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氧化应激在腹膜纤维化模型大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用及普罗布考的干预研究

作　者: 于洁
导　师: 段绍斌
学　校: 中南大学
专　业: 肾脏内科
关键词: 腹膜纤维化大鼠腹膜间皮细胞转分化氧化应激普罗布考
分类号: R572
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

背景腹膜纤维化所致超滤衰竭是腹膜透析患者退出腹透治疗最重要的原因之一,腹膜间皮细胞向间充质细胞的转分化（Epithlial-mesenchymaltransition,EMT）是发生腹膜纤维化早期病变的关键,其特点是具有可逆性。高浓度的葡萄糖可对人腹膜间皮细胞产生氧化应激反应,促进腹膜纤维化。普罗布考具有抗炎、抗氧化、保护肾脏的作用。目的复制透析液致大鼠腹膜纤维化模型;研究氧化应激在大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用;探讨普罗布考对腹膜纤维化模型大鼠腹膜的保护作用及相关机制。方法24只SD雄性大鼠被随机分为四组,每组6只,即正常对照组、生理盐水组,、腹膜纤维化模型组、普罗布考干预组。腹膜纤维化模型组和普罗布考干预组腹腔注射100ml/kg的4.25%透析液,每日一次,生理盐水组每日按体重注射等体积的生理盐水,各组除普罗布考干预组每天喂含1%普罗布考的饲料外,其他组均喂标准大鼠饲料。腹腔注射28天后,停止注射48小时后行腹膜平衡试验,向所有大鼠体内注射4.25%透析液25ml,4小时后,准确测量透出液量并下腔静脉采血,测量透出液肌酐浓度（D）和葡萄糖浓度（D₄）、初始腹透液葡萄糖浓度（D₀）及血清肌酐浓度（P）,计算超滤量、D/Pcr、D₄/D₀和葡萄糖转运量（MTG）;留取肠系膜组织匀浆后测氧化应激指标MDA、GSH-Px:留取壁层腹膜组织做HE及Masson染色,并测量腹膜厚度;采用免疫组化法测大鼠壁层腹膜中腹膜间皮细胞转分化指标E-cadherin蛋白,α-SMA蛋白的表达。结果与正常对照组和生理盐水组比较,腹膜纤维化模型组超滤量和D₄/D₀下降,D/Pcr和MTG增加（P＜0.05）;肠系膜匀浆MDA增加,GSH-Px降低（P＜0.01）;壁层腹膜厚度增加（P＜0.001）,转分化指标α-SMA蛋白连续表达,E-cadherin蛋白消失。与腹膜纤维化模型组比较,普罗布考干预组超滤量和D₄/D₀上升,D/Pcr和MTG降低（P＜0.05）;肠系膜匀浆MDA降低,GSH-Px升高（P＜0.01）,壁层腹膜厚度降低（P＜0.001）;α-SMA蛋白不连续表达,E-cadherin蛋白部分表达。结论氧化应激在高糖腹透液诱导的大鼠腹膜间皮细胞转分化中起一定作用;普罗布考可改善腹膜纤维化模型大鼠腹膜的转运功能,部分逆转大鼠腹膜间皮细胞转分化,对腹膜纤维化模型大鼠具有一定的保护作用。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
前言  9-10
第一章材料与方法  10-17
  1.1 材料  10
  1.2 方法  10-16
  1.3 统计学处理  16-17
第二章结果  17-24
  2.1 各组大鼠体重的动态变化  17
  2.2 各组大鼠腹膜超滤和转运功能比较  17-20
  2.3 腹膜组织氧化应激水平  20-22
  2.4 腹膜组织形态学观察  22-23
  2.5 腹膜组织免疫组化表达  23-24
第三章讨论  24-28
  腹膜透析与腹膜纤维化  24-25
  氧化应激与腹膜纤维化  25-26
  氧化应激与腹膜间皮细胞转分化  26-27
  普罗布考对腹膜的保护作用  27-28
第四章结论  28-29
参考文献  29-32
附图  32-34
综述  34-47
致谢  47

氧化应激在腹膜纤维化模型大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用及普罗布考的干预研究

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