学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

小鼠胚胎心肌细胞ATP敏感性钾通道(K_ATP)的发育依赖性研究

作　者: 赵雄飞
导　师: 唐明
学　校: 华中科技大学
专　业: 生理学
关键词: 胚胎心肌细胞 KATP 全细胞膜片钳发育
分类号: Q25
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 10次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨小鼠胚胎心肌细胞ATP依赖性钾通道(KATP)随着胚胎的发育在心肌细胞上的表达、电生理学特点及其功能的变化。方法:分离第10.5天和第17.5天的小鼠胚胎,采用胶原酶B消化获得单个胚胎心肌细胞并培养24-36小时。以Pinacidil和Cromacalim作为KATP通道的特异性开放剂,Glibenclamide作为通道的特异性抑制剂,采用电流钳模式记录细胞的动作电位观察IKATP功能的发育依赖性变化;使用全细胞电压钳模式(细胞外液K+浓度为140mM,钳制电位0mV,测试脉冲为-100到+40mV,步阶为20mV,持续时间500ms),记录心肌细胞的KATP电流(IKATP)观察其电生理学特点的发育依赖性变化。采用RT-PCR的方法分析KATP亚单位Kir6.1和Kir6.2以及调节亚单位SUR1、SUR2A在早晚期心肌细胞上的表达量的发育依赖性变化。结果:电流钳的数据表明,IKATP特异性开放剂Pinacidil使早期的大部分心房和心室肌的动作电位时程缩短,对动作电位的最大舒张期电位没有影响;但是使晚期胚胎心肌细胞的动作电位的膜电位产生超极化。电压钳的数据表明,早晚期胚胎心肌细胞的IKATP的电流密度没有显著差异,但是早期心肌细胞IKATP的内向整流特性明显强于晚期心肌细胞。Kir6.1、Kir6.2、SUR1和SUR2在mRNA水平的表达随着发育均有上调趋势,发育晚期以Kir6.2和SUR2表达占优势。结论:随着小鼠胚胎的发育,其心肌细胞的KATP通道亚单位在mRNA水平表达发育依赖性增加,但电流密度没有明显变化,并伴随KATP通道的内向整流特性降低。IKATP的电生理学特点和分子生物学水平表达的差异可能来自于通道亚单位组合不同,亦或由于蛋白质翻译水平的差异。

全文目录

中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-11
材料与方法  11-18
结果  18-21
讨论  21-23
结论  23-24
附图  24-30
参考文献  30-33
综述  33-44
  参考文献  39-44
致谢  44

小鼠胚胎心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP)的发育依赖性研究

内容摘要

全文目录

相似论文

小鼠胚胎心肌细胞ATP敏感性钾通道(K_ATP)的发育依赖性研究