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雌激素对白假丝酵母菌HWP1基因表达的影响

作　者: 孟伟伟
导　师: 刘小平
学　校: 汕头大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 白假丝酵母菌雌激素 HWP1
分类号: R711.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 43次
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内容摘要

背景外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)是一种常见的妇女疾病,据资料统计,至少有75%的妇女一生中至少罹患过一次该病。复发性外阴阴道念珠菌病(Recurrent vulvlvaginal candidiasis,RVVC)指一年中发生4次或以上的外阴阴道念珠菌病。白假丝酵母菌是引起该病的主要病原,其致病机制主要包括黏附、利于侵入的酶以及表型转换等。阴道内的假丝酵母菌克隆性增生与患者年龄、雌激素的影响、妊娠、疾病所致的易感性有关,现已明确白假丝酵母菌引起的感染经常与性激素的存在有关。雌激素与白假丝酵母菌感染关系的研究很多,它可通过改变机体的免疫状态、影响细菌的毒力、改变阴道内环境等方面影响外阴阴道念珠菌病的发生。白假丝酵母菌菌丝壁蛋白1(HWP1)是已知的白假丝酵母菌芽管和菌丝的特异性蛋白之一,因其在假丝酵母菌的黏附过程中起重要作用而成为近年来的研究热点。目前在我国对HWP1基因的研究相对较少,为此我们进行了下列研究。目的探讨雌激素对白假丝酵母菌毒力基因HWP1表达的影响,从而明确雌激素对白假丝酵母菌致病力的影响。材料、方法1.不同浓度雌激素对白假丝酵母菌的影响临床标本收集:临床标本采集时间为2009年1月～2009年12月,北京大学深圳医院妇科门诊VVC患者阴道分泌物标本,筛选除外肿瘤、妊娠、糖尿病等伴VVC患者,经镜检假菌丝阳性且分离出假丝酵母菌,鉴定分离菌株。随机选取33株白假丝酵母菌(其中5株为RVVC患者,28株为VVC患者)分别加入空白对照、10-6M、10-7 M、10-8 M的雌激素于YPD培养基,35℃,160rpm,震荡培养24小时。2. HWP1基因检测收集经不同浓度雌激素培养的各菌株的菌液,提取其RNA,进行RT-PCR(白假丝酵母菌管家基因ACT1作为内参),并对结果进行统计分析。结果根据对HWP1m RNA RT-PCR结果的统计学分析得出:1. 10-6M组比10-8 M组及空白对照组的HWP1表达量显著升高,差异(P<0.01)有极显著的统计学意义,10-6M组比10-7 M组HWP1表达量相对升高,差异(P<0.05)有统计学意义。2. 10-7 M组比10-8 M组及空白对照组的HWP1表达量显著升高,差异(P<0.01)有极显著的统计学意义。3. 10-8M组比空白对照组的HWP1表达量相对升高,差异(P<0.05)有统计学意义。4.同一雌激素浓度下各菌株间HWP1表达量差异(P>0.05)无统计学意义。结论1 HWP1的表达量随着雌激素的浓度升高(10-8 M、10-7 M、10-6M)而增加,说明雌激素能够促进HWP1基因的表达,从而能够提高白假丝酵母菌的致病性,提高外阴阴道念珠菌病的发病率。2同一雌激素浓度下各菌株之间HWP1的表达量差异(P>0.05)无统计学意义。

全文目录

中文摘要  3-5
ABSTRACT  5-7
英文缩略词  7-9
前言  9-12
材料与方法  12-19
  1 不同浓度雌激素对白假丝酵母菌的影响  12-13
  2 HPW1 基因检测  13-19
结果  19-24
  1 菌株总RNA 纯度鉴定  19
  2 HWP1 基因的表达  19-21
  3 白假丝酵母菌 HWP1 基因检测的△CT 值  21-22
  4 各组之间结果的统计学分析比较  22-24
讨论  24-27
  1 雌激素对外阴阴道念珠菌病的影响  24
  2 HWP1 对白假丝酵母菌致病力的影响  24-26
  3 雌激素对 HWP1 表达的影响  26-27
结论  27-28
参考文献  28-31
文献综述  31-40
  参考文献  37-40
致谢  40-41
个人简历表  41

雌激素对白假丝酵母菌HWP1基因表达的影响

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