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黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1/的影响

作　者: 宁雅娴
导　师: 王俭勤
学　校: 兰州大学
专　业: 肾脏病
关键词: 慢性肾脏病 ECV-304细胞株肿瘤坏死因子(TNF-α) 黄芪单体毛蕊异黄酮一氧化氮(NO) 内皮素1(ET-1)
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)是一组进行性发展的慢性非感染性疾病。CKD是一种患病率很高、世界性的常见病。由于其患病率高,预后差,医疗费用巨大,现已成为危害人类健康的重大疾病。CKD患者,最后都可能发展为慢性肾功能不全、尿毒症,最终需要透析或肾移植。透析治疗费用很大,因此,延缓CKD的进展,推迟CKD患者的进展到尿毒症进行血液净化治疗的时间,具有重要的社会、经济学意义。血管内皮功能障碍普遍存在于CKD患者中,并贯穿于CKD发生、发展的整个过程,是CKD发病的中心环节,也是CKD患者的基本特点。不仅如此,内皮细胞功能障碍伴随着动脉粥样硬化(AS)的各个阶段,与CKD患者心血管事件的发生和死亡率密切相关。血管内皮功能障碍是CKD的病理生理变化,同时,内皮细胞功能紊乱与CKD的发展密切相关,也可表现为高血压,冠状动脉疾病,慢性心脏衰竭,外周血管疾病,糖尿病等,它们协同加速恶化CKD的进展。所以保护内皮细胞功能是延缓CKD的病程,防止慢性肾衰竭,改善AS的关键,具有重要积极意义。毛蕊异黄酮属黄酮类药物,是黄芪重要成分。据报道,黄芪能清除氧自由基,抗氧化作用,调节免疫等作用。本文探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的影响。方法：用DMEM培养液在37℃、5%C02条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后,调细胞密度为1×105,并分为7组：A组：空白组,不加任何诱导剂；B组：TNF-α(40ng/ml)诱导组；C组TNF-α(40ng/ml)+氯沙坦钾(10-5mol/1)；D组:TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(0.1mg/ml)；E组:TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(1mg/ml)；F组TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(10mg/ml)；G组TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(20mg/ml)。分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液,用ELISA检测上清液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的含量。结果：①与空白组比较,TNF-α降低了ECV-304NO水平(P<0.001)、提高了ET-1水平(P<0.001)；②氯沙坦钾提高了ECV-304 NO水平(P<0.001)、降低了ET-1水平(P<0.001)；③毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml-10mg/ml)能够促进ECV-304细胞NO的产生(P<0.001)、降低ET-1的产生(P<0.001)；④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮(20mg/ml)对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异((P>0.05)；⑤毛蕊异黄酮浓度(在0.1 mg/ml-20mg/ml内)与ECV-304 ET-1的分泌呈负相关性(r=-0.02、P<0.001)；与ECV-304 NO的分泌呈正相关性(r=0.0075、P<0.001)。结论：1.TNF-a可抑制内皮细胞分泌NO,促进ET-1分泌；2.黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF-α诱导的内皮细胞NO分泌,抑制ET-1分泌,并在一定浓度内(0.1 mg/ml-20mg/ml)呈浓度依赖性。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-8
前言  8-25
  1.内皮细胞功能障碍与CKD  8-10
  2.内皮细胞功能障碍的主要危险因素  10-18
  3.内皮细胞功能障碍的病理生理影响  18-19
  4.血管内皮功能障碍的预后价值  19
  5.内皮功能障碍治疗  19-22
  7.新的内皮细胞的研究  22-25
研究的主要内容  25-26
材料和方法  26-29
结果及分析  29-33
讨论  33-37
参考文献  37-42
攻读硕士期间发表论文  42-43
致谢  43-44
附录  44-45

黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1/的影响

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