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体外IGF-1诱导干细胞移植心肌梗死大鼠的实验研究

作　者: 李晓雪
导　师: 肖践明
学　校: 昆明医学院
专　业: 内科学
关键词: 骨髓间充质干细胞胰岛素样生长因子-1 心肌分化
分类号: R542.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

【目的】用静脉移植的方法,比较使用IGF-1诱导大鼠的骨髓间充质干细胞和未经诱导骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的疗效；评价IGF-1对骨髓间充质干细胞移植成活的有效性。【方法】从健康SD大鼠骨髓中分离BMSCs,取第三代骨髓间充质干细胞,用IGF-1诱导72小时,促进其向心肌分化,免疫细胞化学检测诱导后不同时间点的心肌特异性蛋白cTnT的表达。选取健康成年雄性SD大鼠30只,均开胸结扎冠状动脉左前降支,建立心梗模型,随机数字表法分为3组：A组模型对照组、B组空白骨髓间充质干细胞注射组及C组经IGF-1诱导的骨髓间质干细胞注射组,每组10只。三组大鼠心梗模型建立后第2周,诱导组每只大鼠经尾静脉移植1×108个经IGF-1诱导过的细胞；空白MSCs组尾静脉移植1×108个MSCs细胞；模型对照组尾静脉注射不含细胞的100ul DMEM。细胞移植后4周行增强CT检查,比较IGF-1诱导组与空白MSCs组心梗区域缩小面积。CT检测完成后,处死三组大鼠,取出心脏,TTC染色测心梗面积,镜下观察心肌梗死区域病理组织学表现。心肌组织切片行荧光显微镜观察及,观察MSCs移植的效果。【结果】本研究最终存活入选30只大鼠,均通过手术成功造成心肌梗死,其中A组空白对照组10只,B组未经诱导MSCs组10只,C组术前经IGF-1诱导后移植MSCs组10只。①CM-DiI标记大鼠骨髓间充质干细胞效率高,对细胞生长无影响。②使用冠脉结扎法建立大鼠心肌梗死模型是一种可行、实用的心梗模型制作方法。③梗死心肌的病理形态学观察：光镜下两组均可见大小不等的心肌梗死灶,梗死心肌区域细胞肿胀坏死,严重缺血坏死区出现心肌溶解。但骨髓间质干细胞注射的两组上述改变明显弱于模型对照组。④免疫细胞化学染色显示,cTnT从诱导48小时后开始表达,72小时cTnT表达增强⑤梗死心肌面积百分率的检测：随着骨髓间质干细胞移植后时间的延长,B、C注射组梗死心肌面积百分率明显低于模型对照组(P<0.05)。而C组的改善更为明显(与B组比较,P<0.05)；与A、B两组,C组的梗死面积缩小。双源CT和TTC染色后测量的心梗面积都显示心肌缺血状况明显改善,且两种检测方法得出的结果具有相关性(r=0.9784)。【结论】IGF-1可以在体外诱导MSCs分化为心肌样细胞并表达心肌特异性蛋白,诱导后的骨髓间充质干细胞可以在梗死心肌内存活、增殖并分化,移植经IGF-1诱导后MSCs较移植未经诱导的MSCs能更好促进心肌细胞的再生,改善心肌缺血状态,从而更好的改善心功能。

全文目录

中文摘要  5-7
Abstract  7-9
英文缩略词表  9-10
引言  10-12
材料与方法  12-24
结果  24-42
讨论  42-49
结论  49-50
参考文献  50-52
综述  52-60
  参考文献  57-60
攻读学位期间发表文章情况  60-61
致谢  61

体外IGF-1诱导干细胞移植心肌梗死大鼠的实验研究

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