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南方红豆杉水提物体外抗肿瘤机制的初步研究

作 者: 张晶
导 师: 舒琦瑾
学 校: 浙江中医药大学
专 业: 中西医结合临床
关键词: 南方红豆杉 水提物 肺癌 胃癌 乳腺癌 细胞增殖 凋亡
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的研究南方红豆杉水提物体外抗肿瘤作用,明确其与紫杉醇抗肿瘤机制的不同,并初步探讨其可能的作用机理。方法采用水煎提取南方红豆杉;以MTT法检测南方红豆杉水提物对体外培养的人肺腺癌A549细胞、胃癌SGC-7901细胞和乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,并以紫杉醇为对照;以生长曲线法分别观察水提物与紫杉醇抑制A549细胞生长的时间-效应曲线;以流式细胞仪检测南方红豆杉水提物对A549细胞、SGC-7901细胞和MCF-7细胞凋亡的影响,以紫杉醇为对照;以普通光学显微镜观察南方红豆杉水提物和紫杉醇对A549细胞、SGC-7901细胞和MCF-7细胞形态的影响;以Western blot检测细胞凋亡相关蛋白P-JNK的表达。结果(1)南方红豆杉的水提物得率为8.25%;(2)南方红豆杉水提物对体外培养的人肺腺癌A549细胞、胃癌SCG-7901细胞和乳腺癌MCF-7细胞的增殖存在明显抑制作用,各浓度组(1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml、3.5mg/ml)处理后OD值与对照组比较均存在显著性差异(P<0.05或P<0.01),且其对各肿瘤细胞的半数抑制率(IC50)相近,表明各肿瘤细胞对其敏感性无明显差异。而紫杉醇对上述各细胞的增殖亦存在明显抑制作用,各浓度组(2μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml)处理后OD值与对照组比较均存在显著性差异(P<0.05或P<0.01),但其对各肿瘤细胞的半数抑制率(IC50)差异性较大(P<0.05),表明各肿瘤细胞对其敏感性存在差异;(3)生长曲线法观察发现南方红豆杉水提物对各细胞增殖抑制作用有一定的剂量-效应关系;(4)光镜观察发现南方红豆杉水提物处理后各肿瘤细胞呈典型的凋亡表现,而紫杉醇处理后的各肿瘤细胞以坏死表现为主;(5)Western blot检测发现南方红豆杉水提物处理后A549细胞P38蛋白表达无变化、P-JNK蛋白随药物浓度增加表达减少。结论(1)南方红豆杉水提物具有抑制多种肿瘤细胞增殖的作用;且其作用呈现一定的剂量-效应依赖和时间-效应依赖;(2)南方红豆杉水提物抗肿瘤机制与紫杉醇不同,其作用机理主要与诱导肿瘤细胞凋亡有关。

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