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丰白散对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠支气管肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1表达的影响

作　者: 王煜
导　师: 苏南湘
学　校: 中南大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 慢性阻塞性肺疾病丰白散基质金属蛋白酶-9 组织型金属蛋白酶抑制物-1 气道重塑
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：通过观察丰白散对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠支气管肺组织形态学及支气管肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1表达的影响,初步揭示COPD的部分发病机理和丰白散治疗COPD的作用机制,为指导临床应用和开发新药提供理论和实验依据。方法：健康雄性Wistar大鼠46只随机分为正常组和造模组。正常组不予干预正常喂养；造模组采用熏香烟加气管内滴加脂多糖方法复制COPD大鼠模型。造模完成后,再将造模组大鼠随机分成3组：模型组、沐舒坦组、丰白散组,模型组予生理盐水、沐舒坦组予盐酸氨溴索混悬液(沐舒坦)、丰白散组予丰白散混悬液灌胃各28天。取肺组织切片行苏木素-伊红(HE)染色评估大鼠支气管肺组织病理形态学改变,并采用图像分析系统测量各组大鼠支气管形态学参数(支气管管壁厚度、平滑肌层厚度)；使用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析比较各组大鼠肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1mRNA表达水平；用免疫组化法测定各组大鼠支气管肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1蛋白表达情况。结果：1.病理组织形态学改变：模型组、沐舒坦组、丰白散组大鼠支气管肺组织均出现了COPD病理学特征性改变及气道重塑表现,说明COPD大鼠模型复制成功。丰白散组、沐舒坦组大鼠COPD病理改变较模型组明显减轻。2.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)实验结果：与正常组相比,模型组大鼠肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1mRNA表达水平明显升高,有显著性差异(p<0.05)；与模型组相比,丰白散组大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1mRNA表达较之下降,有显著差异性(p<0.05)3.免疫组化法结果：与正常组相比,模型组大鼠支气管肺组织中MMP-9、TIMP-1表达明显升高,有显著性差异(p<0.05)；与模型组相比较,丰白散组大鼠支气管肺组织中MMP-9、TIMP-1表达较之下降,差异有统计学意义(p<0.05)结论：1.本实验采用熏香烟加气管内滴加脂多糖方法复制COPD大鼠模型,COPD模型大鼠出现慢性支气管炎和阻塞性肺气肿的典型病理形态学改变,说明COPD大鼠模型复制成功。2.经各组大鼠支气管形态学测量参数(支气管管壁厚度、平滑肌层厚度)比较,COPD模型大鼠该两参数明显升高,提示气道重塑形成。3.通过观察COPD模型大鼠支气管肺组织中MMP-9及TIMP-1表达水平,二者过度表达说明MMP-9/TIMP-1失衡,与气道重塑有关,证实蛋白酶-抗蛋白酶失衡是COPD形成机制之一。4.丰白散可能通过下调MMP-9.TIMP-1表达,调节MMP-9/TIMP-1失衡,进而干预气道重塑,延缓COPD进展,这可能是其治疗COPD的作用机制之一。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
英文缩略词  10-11
前言  11-13
第一章丰白散对COPD模型大鼠支气管肺组织形态学的影响  13-21
  1 实验材料与方法  13-16
  2 结果  16-19
  附图  19-21
第二章丰白散对COPD模型大鼠肺组织MMP-9及TIMP-1mRNA表达的影响  21-29
  2.1 实验材料与方法  21-26
  2.2 结果  26-28
  附图  28-29
第三章丰白散对COPD模型大鼠支气管肺组织MMP-9及TIMP-1表达的影响  29-41
  3.1 实验材料与方法  29-32
  3.2 结果  32-37
  附图  37-41
第四章讨论  41-50
  一. 慢性阻塞性肺疾病  41-42
  二. CPOD模型大鼠的建立及其可靠性的研究  42-43
  三. 蛋白酶一抗蛋白酶假说与COPD  43-46
  四. 祖国医学对COPD认识  46-47
  五. 丰白散与COPD  47-50
第五章结论  50-51
参考文献  51-55
综述  55-66
  参考文献  61-66
致谢  66-67
在读期间成绩  67

丰白散对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠支气管肺组织中MMP-9及其抑制物TIMP-1表达的影响

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