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具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性的牛乳蛋白的研究

作　者: 康慧
导　师: 许美玉
学　校: 北京林业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 幽门螺旋杆菌 黏附性 血凝抑制试验 高分子量乳清蛋白
分类号: TS252.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 63次
引　用: 1次
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内容摘要


幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori,Hp）是与慢性B型胃炎、消化性溃疡以及胃癌的发生密切相关的革兰氏阴性菌。幽门螺旋杆菌的黏附过程是其致病的关键,目前认为使用抗粘附物质是治疗幽门螺旋杆菌对组织感染的有效方法。近年来关于牛乳具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性已有报道,但是有关牛乳具体有效活性成分方面的研究还是一个空白。本项研究的目的是从牛乳中探索出具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用的有效活性成分。本项研究以血凝抑制试验结果为指标,利用超滤、凝胶过滤层析、SDS-聚丙烯酰胺电泳、MALDI-TOF-MS及其它生物化学技术,研究牛乳中各种成分对幽门螺旋杆菌粘附性的影响,确定并分离具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用的有效活性成分,并对活性成分的结构进行初步分析。本项研究主要结果如下:1)用血凝抑制试验,研究牛乳中各种成分对幽门螺旋杆菌粘附性的影响,结果发现高分子量乳清蛋白浓缩物（HWPC）具有抑制螺旋杆菌血凝作用。2)用凝胶过滤层析法按分子量大小依次将HWPC分为F1、F2、F3三个组份,仅F2组份显示血凝抑制作用,且血凝抑制效价为1∶16,最低有效抑制活性浓度为2mg/ml。3)F2组分经MALDI-TOF-MS及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,F2组份的分子量在73 KDa到164 KDa之间,其主要成分是由分子量为14 KDa及18 KDa亚基形成的多聚体蛋白。以上结果表明,以特定形式存在的高分子量乳清蛋白具有抑制幽门螺旋杆菌黏附性作用。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-5
目录  5-8
1 引言  8-24
  1.1 幽门螺旋杆菌简介及其研究进展  8-15
    1.1.1 幽门螺旋杆菌的发现及意义  8-9
    1.1.2 幽门螺旋杆菌的生物学性状  9-10
    1.1.3 幽门螺旋杆菌的致病性及危害  10-12
    1.1.4 幽门螺旋杆菌的感染及其致病机制  12-14
    1.1.5 幽门螺旋杆菌感染的诊断及治疗  14-15
  1.2 蛋白质对幽门螺旋杆菌的粘附性抑制作用  15-19
    1.2.1 胃粘蛋白对幽门螺旋杆菌的抑制作用  16-17
    1.2.2 牛乳蛋白对幽门螺旋杆菌的抑制作用  17-19
  1.3 牛乳蛋白简介及研究进展  19-23
    1.3.1 牛乳蛋白的分类  19-22
    1.3.2 研究牛乳蛋白的意义  22-23
  1.4 本论文主要研究的目的及意义  23-24
2 幽门螺旋杆菌的培养与鉴定保存  24-31
  2.1 材料和方法  24-26
    2.1.1 材料  24
    2.1.2 主要仪器设备  24
    2.1.3 方法  24-26
  2.2 结果与讨论  26-29
    2.2.1 幽门螺旋杆菌的培养  26-27
    2.2.2 幽门螺旋杆菌鉴定  27-29
    2.2.3 幽门螺旋杆菌的保存  29
  2.3 结论  29-31
3 高分子量乳清蛋白具有抑制幽门螺旋杆菌血凝作用  31-39
  3.1 材料和方法  31-35
    3.1.1 材料  31
    3.1.2 仪器设备  31
    3.1.3 方法  31-35
  3.2 结果与讨论  35-38
    3.2.1 牛乳、酪蛋白、乳清对幽门螺旋杆菌血凝作用的影响  35-36
    3.2.2 乳清蛋白对幽门螺旋杆菌血凝作用的影响  36-37
    3.2.3 高分子量乳清蛋白浓缩物对幽门螺旋杆菌具有血凝抑制作用  37-38
  3.3 结论  38-39
4 分离抑制幽门螺旋杆菌血凝作用的活性乳清蛋白  39-44
  4.1 材料和方法  39-41
    4.1.1 材料  39
    4.1.2 主要仪器设备  39
    4.1.3 方法  39-41
  4.2 结果与讨论  41-43
    4.2.1 凝胶过滤层析法分离高分子量乳清蛋白浓缩物  41-42
    4.2.2 HWPC的凝胶过滤层析分离组分对幽门螺旋杆菌的血凝抑制结果  42-43
    4.2.3 活性F_2组分的最低有效活性浓度  43
  4.3 结论  43-44
5 抑制幽门螺旋杆菌血凝作用的活性乳清蛋白初步分析  44-50
  5.1 材料和方法  44-46
    5.1.1 材料  44
    5.1.2 主要仪器设备  44
    5.1.3 方法  44-46
  5.2 结果与讨论  46-49
    5.2.1 F_2组分MALDI-TOF-MS分析  46-48
    5.2.2 F_2组分的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳  48-49
  5.3 结论  49-50
6 糖基化和凝聚处理对幽门螺旋杆菌血凝作用的影响  50-56
  6.1 材料和方法  50-52
    6.1.1 材料  50
    6.1.2 主要仪器设备  50
    6.1.3 方法  50-52
  6.2 结果与讨论  52-55
    6.2.1 WPI糖基化后对幽门螺旋杆菌的血凝抑制结果  52-54
    6.2.2 LWPC凝聚处理后对幽门螺旋杆菌的血凝抑制结果  54-55
  6.3 结论  55-56
7 结论与展望  56-59
  7.1 结论  56-57
    7.1.1 幽门螺旋杆菌的培养与保存  56
    7.1.2 高分子量乳清蛋白具有抑制幽门螺旋杆菌血凝作用  56
    7.1.3 抑制幽门螺旋杆菌血凝作用的活性乳清蛋白的分离  56
    7.1.4 抑制幽门螺旋杆菌血凝作用的活性乳清蛋白初步分析  56-57
    7.1.5 糖基化和凝聚处理对幽门螺旋杆菌血凝作用的影响  57
  7.2 本研究的创新点  57
  7.3 展望  57-59
参考文献  59-64
个人简介  64-65
导师简介  65-66
致谢  66

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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 乳品加工工业 > 基础科学
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