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重组腺病毒介导RhoA、RhoC基因串联干扰RNA对人大肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

作　者: 王宗宝
导　师: 王海波
学　校: 青岛大学
专　业: 外科学
关键词: RhoA RhoC 干扰RNA 腺病毒裸鼠大肠癌移植瘤
分类号: R735.34
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的研究重组腺病毒介导RhoA、RhoC基因串联干扰RNA对人大肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法复苏人大肠癌HCT116细胞并进行传代,培养足量HCT116细胞后,接种入裸鼠皮下,建立人大肠癌HCT116细胞裸鼠移植瘤模型。将21只成瘤裸鼠随机分为三组,分别为:携带RhoA、RhoC基因串联干扰RNA的重组腺病毒组(记为:Ad-RhoAC组)、携带任意RNA片段的重组腺病毒组(记为:Ad-HK组)、生理盐水组(记为:NS组)。对三组裸鼠瘤体内定时、定量多点注射相应干扰物质(即Ad-RhoAC组注射携带RhoA、RhoC串联干扰RNA的重组腺病毒;Ad-HK组注射携带任意RNA片段的重组腺病毒;NS组注射生理盐水)进行治疗,定期观察裸鼠移植瘤体积大小变化,比较治疗末三组裸鼠移植瘤体积大小有无差别。计算三组裸鼠移植瘤体积增大率及抑瘤率,比较三组有无差别。治疗末处死裸鼠,解剖出移植瘤后称量,比较三组裸鼠移植瘤重量有无差别。结果Ad-RhoAC组、Ad-HK组和NS组治疗末裸鼠移植瘤平均体积分别为(441.38±63.03)mm~3、(678.81±155.39)mm~3和(699.62±190.56)mm~3;移植瘤体积平均增大率分别为(2.38±0.56)、(4.58±0.94)和(5.05±0.48);移植瘤平均重量分别为(0.36±0.13)g、(0.78±0.22)g和(0.75±0.22)g。Ad-RhoAC组治疗末裸鼠移植瘤平均体积、体积平均增大率及平均重量与NS组比较差异均有显著性(P＜0.05);与Ad-HK组比较差异也均有显著性(P＜0.05)。Ad-HK组和NS组治疗末裸鼠移植瘤平均体积、体积平均增大率及平均重量比较差异无显著性(P＞0.05)。Ad-RhoAC组肿瘤生长受到明显抑制,抑瘤率为44.38%,明显高于Ad-HK组和NS组。结论重组腺病毒介导RhoA、RhoC基因串联干扰RNA对人大肠癌细胞裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用。

全文目录

摘要  2-3
Abstract  3-5
引言  5-7
第一章人大肠癌HTC1l6接种细胞的制备  7-12
  1.1 实验目的、原理、设计及材料  7-8
  1.2 实验步骤  8-12
    1.2.1 实验前准备  8
    1.2.2 细胞培养液的配制与分装  8
    1.2.3 胰酶的配制  8
    1.2.4 细胞复苏  8-9
    1.2.5 细胞培养  9-10
    1.2.6 细胞传代  10
    1.2.7 细胞收集  10-12
第二章裸鼠实验  12-22
  2.1 资料和方法  12-13
  2.2 裸鼠成瘤预实验  13-14
  2.3 裸鼠成瘤实验  14-15
  2.4 人大肠癌HCT116细胞裸鼠移植瘤瘤体干扰试验  15-22
第三章讨论  22-26
结论  26-27
参考文献  27-29
综述及参考文献  29-47
  综述一 Rho亚家族与肿瘤关系的研究进展  29-36
  综述二腺病毒载体的研究现状  36-40
  综述三 RNA干扰及其在医学研究中应用的进展  40-47
攻读学位期间的研究成果  47-48
附录  48-49
致谢  49-51

重组腺病毒介导RhoA、RhoC基因串联干扰RNA对人大肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

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