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Th17细胞及其相关细胞因子在幽门螺杆菌感染中的作用研究
作 者: 刘亚普
导 师: 张艳
学 校: 南华大学
专 业: 免疫学
关键词: 幽门螺杆菌 Th17 白介素-23 白介素-17
分类号: R378
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
目的:通过建立幽门螺杆菌(H. pylori)感染的C57BL/6小鼠模型,分析感染后不同时期小鼠胃组织IL-17、IL-23 mRNA及蛋白表达情况,以及脾脏单细胞悬液中Th17细胞应答情况,并分析感染后胃炎的严重程度与Th17-IL-17应答效应的相关性,同时设立治疗组检测上述指标的变化情况。为探讨IL-23/IL-17信号通路在H. pylori感染中的作用奠定基础,为H. pylori诱发的胃炎的免疫防御及治疗提供新的理论和实验依据。方法:(1)对6~8周龄的C57BL/6小鼠进行灌胃感染H. pylori,每隔48小时一次,共灌胃5次。在H. pylori感染后的4、8、12周分别处死小鼠,鉴定H. pylori感染小鼠模型是否成功。同时设立治疗组,采用三联疗法对灌胃感染4周后的小鼠进行治疗;(2)对对照组、感染组、治疗组小鼠分别取部分胃组织作H﹠E染色,显微镜下观察胃组织炎症变化;(3)采用Trizol法对胃组织及脾细胞提取RNA,RT-PCR检测细胞因子IL-17、IL-23 mRNA的表达情况;(4) ELISA检测胃组织匀浆上清中细胞因子IL-17、IL-23蛋白含量;(5)采用PMA+Ionomycin或H. pylori WCP对脾淋巴细胞进行刺激培养,流式细胞术检测脾脏单细胞悬液中Th17细胞应答情况。结果:(1)成功建立了H. pylori感染小鼠模型,感染组小鼠胃黏膜炎症程度随感染时间的延长而不断加重;(2)与对照组相比,H. pylori感染组小鼠的胃组织中IL-17、IL-23的表达在mRNA及蛋白水平均显著增高,H. pylori感染组小鼠的脾淋巴细胞中Th17细胞比例显著高于对照组小鼠的该比值;(3) H. pylori感染组小鼠IL-17、IL-23 mRNA及蛋白含量以及脾淋巴细胞中Th17细胞比例随感染时间延长而增加;(4)治疗组小鼠IL-17、IL-23表达量及脾淋巴细胞中Th17细胞比率,与治疗前即感染后4周的小鼠相比较均有所下降;(5)感染后不同时期小鼠胃黏膜的炎症程度与IL-17、IL-23的表达量存在正相关。结论:(1) H. pylori感染后IL-17、IL-23表达均上调;(2) H. pylori感染后可以诱导Th17细胞应答;(3) H. pylori感染后胃炎程度与胃组织IL-17、IL-23含量存在正相关。
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全文目录
主要英文缩略语索引 4-6 中文摘要 6-8 英文摘要 8-10 1 前言 10-12 2.实验材料 12-14 3 实验方法及步骤 14-22 4.实验结果 22-40 5.讨论 40-44 6 结论 44-45 参考文献 45-48 综述 48-56 参考文献 53-56 发表及待发表论文 56-57 致谢 57
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学) > 病原细菌
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