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大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素对三叉神经节的影响

作　者: 李超
导　师: 姜晓钟；赵云富；吴洋；马蓓
学　校: 第二军医大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 阿霉素高渗盐水自体荧光神经外膜节细胞总数异常节细胞率
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

阿霉素是一种经典的抗肿瘤药物,并可通过逆轴突运输发挥对神经元的毒性作用。由于存在这一特性,临床上已开始用阿霉素局部神经干注射治疗三叉神经痛,这种治疗方法虽效果尚可,但需手术暴露神经干,具一定创伤性。而神经干周围注射阿霉素后可产生何种病理变化,国内外少见研究。本实验模拟临床上经皮穿刺未刺中神经干的情况,将阿霉素和高渗盐水的复合溶液注射到大鼠眶下孔内神经干的周围,通过观察三叉神经节的荧光表达和节细胞的病理改变,探讨经皮穿刺注射高渗盐水阿霉素溶液治疗一些神经源性疾病的可行性。第一部分大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后三叉神经节内的荧光表达目的观察大鼠眶下神经周围注射高渗盐水阿霉素(10:1)的混合溶液后,神经干及三叉神经节内阿霉素自体荧光的表达及其时相变化。方法将含10%NaCl和1%阿霉素的混合溶液(A组)或单纯10%NaCl(B组)注入大鼠眶下孔,给药后于10h、20h、2d、4d、7d和10d分别观察神经组织内阿霉素荧光表达。给药后每日观察大鼠须垫部的感觉功能变化。结果眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素溶液后10h、20h、2d,神经外膜呈现连续强阳性荧光表达,神经干和三叉神经节内荧光表达呈上升趋势,2d到达高峰,随后下降,至10d消失。A组对照侧、B组三叉神经节及所有动物的下颌神经、眼神经前根纤维及后根均未见荧光表达。结论大鼠眶下孔内注射高渗盐水阿霉素后,可在三叉神经节前外侧区见到神经细胞内的荧光表达。神经节细胞的荧光表达是阿霉素破坏神经节细胞的必要前提,经皮穿刺注射高渗盐水阿霉素有望替代神经干注射阿霉素,成为治疗三叉神经痛的可选方法。第二部分三种不同方法注射阿霉素后大鼠三叉神经节细胞病理改变的对比研究目的比较三种不同方法注射阿霉素后,大鼠三叉神经功能和三叉神经节细胞病理形态的变化,探讨眶下神经周围(眶下孔)注射高渗盐水阿霉素治疗三叉神经痛的可行性。方法96只SD大鼠,随机分为A、B、C、D四组,每组24只,每组又分四个时间点:1周组(A1～D1组),2周组(A2～D2组),1月组(A3～D3组),3月组(A4～D4组)取材,每时间点6只大鼠。将A～D组分别给予10%NaCl和1%阿霉素的混合溶液10μl眶下孔注射(A组),1%阿霉素的生理盐水溶液10μl眶下神经干注射(B组),1%阿霉素的生理盐水溶液10μl眶下孔注射(C组),生理盐水10μl眶下孔注射(D组)每组给药后于1周、2周、1月及3月时测试各组剩余大鼠的触须垫感觉功能,后处死取三叉神经节标本,制作HE染色切片,分别观察神经节细胞的形态学变化,用等距随机抽样法记录节细胞总数及异常节细胞率。结果各组动物感觉功能测试,A、B组同时间点相比无统计学差异(P>0.05),A、B组与C、D组同时间点分别比较,均有统计学差异(P<0.01),眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素溶液后A1～A4组节细胞总数呈递减趋势(同组各时间点分别比较,P<0.01),显著低于C、D组同时间点(P<0.01),而与B组同时间点相比,除1周组外,其余时间组比较无统计学差异(P>0.05);异常节细胞率A1～A4组呈递增趋势(A组各时间点相比,P<0.01),显著高于C、D组同时间点(P<0.01),而与B组同时间点相比,无统计学差异(P>0.05)。结论大鼠眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素后,阿霉素可在高渗盐水的作用下被神经纤维大量吸收并进一步逆行运输到三叉神经节,引起节细胞的坏死。眶下孔注射高渗盐水阿霉素可产生与眶下神经干注射阿霉素相当的效果,并且疗效优于眶下孔注射同浓度阿霉素生理盐水溶液的效果。

全文目录

中文摘要  8-10
英文摘要  10-13
缩略语中英文对照表  13-15
前言  15-17
第一部分大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后三叉神经节的荧光表达  17-28
  1. 材料和方法  17-21
    1.1 材料  17-18
      1.1.1 实验仪器和试剂  17-18
      1.1.2 实验用药  18
    1.2 实验分组  18-19
    1.3 术前准备  19
      1.3.1 药物配制  19
      1.3.2 器械准备  19
    1.4 手术方法  19
    1.5 感觉测试  19-20
    1.6 标本取材  20
    1.7 切片制作  20
    1.8 观察指标  20-21
      1.8.1 肉眼观察  20
      1.8.2 荧光观察  20-21
    1.9 荧光表达的判别标准  21
  2. 结果  21-25
    2.1 大体观察及感觉测试  21
    2.2 标本肉眼观察  21
    2.3 荧光观察结果  21-25
  3. 讨论  25-28
第二部分三种不同方法注射阿霉素后大鼠三叉神经节细胞病理改变的对比研究  28-46
  1. 材料和方法  28-33
    1.1 材料  28-30
      1.1.1 实验动物  28
      1.1.2 实验仪器和试剂  28-29
      1.1.3 实验用药  29-30
    1.2 实验分组  30
    1.3 术前准备  30
      1.3.1 药物配制  30
      1.3.2 器械准备  30
    1.4 手术方法  30-31
    1.5 感觉测试  31
    1.6 标本取材  31
    1.7 切片制作  31
    1.8 观察指标  31-32
      1.8.1 肉眼观察  31-32
      1.8.2 组织病理观察（光镜观察）  32
      1.8.3 节细胞计数及异常节细胞率的计算  32
    1.9 统计学处理  32-33
  2. 结果  33-41
    2.1 感觉测试  33-35
    2.2 肉眼观察  35-36
    2.3 光镜观察  36-39
    2.4 各组节细胞总数和异常节细胞率的比较  39-41
  3. 讨论  41-46
    3.1 实验方法的确定  41-42
    3.2 高渗盐水(10%氯化钠)对大鼠眶下神经的影响  42-43
    3.3 高渗盐水阿霉素混和溶液的作用特点  43-44
    3.4 高渗盐水阿霉素眶下孔注射后三叉神经节的顺时变化  44-45
    3.5 经皮穿刺注射高渗盐水阿霉素溶液的临床应用前景  45-46
全文总结  46-48
参考文献  48-55
文献综述一  55-65
文献综述二  65-77
攻读硕士学位期间发表论文  77-78
致谢  78-80

大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素对三叉神经节的影响

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