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黄连蒲注射液药理与毒理学及治疗奶牛乳房炎效果的研究

作　者: 白丽欣
导　师: 郝满良
学　校: 河北农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 黄连蒲注射液抑菌作用抗炎作用安全试验疗效
分类号: S858.23
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本试验采用琼脂平板扩散法(打孔法)和试管二倍稀释法,用黄连蒲注射液对引起奶牛乳房炎的三种主要致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌)进行体外抑菌试验,结果发现,黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为42.3mm,对大肠杆菌抑菌圈直径为35.2mm,对无乳链球菌抑菌圈直径为41.5mm,说明黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌均有较好抑菌效果;黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)为31.3 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为62.5 mg/mL;对大肠杆菌和无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均为62.5 mg/mL,说明黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌低浓度时呈现抑菌、高浓度表现为杀菌作用;而对大肠杆菌和无乳链球菌抑菌浓度和杀菌浓度相同。为防治奶牛乳房炎有效中药复方的筛选提供了理论依据。采用小鼠耳廓肿胀、毛细血管通透性和棉球诱发小鼠肉芽组织增生方法研究了黄连蒲注射液的抗炎作用;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、小鼠吞噬细胞碳粒廓清能力、以及胸腺指数、脾脏指数研究了该注射液的免疫作用;采用改进Karber法,以半数致死量(LD50)作为评价急性毒性强度的指标,研究了该注射液的急性毒性,并对该注射液的热源性、刺激性进行了检测。结果表明,黄连蒲注射液高、中剂量组对小鼠耳廓的肿胀度分别为1.24mg、1.78mg,与对照组(生理盐水)的肿胀度(2.94mg)相比差异极显著(P<0.01);对毛细血管通透性的OD值,高、中、低剂量组分别为0.05、0.14、0.14,与对照组(生理盐水)的OD值(0.21)相比差异极显著(P<0.01);对小鼠肉芽组织增重,高、中、低剂量组分别为10.18mg、8.10mg、10.16mg,与对照组肉芽组织增重(11.90mg)相比差异极显著(P<0.01);高、中、低剂量组对小鼠胸腺指数、脾指数的增加有极显著性差异(P<0.01);高、中剂量组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬红细胞能力与对照组比较具有极显著性差异(P<0.01);高剂量组对小鼠吞噬细胞碳粒廓清能力与对照组相比差异极显著(P<0.01),中剂量、低剂量与对照组相比差异不显著;急性毒性试验LD50为11222.77mg/kg。数据表明黄连蒲注射液对急性和慢性炎症有显著的抗炎作用,能增强机体的免疫功能,且安全可靠。采用乳头管攻菌法,将金黄色葡萄球菌以104CFU/mL为攻菌剂量致家兔乳房炎,模型成功后,以黄连蒲注射液高、中、低剂量乳池灌注,对照组用生理盐水。结果显示,人工感染家兔乳房炎模型后,家兔出现体温升高,心率和呼吸频率增加,乳区红肿明显,饮食欲基本废绝,精神沉郁。治疗3-7天,家兔体温、心率、呼吸频率逐渐恢复正常;从血常规方面比较,各组红细胞总数、血红蛋白含量在造模前至造模后7天内无显著差异(P>0.05),用药组白细胞总数、淋巴细胞数、中性粒细胞数在造模后显著高于造模前水平(P<0.05),治疗3天后恢复到正常水平(P>0.05),对照组在造模前后无显著差异(P>0.05)。结果表明,黄连蒲注射液对家兔临床型乳房炎的治疗效果显著。临床疗效研究表明黄连蒲注射液对奶牛乳房炎的治疗效果明显,可以有效地增强SOD、GSH-Px自由基清除酶活性,降低NO、MDA等自由基含量,达到治疗奶牛乳房炎的目的。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
1 引言  11-23
  1.1 奶牛乳房炎的发病率  11
  1.2 奶牛乳房炎的危害  11
  1.3 奶牛乳房炎的类型  11-13
    1.3.1 临床型乳房炎  12
    1.3.2 隐性乳腺炎  12-13
  1.4 奶牛乳房炎的发病原因  13-16
    1.4.1 病原微生物方面的因素  13-15
    1.4.2 奶牛乳房炎的诱发因素  15-16
  1.5 奶牛乳房炎的发病机理  16
  1.6 奶牛乳房炎的诊断  16-18
    1.6.1 临床型乳房检查  17
    1.6.2 隐性乳房炎的诊断  17-18
  1.7 奶牛乳房炎的预防  18-19
    1.7.1 加强饲养管理  18
    1.7.2 注意挤奶卫生  18-19
    1.7.3 开发应用奶牛乳房炎疫苗  19
  1.8 奶牛乳房炎的治疗  19-20
    1.8.1 抗生素治疗  19
    1.8.2 复方中药制剂治疗乳房炎  19-20
    1.8.3 其它方法  20
  1.9 血液指标SOD、GSH-Px、MDA 与NO  20-22
    1.9.1 超氧化物歧化酶（SOD）  20
    1.9.2 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）  20-21
    1.9.3 丙二醛（MDA）  21
    1.9.4 SOD、GSH-Px、MDA、NO 与疾病的关系  21-22
  1.10 本试验研究的目的和意义  22-23
2 材料和方法  23-31
  2.1 试验材料  23-24
    2.1.1 药物  23
    2.1.2 动物  23
    2.1.3 试验菌种  23
    2.1.4 主要试剂  23-24
    2.1.5 试验仪器  24
    2.1.6 溶液的配制  24
  2.2 试验方法  24-31
    2.2.1 体外抑菌试验  24-25
    2.2.2 抗炎试验  25-27
    2.2.3 毒性试验  27
    2.2.4 安全性检测  27-28
    2.2.5 黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌致家兔乳房炎疗效试验  28-29
    2.2.6 黄连蒲注射液的临床治疗试验  29-30
    2.2.7 数据处理  30-31
3 结果  31-40
  3.1 体外抑菌试验  31-32
    3.1.1 营养琼脂平板扩散法体外抑菌效果  31-32
    3.1.2 试管二倍稀释法体外抑菌效果  32
  3.2 抗炎试验  32-34
    3.2.1 黄连蒲注射液对二甲苯所致小鼠耳廓炎症及小鼠毛细血管通透性的影响  32
    3.2.2 黄连蒲注射液对小鼠棉球肉芽肿的影响  32-33
    3.2.3 黄连蒲注射液对小鼠免疫器官及巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响  33
    3.2.4 小鼠吞噬细胞碳粒廓清能力  33-34
  3.3 毒性试验  34
  3.4 安全性试验  34
    3.4.1 黄连蒲注射液的热源性试验  34
    3.4.2 黄连蒲注射液的刺激性试验  34
  3.5 黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌致家兔乳房炎疗效试验  34-38
    3.5.1 金黄色葡萄球菌致家兔临床型乳房炎模型临床指标观测  34-35
    3.5.2 黄连蒲注射液对造模乳区的治疗效果  35-38
  3.6 黄连蒲注射液临床治疗试验结果  38-40
    3.6.1 黄连蒲注射液治疗效果  38
    3.6.2 黄连蒲注射液对乳房炎奶牛乳清中SOD、GSH-Px、MDA、N0 的影响  38-39
    3.6.3 黄连蒲注射液对乳房炎奶牛血清中SOD、GSH-Px、MDA、NO 的影响  39-40
4. 讨论  40-44
  4.1 影响中药抑菌效果的因素  40
  4.2 抗炎作用  40-41
  4.3 急性毒性试验  41
  4.4 安全性试验  41-42
  4.5 黄连蒲注射液对金黄色葡萄球菌致家兔乳房炎的疗效试验  42
  4.6 临床治疗试验  42-43
  4.7 黄连蒲注射液对奶牛SOD、GSH-Px、MDA、NO 的影响  43-44
5. 结论  44-45
参考文献  45-49
在读期间发表的学术论文  49-50
作者简历  50-51
致谢  51-52

黄连蒲注射液药理与毒理学及治疗奶牛乳房炎效果的研究

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