学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

ABCG2在慢性髓性白血病格列卫耐药细胞中的表达及甲基化的研究

作　者: 胡润红
导　师: 陈方平
学　校: 中南大学
专　业: 内科学
关键词: 慢性髓性白血病格列卫乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2) 甲基化
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 30次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

研究背景和目的：慢性髓性白血病(CML)是造血干细胞恶性克隆的增殖性疾病,它的典型遗传学特征为费城染色体[t(9；22)(q34；q11)]及BCR/ABL融合基因的形成。BCR/ABL融合蛋白具有持续性酪氨酸激酶的活性,是CML发病的关键因素。格列卫是目前公认的比较理想的靶向治疗CML的小分子药物,但由于对格列卫产生的耐药,严重影响了CML的治疗效果,因此目前急需解决格列卫耐药的问题。尽管格列卫耐药主要是由BCR/ABL所引起,但有研究表明它与膜转运蛋白也有密切关系,乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)是ABC家族新发现的成员,有研究提示可能与格列卫耐药有关。在ABCG2的启动子区域含有大量的CpG岛,推测ABCG2的表达很可能受到甲基化的调控。目前关于ABCG2基因表达与甲基化调控的研究较少,尤其在慢性髓性白血病中的研究不多。本研究立足于慢性髓性白血病细胞株K562及对格列卫耐药的慢性髓性白血病细胞株K562/Glv,在体外水平研究ABCG2在基因及蛋白水平的表达与启动子区甲基化的关系,为格列卫耐药寻求新的思路,从而提高患者的治疗效果。方法：①常规培养K562及K562/Glv细胞,用SYBR Green Real-Time PCR及流式细胞学分别检测两种细胞中ABCG2 mRNA及蛋白的表达,用MSP检测ABCG2启动子区甲基化的状态②将两种细胞培养在10μmol/l的5-氮杂胞苷中,72小时后,用SYBR Green Real-Time PCR及流式细胞学分别检测两种细胞中ABCG2 mRNA及蛋白的表达,用MSP检测ABCG2启动子区甲基化的状态。结果：①ABCG2 mRNA在K562/Glv细胞中的表达明显高于K562细胞(P<0.01)；ABCG2蛋白低表达于K562[(1.953±0.252)%]及K562/Glv[(1.383±0.259)%]细胞；ABCG2启动子区在K562及K562/Glv细胞中均呈完全甲基化状态。②在5-氮杂胞苷处理后,在K562细胞中ABCG2启动子区呈完全非甲基化状态,且ABCG2 mRNA及蛋白表达较前均明显增高(P<0.01)。③在5-氮杂胞苷处理后,在K562/Glv细胞中ABCG2启动子区呈部分非甲基化,且ABCG2 mRNA及蛋白表达较前有所升高,但前后相比无统计学意义(P>0.05)。④在5-氮杂胞苷处理后,K562细胞ABCG2启动子区甲基化水平低于K562/Glv细胞(P<0.05),且K562细胞中ABCG2 mRNA及蛋白表达均高于K562/Glv细胞(P<0.05)。结论：本研究结果表明：①ABCG2的表达与慢性髓性白血病格列卫耐药可能有一定的关系,且ABCG2基因的表达至少部分受启动子区甲基化的调控。②ABCG2蛋白的表达与mRNA的转录水平及转录后的调节有关。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
符号说明  10-11
前言  11-15
第一章材料与方法  15-25
  1.1 材料  15-17
  1.2 实验方法  17-24
  1.3 统计学分析  24-25
第二章结果  25-30
  2.1 ABCG2 mRNA的表达  25-27
  2.2 ABCG2蛋白的表达  27-28
  2.3 ABCG2启动子区特异位点甲基化的状态  28-30
第三章讨论  30-34
第四章结论  34-35
参考文献  35-39
综述  39-55
  参考文献  46-55
致谢  55

ABCG2在慢性髓性白血病格列卫耐药细胞中的表达及甲基化的研究

内容摘要

全文目录

相似论文