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肿瘤标志物CEA的量子点标记及其初步应用研究

作　者: 杨保升
导　师: 刘贻尧
学　校: 电子科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 癌胚抗原量子点分子标记斑点渗滤法检测
分类号: R730.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

量子点(Quantum Dot,QD)是20世纪90年代发展起来的一种具优良光谱特征和光化学稳定性的半导体纳米晶体。与传统有机染料相比,量子点具有荧光发光效率高、激发谱线范围宽、发射谱线范围窄、表面修饰多功能化、荧光寿命长等特点。作为新一代生物荧光标记物,其在免疫分析中的多组分同时测定、免疫分子示踪、实时检测、细胞成像、体内成像、疾病诊断以及研究生物大分子之间的相互作用等方面具有独特作用和广阔应用前景。本文以硒粉作前驱体,在采用水相法合成CdSe单一量子点和CdSe/ZnS核壳型量子点基础上,选用所合成的CdSe/ZnS核壳型量子点对癌胚抗原(CEA)单克隆抗体进行了标记,并对样品肿瘤标志物CEA进行了初步检测研究。1、以3-巯基丙酸作为稳定剂,采用水相合成法成功合成了CdSe单一量子点和CdSe/ZnS核壳型量子点。透射电子显微镜观察表明,所合成的CdSe/ZnS量子点尺寸均一,形貌近似球形,粒子大小在5 nm以下。紫外吸收光谱和荧光光谱分析表明,所合成的CdSe/ZnS核壳型量子点较之CdSe单一量子点更具良好光学特性。2、采用乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作连接剂,通过疏水缩合形成稳定的共价键,将所合成的CdSe/ZnS量子点标记到CEA单克隆抗体上。然后通过SDS-PAGE和荧光分光光度计对标记结果进行了验证。结果表明CdSe/ZnS量子点被成功标记到了CEA单克隆抗体上。3、以硝酸纤维素膜为固相载体,采用双抗体夹心斑点渗滤法,对样品中癌胚抗原进行了检测。结果表明,量子点作为荧光标记物能较好达到检测效果,其最低检测限浓度为10 ng/mL。

肿瘤标志物CEA的量子点标记及其初步应用研究

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