学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

中华稻蝗内生菌株SDLH抑菌蛋白作为防腐剂的可行性研究

作　者: 张迪迪
导　师: 黄登宇；宋强
学　校: 山西大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 抑菌蛋白抑菌活性细胞毒性防腐剂
分类号: TS202.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 14次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目前,利用微生物代谢产物为原料,经提取、酶法转化或者发酵等技术生产天然微生物源抗菌防腐剂日益受到人们的重视,这也很符合食品添加剂安全、高效的发展趋势,也是今后防腐剂市场的重要方向和热点。本实验室在前期研究中从中华稻蝗前肠分离出SDLH菌株,经16s rDNA等方法鉴定为肠杆菌科(Enterobacteriaceae)沙雷氏菌属(Serratia Bizio)粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),其发酵产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有较强抑制作用。本文旨在对其发酵产物中具抑菌活性的物质进行分离纯化,以期得到抑菌活性蛋白纯品,并对其理化性质和毒理性等进行研究,对其应用于食品防腐剂进行可行性分析,为进一步开发和应用奠定基础。本文采用PEG6000沉淀法提取抑菌蛋白粗品,通过DEAE-32层析、SephadexG-50层析进行分离纯化。采用抑菌圈法测定蛋白抑菌活性,Bradford法测定蛋白含量,SDS-PAGE检测蛋白纯度。结果获得电泳纯抑菌蛋白,分子量约17.0 KD。初步研究了纯品抑菌蛋白的部分理化性质。研究了温度和pH对纯品抑菌蛋白稳定性的影响,测定了抑菌蛋白的抑菌谱、最小抑菌浓度和氨基酸含量。采用MTT法对SDLH抑菌蛋白的细胞毒性进行了研究。研究了SDLH抑菌蛋白对大鼠原代肝细胞和人肝癌细胞HepG2的毒性,结果表明当SDLH抑菌蛋白的浓度高达200μg/ml时,大鼠原代肝细胞和人肝癌细胞HepG2培养48h后的细胞平均存活率分别为58.1%和65.3%,说明SDLH抑菌蛋白无明显细胞毒性。研究了SDLH抑菌蛋白代替化学防腐剂山梨酸钾在低温猪肉糜中的防腐效果。测定了猪肉糜在低温储藏期间的细菌总数和对其品质进行感官评价,显示出SDLH抑菌蛋白的防腐效果明显优于山梨酸钾,说明SDLH抑菌蛋白可以部分代替山梨酸钾应用于肉类制品的防腐中。

全文目录

中文摘要  12-13
ABSTRACT  13-15
1 文献综述  15-25
  1.1 食品添加剂在食品加工中的意义与作用  15-16
  1.2 食品防腐剂的发展趋势  16
  1.3 食品防腐剂的作用机理  16-17
  1.4 微生物源防腐剂在国内外的研究现状  17-18
  1.5 微生物源防腐剂在国内外的开发应用  18-19
  1.6 微生物源防腐剂的毒理性研究  19-21
    1.6.1 乳酸链球菌素  19
    1.6.2 曲酸  19-20
    1.6.3 ε-聚赖氨酸  20-21
    1.6.4 纳他霉素  21
  1.7 细胞毒理学的应用研究  21-22
  1.8 本文研究内容及意义  22
  参考文献  22-25
2 SDLH抑菌蛋白的分离纯化  25-38
  2.1 材料  25-27
    2.1.1 实验材料  25
    2.1.2 指示菌株  25
    2.1.3 培养基  25
    2.1.4 主要试剂与仪器  25-27
  2.2 方法与步骤  27-32
    2.2.1 菌株发酵  27
    2.2.2 抑菌蛋白提取  27
    2.2.3 DEAE-32层析  27-28
    2.2.4 Sephadex G-50层析  28-29
    2.2.5 抑菌活性测定  29
    2.2.6 蛋白含量测定  29-30
    2.2.7 蛋白纯度测定  30-32
  2.3 结果与讨论  32-35
    2.3.1 DEAE-32层析结果  32
    2.3.2 Sephadex G-50层析结果  32-33
    2.3.3 抑菌活性  33-34
    2.3.4 蛋白含量  34
    2.3.5 蛋白纯度  34-35
  2.4 小结  35-36
  参考文献  36-38
3 SDLH抑菌蛋白的理化性质  38-47
  3.1 材料  38
    3.1.1 实验材料  38
    3.1.2 指示菌株  38
    3.1.3 培养基  38
    3.1.4 主要试剂与仪器  38
  3.2 方法与步骤  38-40
    3.2.1 稳定性测定  38-39
    3.2.2 抑菌谱测定  39
    3.2.3 最小抑菌浓度测定  39-40
    3.2.4 氨基酸含量测定  40
  3.3 结果与讨论  40-45
    3.3.1 稳定性  40-42
    3.3.2 抑菌谱  42-43
    3.3.3 最小抑菌浓度  43-44
    3.3.4 氨基酸含量  44-45
  3.4 小结  45
  参考文献  45-47
4 SDLH抑菌蛋白的细胞毒性  47-52
  4.1 材料  47
    4.1.1 实验动物  47
    4.1.2 实验材料  47
    4.1.3 主要试剂与仪器  47
  4.2 方法与步骤  47-49
    4.2.1 细胞培养  47-48
    4.2.2 细胞计数  48
    4.2.3 细胞毒性  48-49
    4.2.4 形态学观察  49
  4.3 结果与讨论  49-50
    4.3.1 细胞毒性  49-50
    4.3.2 细胞产量  50
    4.3.3 形态学观察  50
  4.4 小结  50
  参考文献  50-52
5. SDLH抑菌蛋白与山梨酸钾在猪肉糜中的防腐实验  52-57
  5.1 材料  52
    5.1.1 实验材料  52
    5.1.2 主要试剂及仪器  52
  5.2 方法与步骤  52-53
    5.2.1 工艺流程  52
    5.2.2 防腐剂配方  52-53
    5.2.3 细菌总数测定  53
    5.2.4 感官评价  53
  5.3 结果与讨论  53-55
    5.3.1 细菌总数  53-54
    5.3.2 感官评价  54-55
  5.4 小结  55
  参考文献  55-57
6. 结论与工作展望  57-60
  6.1 结论  57-58
  6.2 工作展望  58-60
专有名词  60-62
略语表  62-63
发表论文目录  63-64
致谢  64-65
个人简况及联系方式  65-67

中华稻蝗内生菌株SDLH抑菌蛋白作为防腐剂的可行性研究

内容摘要

全文目录

相似论文