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母鼠孕前应激对新生子代血皮质醇水平及海马NCAM表达的影响

作　者: 陈利琴
导　师: 史雪川
学　校: 汕头大学
专　业: 儿科学
关键词: SD大鼠 妊娠前 CUS 子鼠 皮质醇 NCAM
分类号: R714.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


背景目的母妊娠各期接受慢性不可预见性应激(chronic unpredictable stress,CUS)将使胎儿血中皮质醇水平升高,而胎儿暴露于高水平的皮质醇环境中会导致大脑的组织结构及分子生物学异常,其结果是子代出生后出现认知和行为障碍。但是,目前有关研究还主要局限于妊娠期间母源性CUS对子代神经发育的影响,对于妊娠前母经历CUS后短时间受孕是否会产生同样的结果,还知之甚少。因此,本研究以SD大鼠为实验动物,观察孕前不同时期母鼠接受CUS后受孕所生子鼠7日龄时的血清皮质醇水平和海马神经细胞粘附因子(neural cell adhesion molecule,NCAM)的表达,以此探讨母孕前CUS是否会对子代血皮质醇水平产生影响、及与大脑分子生物学异常的关系。材料和方法经开场实验和糖水消耗实验筛选出自主行为正常的雌性SD大鼠27只,随机取15只使用11种刺激方法经21天应激建立CUS母鼠模型,另12只则为正常对照母鼠。CUS模型母鼠以每组5只让其在应激后马上、应激后1周和应激后2周与雄鼠合笼喂养。根据合笼时间把CUS母鼠分为CUS1组、CUS2组和CUS3组;正常对照母鼠则按每4只为一组,以与CUS母鼠相对应的与雄鼠合笼时间分为正常对照1组(C1组)、正常对照2组(C2组)和正常对照3组(C3组)。然后再根据母鼠所属分组,把CUS1组母鼠应激后3-5天受孕所产子鼠对应分为CUS1子鼠组,把CUS2组母鼠应激后10-12天受孕所产子鼠分为CUS2子鼠组,把CUS3组母鼠应激后17-19天受孕所产子鼠分为CUS3子鼠组。按与各CUS母鼠组相对应的受孕时间把正常对照组母鼠所生子鼠分为C1子鼠组、C2子鼠组、C3子鼠组。各子鼠组与对应的母鼠组同笼喂养至7日龄时,每组随机选同日龄雌子鼠8只、雄子鼠7只,将其断头取血,检测血清皮质醇水平;同时取脑分离海马,然后固定包埋,制成石蜡切片,用免疫组化SABC法检测海马NCAM的表达。结果1.母鼠的自主行为评估在开场实验中,15只CUS母鼠在建立CUS模型前的总路程、周边路程和中央路程与12只正常对照母鼠比,均无显著差异(P>0.05);在建立CUS模型后,15只CUS母鼠的三项指标较12只正常对照明显减少(P<0.01),而且建立CUS模型后三项指标亦均短于自身模型建立前(P<0.01)。在糖水消耗试验中,15只CUS母鼠在建立CUS模型前总耗液量、糖水消耗量和糖水偏爱率与12只正常对照母鼠比,均无明显差异(P>0.05);在建立CUS模型后,15只CUS母鼠的糖水消耗量及糖水偏爱率明显低于12只正常对照和自身模型建立前(P<0.01);总液体消耗量则无差异(P>0.05)。2. CUS子鼠血清皮质醇检测结果血清皮质醇浓度在CUS1子鼠组与C1子鼠组分别为(117.64±30.84)ng/ml和(83.68±36.63)ng/ml,CUS1子鼠组高于C1子鼠组(P<0.05);CUS2子鼠组与C2子鼠组分别为(108.04±30.84)ng/ml和(82.84±28.14)ng/ml,CUS2子鼠组亦高于C2子鼠组(P<0.05);CUS3子鼠组与C3子鼠组分别为(106.30±30.56)ng/ml和(86.62±28.91)ng/ml,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。3.子鼠海马的NCAM表达CUS1子鼠组、CUS2子鼠组和CUS3子鼠组平均光密度值分别为0.014±0.010、0.072±0.011和0.218±0.090;C1子鼠组、C2子鼠组、和C3子鼠组分别为0.223±0.069、0.226±0.081和0.223±0.080,CUS1子鼠组明显低于C1子鼠组、CUS2子鼠组明显低于C2子鼠组(P<0.01),而CUS3子鼠组与C3子鼠组间无显著差异(P>0.05)。此外, CUS1子鼠组、CUS2子鼠组海马的NCAM表达较CUS3组明显下调,且下调强度CUS1子鼠组>CUS2子鼠组,CUS1、CUS2和CUS3子鼠组间NCAM的平均光密度值亦有显著差异(P<0.01)。结论1.在开场实验中,母鼠孕前接受CUS后活动度下降,对环境的好奇程度下降,表现出抑郁行为;蔗糖水消耗实验则显示,经历CUS的母鼠对奖赏的敏感性降低,快感缺失。因此,本研究成功建立了孕前CUS母鼠模型。2.CUS1和CUS2子鼠组7日龄时的血皮质醇水平明显高于对应的C1和C2对照组,可见母鼠孕前接受CUS后短期受孕将使子鼠暴露于高水平的皮质醇环境中,影响子鼠的大脑发育。3.母鼠孕前接受CUS后短期受孕使子鼠出生后NCAM表达下调,而且母鼠接受CUS后越早受孕,子鼠的NCAM表达异常越明显。子鼠的NCAM表达与皮质醇水平呈负相关,亦可导致子鼠的神经行为发育异常。

全文目录


中文摘要  3-5
英文摘要  5-9
英文缩略词表  9-11
第1章 前言  11-13
第2章 材料与方法  13-22
  2.1 实验材料  13-15
  2.2 实验方法  15-20
  2.3 数据统计及处理  20-22
第3章 结果  22-33
第4章 讨论  33-36
第5章 结论与展望  36-37
第6章 参考文献  37-41
文献综述  41-52
致谢  52-53
个人简历  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 产科学 > 病理妊娠（异常妊娠）
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