学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

重组水蛭素诱导bFGF表达，促进静脉淤血皮瓣存活的实验研究

作　者: 许尔长
导　师: 廖毅
学　校: 泸州医学院
专　业: 外科学
关键词: 重组水蛭素淤血皮瓣 bFGF
分类号: R622
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 28次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：本实验通过建立兔耳静脉淤血皮瓣模型,分别以高剂量重组水蛭素、低剂量重组水蛭素、注射生理盐水于局部注射,研究重组水蛭素诱导静脉淤血皮瓣bFGF的表达,促进微血管增生,从而提高静脉淤血皮瓣的存活率,进一步探讨重组水蛭素在静脉淤血皮瓣领域的应用前景。方法：健康普通大耳白兔72只,雌雄不拘,体重(2000±200g),随机分为3组：2个治疗组(A组：高剂量重组水蛭素治疗组和B组：低剂量重组水蛭素治疗组)和1个对照组(C组：注射生理盐水组),每组24只,按40 mg/kg体重、2%戊巴比妥钠左耳缘静脉注射麻醉,麻醉后侧卧位,消毒铺无菌巾。于右耳背部设计含耳中央动静脉、神经为蒂(蒂宽1cm)的宽为4cm、长为6cm的轴型皮瓣。显微手术操作分离出耳中央动静脉和神经,于蒂部切断,一并结扎其他旁支静脉,形成淤血皮瓣模型。治疗组分别在术后即刻、术后2小时、术后8时、术后16小时、第2、4、6天给予皮瓣蒂部皮下三等分点均匀注射重组水蛭素(2mg/1ml／皮瓣)和(1mg/lml／皮瓣),空白对照组同法给予等量(1ml)生理盐水,皮瓣原位回植。术后观察皮瓣表面毛发脱落情况,血肿形成情况,皮瓣存活率,分别于术后1、3、5、7天取远端病理组织检测皮瓣内bFGF水平,同时制备术后1、3、5、7天皮瓣远端组织病理切片于高倍镜视野下做微血管密度分析,并做免疫组化观察各组毛细血管生成情况及MVD与bFGF表达。结果：1.大体观察：术后第1天3组皮瓣远端均出现不同程度的组织肿胀淤血,空白组较高剂量重组水蛭组和低剂量重组水蛭素组淤血程度明显,呈暗紫色,高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组淤血带界限不明显,空白组淤血带界限明显。术后第3、7天,高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组皮瓣远端淤血肿胀逐步减退直至基本消散,愈合良好。空白对照组皮瓣远端和周缘颜色发黑,质硬,局部毛发脱落,无毛细血管反应,趋于坏死。术后第7天高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组成活面积百分比分别为(94.64±1.90)%和(94.64±1.90)%,均比空白对照组(78.86±1.08)%高,有显著性差异(p<0.01),高剂量重组水蛭素组与低剂量重组水蛭素组皮瓣成活率相当,差异无统计学意义(p<0.05)。2.微血管密度(MvD)[1]：取各试验组第1、3、5、7天病理切片,将胞浆呈黄染的与周围其他组织有明显界限的内皮细胞或内皮细胞串,无论有无管腔,计数为1个血管。先在低倍镜下(×100)选择内皮细胞染色最多的区域,再在高倍镜(HP,×400)下计数这一区域的血管个数,记录每高倍视野的血管数,选最大的3个数值的平均数作为MVD。第1天各实验组未见明显毛细血管生成，第3、5、7天高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组毛细血管数量／HP分别为(8.5±0.9)与(5.6±0.7)、(11.6±0.8)与(8.5±1.0)和(12.0±0.5)与(8.9±1.0),均比空白组(3.5±0.8)、(3.0±0.7)和(2.3±0.6)高,其差异均有统计学意义。3.bFGF含量检测(pg／ml)：术后第1、3、5、7天,高剂量重组水蛭素组与低剂量重组水蛭素组bFGF含量分别为(47.32±2.04)与(49.54±2.15)、(69.12±1.68)与(54.76±1.52)(82.70±0.61)与(60.11±0.72)和(84.48±0.82)与(64.55±0.63),其对应空白组为(49.15±1.42)、(50.06±1.45)、(48.10±0.24)和(50.32±0.51),第3、5、7天高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组与空白对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),第5、7天高剂量重组水蛭素组与低剂量重组水蛭素组之间差异有统计学意义(P<0.05),余各实验组相互比较差异均无统计学意义(P>0.05)。4.MVD与bFGF表达：高剂量重组水蛭素组和低剂量重组水蛭素组与空白对照组于1、3、5、7天MVD与bFGF表达水平呈明显正相关(r=0.368,P<0.01),第3、5、7天高剂量重组水蛭素组与低剂量重组水蛭素组MVD与bFGF表达水平呈明显正相关(r=0.240,P<0.05)。结论：本次实验初步证实局部使用重组水蛭素后能够诱导bFGF的表达,促进微血管增生,从而改善皮瓣淤血状态,提高静脉淤血皮瓣的存活率。

重组水蛭素诱导bFGF表达，促进静脉淤血皮瓣存活的实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文