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苦荬菜内生真菌中辣椒疫病拮抗菌的生理特性研究

作　者: 贾传文
导　师: 李长田
学　校: 吉林农业大学
专　业: 生态学
关键词: 内生真菌辣椒疫病拮抗作用生物防治
分类号: S436.418
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

辣椒疫病是辣椒生产过程中重要的真菌性病害,在传统农业生产中,过量的使用化学农药成为造成目前农业生态环境日趋恶化的主要原因之一。当前,生物农药的研制和应用已经迎来一个前所未有的历史机遇和技术挑战,内生真菌种类繁多,在生物防治方面也得到了广泛应用。本研究对苦荬菜内生真菌进行分离,并对其进行抗辣椒疫病活性研究。试验结果如下：1、试验中比较了3种常用消毒剂：NaClO、H2O2、HgCl对苦荬菜内生真菌分离时充当表面消毒剂的作用效果。试验结果表明,H2O2溶液氧化能力差,HgCl溶液杀伤力太强,最后选定3.5%NaCIO溶液作为苦荬菜表面消毒剂。筛选出苦荬菜最佳表面消毒时间：在26℃条件下,根部组织4min,叶部组织3.5min,分离到的内生真菌数最多。2、采用组织块分离法,对苦荬菜进行内生真菌分离总共获得24株内生真菌,其中根部15株,叶部9株。经菌落形态观察及ITS序列分析,最终鉴定分别隶属于半知菌的链格孢属(Alternaria)8株,青霉属(Penicillium)5株,小尾孢属(Cercosporella)4株,镰孢菌属(Fusarium)1株,轮枝孢属(Verticillium)2株,丛梗孢属(Monilia)2株,茎点壳孢属(Phoma)1株,还有子囊菌的赤霉属(Gibberella)1株。同时,在进行叶部组织内生真菌分离时发现,叶脉部分分离出的内生真菌要多于叶肉部分。由于输导组织部位营养物质丰富、通气性好,成为大多数内生真菌的栖居之处。所以会出现分离内生真菌数目根部>叶脉>叶肉的现象。3、利用苦荬菜中分离出的24株内生真菌分别与16株病原真菌做平皿拮抗试验,结果LR3024和LR3026两株内生真菌都表现出了明显的抑菌效果,且抑制范围比较广。病原真菌L1084同时受到2株拮抗菌较强的抑制作用,平均抑制率分别为52.5%和50%。2株拮抗菌的代谢产物活性成分在紫外照射下不稳定,失去抑制作用,因此适用于活菌生防制剂生产。4、通过不同生态因子对2株活性菌株生长影响的一系列研究,结果表明：PDA培养基是最适合两菌株生长的培养基；其适宜生长温度在24～31℃,最适温度为28℃；两菌株在pH5.0～8.0都能较好的生长,且差异不明显,发酵液pH各自趋向一个稳定的值：LR3024趋向pH6.6, LR3026趋向pH6.1；几种不同碳源中,两菌株对葡萄糖的利用率最高。5、结合菌落形态、微观形态、发酵特征、ITS序列分析,最终确定两株具有抑菌活性的内生真菌：LR3024菌株为赤霉属真菌Gibberella pulicaris, LR3026菌株为茎点壳孢属真菌Phoma radicina。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
第一章绪论  8-18
  1.1 研究目的及意义  8
  1.2 苦荬菜与辣椒套种的种植模式  8
  1.3 辣椒疫病概述  8-11
  1.4 国内外辣椒疫病防治的研究现状  11-14
  1.5 植物内生真菌的研究概述  14-17
  1.6 研究内容及创新点  17-18
第二章苦荬菜内生真菌物种多样性  18-26
  2.1 试验材料  18-19
  2.2 试验方法  19-20
  2.3 结果与分析  20-25
  2.4 结果与讨论  25-26
第三章苦荬菜内生真菌对辣椒疫病拮抗研究  26-31
  3.1 植物病害生物防治  26
  3.2 试验材料  26-27
  3.3 试验方法  27
  3.4 结果与分析  27-30
  3.5 讨论  30-31
第四章不同生态因子对两株拮抗菌生长特征的影响研究  31-38
  4.1 试验材料  31-32
  4.2 试验方法  32-33
  4.3 结果与分析  33-37
  4.4 讨论  37-38
第五章具抑菌活性的内生真菌的鉴定  38-43
  5.1 内生真菌鉴定  38
  5.2 试验材料  38-39
  5.3 试验方法  39-40
  5.4 结果与分析  40-42
  5.5 结果与讨论  42-43
第六章结论与展望  43-44
参考文献  44-49
致谢  49-50
作者简介  50

苦荬菜内生真菌中辣椒疫病拮抗菌的生理特性研究

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