染肺气虚小鼠可成功复制肺气虚小鼠肺炎模型。3.玉屏风散对肺气虚小鼠感染流感病毒具有保护作用,并能促使AQP4在蛋白质水平的表达,从而改善肺泡毛细血管间水的转运,保护肺组织。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
前言  9-11
文献综述  11-28
  1 临床研究进展  11-23
  2 药理研究进展  23-28
第一部分复制小鼠肺气虚模型  28-34
  1 实验材料  28
  2 实验方法  28-30
  3 结果  30-31
  分析讨论  31-33
  结论  33-34
第二部分复制 IV 诱导肺气虚小鼠肺炎模型  34-39
  1 实验材料  34
  2 实验方法  34-35
  3 结果  35-37
  分析讨论  37-38
  结论  38-39
第三部分玉屏风散对IV诱导的肺气虚小鼠肺炎模型AQP4 作用机制研究  39-47
  1 实验材料  39
  2 实验方法  39-41
  3 统计学分析  41
  4 结果  41-44
  分析讨论  44-46
  结论  46-47
参考文献  47-53
附图  53-56
致谢  56-57
个人简历  57

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