学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

雌激素对成骨细胞小凹蛋白-1表达的影响及其作用

作　者: 易福东
导　师: 尹东
学　校: 南昌大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: MC3T3-E1 Caveolin-1 成骨细胞雌激素分化期
分类号: Q57
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 68次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:观察雌激素对不同阶段成骨细胞中caveolin-1(小凹蛋白-1)表达的影响,并研究caveolin-1在雌激素调节成骨细胞分化成熟过程中的作用。方法:将雌激素分别作用于增殖期(第2天)、分化期(第6天)、矿化期(第12天)的成骨细胞(MC3T3-E1)48小时,采用western blotting方法观察caveolin -1蛋白表达变化。对于分化期MC3T3-E1细胞,采用caveolin-1真核表达质粒Pcl-neo-cav-1上调caveolin-1表达后,观察其对雌激素调节成骨细胞代谢作用的影响,观察指标分别为细胞裂解液ALP活性(PNPP法)、培养上清骨钙素浓度(ELISA)以及成骨细胞特异性分化因子cbfa-1mRNA表达水平(RT-PCR)。最后,通过检测细胞培养基一氧化氮水平,探索caveolin-1作用机制。结果:1.雌激素可剂量依赖下调分化期MC3T3-E1细胞caveolin-1蛋白表达,对增殖期、矿化期细胞无明显影响。2.雌激素可升高分化期MC3T3-E1细胞ALP的活性、培养基骨钙素浓度,上调cbfa-1mRNA表达。转染caveolin-1真核表达质粒Pcl-neo-cav-1取消上述雌激素作用( P<0.01)。各处理组中一氧化氮浓度无明显改变。结论:对分化期成骨细胞MC3T3-E1,Caveolin-1可负性调控雌激素的促分化作用,该作用不涉及一氧化氮途径。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
第1章前言  8-10
第2章材料与方法  10-20
  2.1 实验材料  10-12
    2.1.1 实验用细胞株  10
    2.1.2 主要试剂和产地  10-12
    2.1.3 仪器设备和产地  12
  2.2 实验步骤  12-20
    2.2.1 常用试剂的配制  12-14
    2.2.2 MC3T3-E1 细胞cav-1 蛋白表达检测  14-17
    2.2.3 Western blotting 法检测MC3T3-E1 中caveolin-1 的表达  17-19
    2.2.4 分化期 MC3T3-E1 细胞碱性磷酸酶(ALP) 活性测定  19
    2.2.5 MC3T3-E1 分化期细胞骨钙素（OCN）检测  19
    2.2.6 MC3T3-E1 分化期一氧化氮（NO）检测  19-20
第3章结果  20-26
  3.1 观察雌激素对不同生长阶段成骨细胞（MC3T3-E1）caveolin-1 表达的影响  20-22
  3.2 caveolin-1 真核表达质粒对雌激素作用的影响  22-26
第4章讨论  26-28
第5章结论  28-29
致谢  29-30
参考文献  30-32
综述  32-39

雌激素对成骨细胞小凹蛋白-1表达的影响及其作用

内容摘要

全文目录

相似论文