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柚核柠檬苦素类似物的提取纯化及稳定性研究

作　者: 王青山
导　师: 邓放明
学　校: 湖南农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 湖南香柚种子柠檬苦素类似物提取纯化鉴定稳定性
分类号: TQ914.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

柠檬苦素类似物是芸香料和楝科植物的主要次生代谢产物,是一类高度氧化的三萜类化合物。柑桔属包括柚类果实中含量丰富,尤其以种子中的含量最高;据文献报道,柠檬苦素类似物有抗癌、降低胆固醇、抗病毒等多种生物活性。本文主要研究了从湖南香柚种子中提取、分离纯化柠檬苦素类似物,对提取物进行定性鉴定,并对柠檬苦素稳定性的影响因素首次进行了初步探讨。主要研究结果如下:1.用分光光度法建立了湖南香柚果实中的柠檬苦素类似物含量的测定方法,检测方法的线性关系良好,回归方程为:Y=0.0034X+0.0203,相关系数R²=0.9979。对方法的稳定性、精密度和回收率分析表明该法处理简单、方便、快捷,检测结果准确、可靠。湖南香柚果实不同部位的柠檬苦素类似物含量依次为:柚种子＞果皮＞囊衣＞果肉;果皮0.529%、果肉0.166%、囊衣0.274%、柚种子1.209%。2.柠檬苦素类似物的提取工艺研究采用浸提脱脂,确定石油醚（60-90℃）为柚种子的脱脂溶剂;正交试验表明,影响脱脂因素为温度＞时间＞脱脂剂量;柚种子脱脂的最佳组合是温度32℃,时间10h,脱脂剂量40mL/g。索氏抽提脱脂柚种子,确定丙酮为抽提溶剂,采用Box-Behnken法设计试验,得到回归方程,对回归方程作方差分析、绘制和分析响应面及等高线图。回归方程为:Y=-125.1910+2.6958X₁+0.2930X₂+7.4845X₃-0.0164X₁²-0.00158X₂²-0.6025X₃²由回归方程预测提取柠檬苦素类似物的最佳条件为:提取温度78.9℃、溶剂用量89.7mL、提取时间4.6h,此时的柠檬苦素类似物的理论提取量为:11.58mg/g。对回归方程作方差分析,表明各因素与响应值之间的线性关系是显著的;对最佳预测条件作验证试验,柠檬苦素类似物的提取量达到11.52mg/g。3.分离纯化柚种子的丙酮提取物,得到两种柠檬苦素类似物晶体,经化学特征反应、TLC、IR、NMR检测,晶体Ⅰ是柠檬苦素,晶体Ⅱ为诺米林;给出了柠檬苦素的¹H-NMR和¹³C-NMR数据分析及图谱。4.首次初步探讨柠檬苦素晶体及溶液稳定性的影响因素,试验表明温度、pH值、水分、光照条件对柠檬苦素的稳定性影响显著。低温和常温下,柠檬苦素稳定性良好;45℃以上时,随温度和时间的增加,降解显著,稳定性差;pH4-7,柠檬苦素稳定,分解率小于1.8%;pH＜4、强酸环境中稳定性较差;碱性环境中,在pH＞10时,不稳定,当pH=12时,分解率达94.92%;随水分含量的增加,柠檬苦素的稳定性变差,当水分达6%时,放置21d后,柠檬苦素的分解率达61.56%;不同光源对柠檬苦素稳定性的影响程度依次为紫外光＞太阳光＞室内光＞阴暗处。试验证明:紫外光照射35d后,柠檬苦素的分解率达61%。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-11
第一章绪论  11-24
  1.柠檬苦素类似物的研究进展  11-22
    1.1 柠檬苦素类似物的结构、种类和理化性质  11-13
    1.2 柠檬苦素类似物的分布、含量及生物合成  13-15
    1.3 柠檬苦素类似物的生物活性功能  15-18
    1.4 柠檬苦素类似物的提取、分离纯化及检测方法  18-22
    1.5 柠檬苦素类似物的应用  22
  2 本研究的目的和意义  22-23
  3 研究的主要内容  23-24
第二章柚果实中柠檬苦素类似物的含量分析  24-30
  1 材料与方法  24-26
    1.1 试验材料与主要化学试剂  24
    1.2 主要仪器与设备  24-25
    1.3 实验方法  25-26
  2 结果与分析  26-29
    2.1 柠檬苦素的最大吸收峰波长分析  26-27
    2.2 柠檬苦素标准曲线  27
    2.3 果实中柠檬苦素类似物的含量  27-28
    2.4 柠檬苦素类似物分析方法的评价  28-29
  3.小结  29-30
第三章湖南香柚种子柠檬苦素类似物的提取工艺研究  30-44
  1 材料与方法  30-33
    1.1 试验材料及化学试剂  30
    1.2 主要仪器与设备  30-31
    1.3 试验方法  31-33
  2 结果与分析  33-42
    2.1 脱脂剂的选择及浸提脱脂优化  33-34
    2.2 提取溶剂的选择及索氏提取工艺优化  34-42
  3 小结  42-44
第四章柠檬苦素类似物的分离纯化及定性分析  44-60
  1 材料与方法  44-47
    1.1 试验材料与主要化学试剂  44
    1.2 主要仪器与设备  44-45
    1.3 试验方法  45-47
  2 结果与分析  47-59
    2.1 晶体Ⅰ重结晶工艺优化  47-48
    2.2 晶体Ⅱ薄层层析展开剂的选择  48-49
    2.3 柠檬苦素类似物的定性鉴定  49-59
  3 小结  59-60
第五章柠檬苦素的稳定性研究  60-66
  1 材料与方法  60-61
    1.1 材料与试剂  60
    1.2 主要仪器与设备  60
    1.3 试验方法  60-61
  2 结果与分析  61-65
    2.1 温度对柠檬苦素稳定性的影响  61-63
    2.2 pH对柠檬苦素稳定性的影响  63
    2.3 水分含量对柠檬苦素稳定性的影响  63-64
    2.4 光照对柠檬苦素稳定性的影响  64-65
  3.小结  65-66
第六章结论  66-68
主要创新点  68-69
参考文献  69-76
致谢  76-77
作者简历  77

柚核柠檬苦素类似物的提取纯化及稳定性研究

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