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实时荧光定量检测骨质疏松大鼠骨损伤相关因子

作　者: 董茵
导　师: 郭刚
学　校: 天津医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 骨质疏松 BMP2 BMP7 TGF-β bFGF IGF-Ⅰ 实时定量PCR
分类号: R580
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的：探讨骨质疏松大鼠骨损伤愈合不同时间点BMP2、BMP7、TGF-β、bFGF、IGF-I基因的表达的水平,了解其高峰表达时间,比较对照组与骨质疏松组之间表达图谱的不同,探寻几个因子之间的相互关系。方法：56只雌性Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行双侧卵巢摘除术,对照组切开后缝合,饲养三个月后成功复制出骨质疏松模型。实验组和对照组的大鼠行骨损伤手术,取骨损伤后5天、15天及30天的大鼠的骨组织,提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测各时间点BMP2、BMP7、TGF-β、bFGF、IGF-I基因的表达水平。实验组和对照组大鼠取骨组织做石蜡切片,HE染色,镜下观察形态。结果：骨质疏松组和对照组的骨损伤后不同时间点,各基因的表达水平不同,差别有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠BMP2在骨损伤后5天表达水平最低,15天表达水平最高；骨质疏松组大鼠骨损伤30天表达水平最低,5天表达水最高。5天,15天,30天的表达水平差别有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠BMP7在损伤15天表达水平最高,骨质疏松组大鼠骨损伤30天表达水平最低,5天表达平最高,两组不同时间点的差别有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠TGF-β在骨损伤15天表达水平最高；骨质疏松组大鼠骨损伤15天表达水平最高,5天最低,两组大鼠5天、15天、30天的表达水平差别有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠与骨质疏松大鼠的bFGF都是在骨损伤5天表达水平最低,15天表达水平最高,两组不同时间点的差别有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠与骨质疏松组大鼠IGF-I基因都是在骨损伤5天表达水平最低,15天表达水平最高,两组不同时间点的差别有统计学意义(P<0.05)。HE染色镜下观察,对照组骨小梁结构无明显变化,而骨质疏松组与对照组相比排列紊乱,松质骨小梁厚度降低,数量减少,小梁穿孔,破裂,空隙增多,皮质变薄。结论：骨质疏松组与对照组的表达谱明显不同。对照组中各因子的高峰表达时间集中在骨损伤的15天,在骨质疏松组中BMP2、BMP7的高峰表达时间提前到骨损伤的第5天,提示在骨质疏松骨损伤修复中这两个因子起到了动员其它因子的作用,TGF-β、bFGF、IGF-I对已分化的成骨细胞、骨细胞及软骨细胞有进-步促进其增殖作用,并且骨细胞形成后的进一步生长、增殖是由这些生长因子调节的。在骨质疏松组中各因子的表达水平一般要低于对照组,提示在骨质疏松中骨损伤的修复比正常修复所需的时间长。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-9
符号说明  9-10
前言  10-12
  研究现状、成果  10-11
  研究目的、方法  11-12
对象和方法  12-20
结果  20-32
讨论  32-47
结论  47-48
参考文献  48-56
发表论文和参加科研情况说明  56-57
附录  57-64
综述促进骨折愈合方法的研究  64-77
  综述参考文献  74-77
致谢  77

实时荧光定量检测骨质疏松大鼠骨损伤相关因子

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