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生物玻璃/P-15复合骨替代材料的实验研究

作　者: 王帅
导　师: 周延民
学　校: 吉林大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 骨髓基质细胞 生物玻璃 P-15 多肽
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 38次
引　用: 1次
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内容摘要


目前,已经有许多生物活性蛋白与各类支架材料复合来提高人工骨材料成骨能力的研究报道,但是蛋白质和支架材料的吸附与缓释是一个复杂的过程,重组蛋白的成本高昂及活性问题限制了其临床应用。而粘附肽类保留了相关蛋白中发挥生理作用的主要成分,参与细胞生物力信号的传导,促进细胞粘附、增殖、分化;空间构象相对固定,合成简单,P-15多肽就是其中的代表。骨的有机成分中85%以上是由Ⅰ型胶原构成的,在其α1链上一段与间充质细胞结合且高度保守的15个氨基酸序列,被称为P-15。它能与各种前体细胞上的整合素受体结合,促进细胞粘附,释放生成因子,协同促进成骨细胞前体细胞的分化。国内外对P-15多肽的研究主要集中在与羟基磷灰石的复合,本实验拟通过P-15多肽来提高生物玻璃的成骨能力。将P-15多肽液以不同浓度与生物玻璃复合。然后将骨髓基质细胞Bone Marrow Stromal Cells(BMSCs)接种到铺有复合材料的24孔板中,并以未复合P-15的生物玻璃作为对照,倒置显微镜下观察生长情况。分别在接种后1d、4d、7d、10d测定培养液中的细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性和总蛋白质含量,筛选多肽浓度最适宜的复合材料,植入兔颅骨缺损内,在4W、6W、8W通过软X线和组织学观察新骨形成情况。结果:多肽液浓度为200 g/ml时,与复合材料共培养的BMSCs的ALP活性明显高于未复合多肽组和其他浓度组(P<0.01);各时间点实验组与对照组之间总蛋白含量差异无统计学意义。软X线和组织切片显示4W、6W、8W,实验组新骨形成面积高于同期对照组标本。结论:复合多肽后的生物玻璃具有良好的细胞相容性,能增强BMSCs的成骨活性表达,复合材料的成骨能力得到了提高。

全文目录


提要  4-7
前言  7-11
第1章 材料和方法  11-18
  1.1 主要仪器与设备  11
  1.2 实验材料及试剂  11-12
  1.3 实验动物  12
  1.4 实验步骤  12-18
第2章 实验结果  18-28
  2.1 WISTAR 大鼠BMSCS 的原代培养和扩增  18
  2.2 WISTAR 大鼠BMSCS 与生物玻璃共培养  18-20
  2.3 不同组复合材料对BMSCS 成骨活性的影响  20-22
  2.4 体内构建兔颅骨缺损模型的研究  22-28
第3章 讨论  28-38
第4章 结论  38-39
参考文献  39-46
致谢  46-47
导师简介  47-49
中文摘要  49-53
ABSTRACT  53-57

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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