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实时荧光定量PCR检测骨性关节炎（OA）病人膝关节液中microRNA-140（miR-140）的表达

作　者: 张明
导　师: 肖涛
学　校: 中南大学
专　业: 外科学
关键词: 骨性关节炎膝关节液 microRNA 实时荧光定量PCR miR-140
分类号: R684.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：检测不同分级骨性关节炎病人膝关节液中miR-140的表达水平,为进一步研究miR-140在骨性关节炎发生、发展中的作用提供理论依据。材料与方法：应用茎-环状逆转录引物实时荧光定量PCR(stem-loop RT-qPCR,TaqMan探针法)检测骨性关节炎病人和非骨性关节炎病人膝关节液中miR-140的表达水平。收集骨性关节炎病人膝关节液40例(依据Kellgren和Lawrence的X线诊断标准,Ⅰ级10例；Ⅱ级10例；Ⅲ级10例；Ⅳ级10例),非骨性关节炎膝关节液20例(半月板损伤、交叉韧带损伤、外伤)。以U6 snRNA为内参,检测miR-140在膝关节液中的表达水平。分析骨性关节炎的严重程度与miR-140的表达水平之间的关系。所有资料应用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,以a=0.05作为检验标准。结果：1. miRNA-140在所有关节液标本中都能检测到。2.与非骨性关节炎比较,miR-140在骨性关节炎病人膝关节液中的表达水平下调,P<0.05。3.Ⅳ级组miR-140的表达水平与Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组有差异,P<0.05；骨性关节炎的严重程度与miR-140的表达水平呈负相关,r=-0.917。结论：1.人膝关节液中存在miR-140并且可以方便的应用实时荧光定量PCR进行检测。2.miR-140在骨性关节炎病人膝关节液中的表达水平下调,且与骨性关节炎的严重程度呈负相关,可能与骨性关节炎的发生、发展有关,为潜在的诊断预警分子靶标。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
英文缩略词表  9-10
第一章前言  10-12
第二章材料和方法  12-17
  1. 材料及分组  12
  2. 主要仪器设备及试剂  12-13
  3. 实验步骤和原理  13-16
  4. 数据处理及统计学分析  16-17
第三章结果  17-20
第四章讨论  20-25
第五章结论  25-26
参考文献  26-29
附图  29-30
综述  30-46
  参考文献  40-46
致谢  46-48
读研期间发表的论文及研究成果  48

实时荧光定量PCR检测骨性关节炎（OA）病人膝关节液中microRNA-140（miR-140）的表达

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