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化学发光联用技术及其在检测几种活性物质中的应用研究

作　者: 姜欣
导　师: 吕鉴泉
学　校: 湖北师范学院
专　业: 分析化学
关键词: 化学发光 流动注射 毛细管电泳 维生素 全氟化合物
分类号: O657.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


化学发光检测法（Chemiluminescence CL）具有灵敏度高、线性范围宽、分析快速和仪器设备简单等优点,近年来在生物、医学和环境等领域得到了广泛的应用。流动注射（Flow Injection Analysis,FIA）是一种在非平衡状态下溶液自动处理的技术,其与化学发光的联用,具有分析速度快、重现性好、灵敏度高和线性范围宽等优点,并且拓展了化学发光在分析领域的应用范围。毛细管电泳（Capillary Electrophoresis, CE）是近几十年发展出来的一种新型分离技术,其与化学发光联用,既能体现毛细管电泳的高效率,又能体现化学发光的高灵敏度。本学位论文研究了化学发光及其联用技术在几种活性物质中的应用,建立了一些灵敏度高的分析方法。各章内容概述如下:第一章,简单介绍了化学发光的原理及常用的几类反应体系,以及化学发光法与流动注射、毛细管电泳等装置的联用技术,最后阐述了本论文的目的和意义。第二章,分两节。第一节利用光谱法研究了生理条件下全氟癸酸（PFDA）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用,结果表明,PFDA借氢键和范德华力与BSA发生作用,并以静态方式猝灭BSA的荧光,其结合常数和结合位点数分别为2.9471×107 L·mol-1和1.061。第二节,由于全氟庚酸（PFHA）和全氟癸酸（PFDA）对luminol-H2O2体系的化学发光有明显的增敏作用,因此建立了快速测定全氟庚酸和全氟癸酸的流动注射-化学发光法。在最优条件下,全氟庚酸和全氟癸酸分别在0.02-5.0 mg·L-1,0.05-7.0 mg·L-1范围内与发光强度呈良好的线性关系,检测限分别为5.0×10-3 mg·L-1,9.0×10-3 mg·L-1,并将该方法应用于加标尿样中全氟庚酸和全氟癸酸含量的测定。第三章,建立了毛细管电泳-化学发光法分离分析水溶性维生素B1和B6的方法,并研究缓冲溶液、工作电压和pH等因素对维生素测定的影响。在分离电压15 kV,20 mmol·L-1 pH 9.0硼砂-硼酸缓冲液中,12 min内实现了维生素B1和B6的有效分离,该方法具有良好的稳定性、精密度和线性关系。第四章,基于碱性介质中芦丁对鲁米诺-铁氰化钾化学发光体系的抑制作用,建立了毛细管电泳-化学发光联用分离和检测芦丁的新方法,在最优条件下,芦丁在1.0×10-7 g·mL-1 - 1.0×10-4 g·mL-1范围内与发光强度呈良好的线性关系,检测限为5.1×10-8 g·mL-1,并将其用于实际样品中芦丁含量的检测。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章 绪论  10-21
  1 化学发光  10-15
    1.1 化学发光的原理  10-11
    1.2 化学发光特点  11
    1.3 常用的化学发光试剂  11-15
      1.3.1 鲁米诺类发光体系  11-12
      1.3.2 光泽精和吖啶酯类试剂  12-13
      1.3.3 过氧草酸酯类  13
      1.3.4 洛粉碱  13-14
      1.3.5 二氧杂环丁烷类  14
      1.3.6 钌(Ⅱ)的联吡啶(bipy)及邻菲咯啉(phen)配合物  14-15
      1.3.7 其它化学发光试剂  15
  2 化学发光与其他技术的联用  15-20
    2.1 化学发光与流动注射联用的研究  15-17
      2.1.1 流动注射分析的原理及特点  15-16
      2.1.2 流动注射分析的特点  16
      2.1.3 流动注射与化学发光联用(FI-CL)  16-17
    2.2 化学发光与毛细管电泳联用的研究  17-20
      2.2.1 毛细管电泳的发展  17
      2.2.2 毛细管电泳原理  17-19
      2.2.3 毛细管电泳的特点  19
      2.2.4 流动注射与化学发光联用(FI-CL)  19-20
  3 本课题的研究目的及内容  20-21
第二章 全氟化合物的相互作用及其分离分析  21-35
  第一节 光谱法研究全氟癸酸与牛血清白蛋白的相互作用  21-28
    1.1 引言  21
    1.2 实验部分  21-22
      1.2.1 仪器与试剂  21-22
      1.2.2 光谱测定  22
    1.3 结果与讨论  22-27
      1.3.1 紫外吸收光谱  22-23
      1.3.2 荧光猝灭  23-25
      1.3.3 热力学性质  25-26
      1.3.4 结合位点与表观结合常数  26
      1.3.5 BSA 结构的变化  26-27
      1.3.6 PFDA 的圆二色谱  27
    1.4 小结  27-28
  第二节 流动注射-化学发光法测定全氟庚酸和全氟癸酸  28-35
    2.1 引言  28
    2.2 实验部分  28-29
      2.2.1 仪器与试剂  28-29
      2.2.2 溶液的配制  29
      2.2.3 样品处理  29
      2.2.4 实验方法  29
    2.3 结果与讨论  29-34
      2.3.1 化学发光动力学曲线  29-30
      2.3.2 化学发光反应的条件优化  30-33
        2.3.2.1 鲁米诺浓度优化  31
        2.3.2.2 H_20_2浓度优化  31-32
        2.3.2.3 缓冲介质优化  32
        2.3.2.4 流速优化  32-33
      2.3.3 方法的线性范围、检测限及精密度  33
      2.3.4 基体干扰  33
      2.3.5 样品分析  33-34
    2.4 小结  34-35
第三章 毛细管电泳-化学发光法快速测定维生素 B_1和 B_6  35-42
  1 引言  35
  2 实验部分  35-37
    2.1 仪器与设备  35-36
    2.2 试剂  36-37
    2.3 实验方法  37
  3 结果与讨论  37-40
    3.1 化学发光条件的优化  37-39
      3.1.1 鲁米诺浓度的选择  37
      3.1.2 铁氰化钾浓度的选择  37-38
      3.1.3 柱后试剂铁氰化钾酸度的选择  38-39
    3.2 电泳分离条件的优化  39-40
      3.2.1 电泳缓冲溶液的选择  39
      3.2.2 缓冲溶液pH 值的选择  39
      3.2.3 分离电压和进样时间的选择  39
      3.2.4 方法线性范围、检测限和重现性  39-40
  4 样品分析  40-41
  5 小结  41-42
第四章 毛细管电泳-化学发光联用快速检测芦丁  42-48
  1 引言  42
  2 实验部分  42-43
    2.1 仪器与试剂  42-43
    2.2 溶液的配制  43
  3 结果与讨论  43-47
    3.1 芦丁的化学发光增强作用  43-44
    3.2 化学发光条件的优化  44-45
    3.3 分离条件的优化  45-46
    3.4 方法线性范围、检测限和重现性  46
    3.5 蜂胶中芦丁的分离与检测  46-47
  4 小结  47-48
致谢  48-49
参考文献  49-57
攻读学位期间发表（或待发表）论文  57

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中图分类: > 数理科学和化学 > 化学 > 分析化学 > 仪器分析法（物理及物理化学分析法） > 光化学分析法（光谱分析法）
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