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温度和硅胁迫对三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）生长和脂肪酸组成的初步研究

作　者: 潘瑾
导　师: 潘克厚
学　校: 中国海洋大学
专　业: 水产养殖
关键词: 三角褐指藻 脂肪酸 EPA 温度 硅胁迫
分类号: S917.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 153次
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内容摘要


多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids, PUFAs)对人类的健康非常重要,尤其是EPA(eicosapentaenoic acid,20:5n3)和DHA(docosapentaenoic acid,22：6n3)。人类自身不能合成这些PUFAs,当外源食物提供足够的亚油酸(linoleic acid, LA)和a-亚麻酸(a-linolenic acid,ALA)能在体内合成少量的EPA和DHA,但远远不能满足自身需要。因此,日常摄入一定量的PUFAs能够补充人体自身合成的不足,对某些疾病起到明显的预防和治疗作用。PUFAs的主要来源是深海鱼油,但鱼类自身并不能合成PUFAs,主要是靠吞食海洋微藻在体内富集。海洋微藻是海洋食物链的初级生产者,能够从头合成PUFAs且含量较高,加之其脂肪酸组成稳定,不含胆固醇,没有难闻的鱼腥味和重金属元素污染等优点正逐渐成为鱼油的良好替代资源,具有巨大的开发潜力。本实验选取一株海洋硅藻三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)进行生长和脂肪酸组成的初步探讨,该实验主要由两个部分组成：第一部分是温度对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步探讨。设定10、15、20、25、30℃五个温度组,每个温度组设三个重复,培养三角褐指藻至指数生长末期,结果表明三角褐指藻的生长随着温度的升高到达指数生长末期所需时间缩短；不同温度下三角褐指藻的主要脂肪酸为C14:0、C16:0、C16:1、C18:0、C18:1、C18:2、C20:5(EPA),总脂肪酸随着温度的升高依次呈现先升高后降低的趋势,在15℃时EPA占总脂肪酸的百分含量达到最高值25.71%；将在20℃条件下培养至指数生长末期的三角褐指藻迅速转移到4℃下培养,胁迫0,6,12,24h,与在不同温度下培养相比,脂肪酸种类减少,主要脂肪酸有C14:0、C16:0、C16:1、C18:1、C20:5(EPA),而EPA的相对百分含量最高可达30.86%。第二部分是硅胁迫对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步探讨。用含有不同硅浓度(0、12、24、48、96和384μmol/L)的培养基对三角褐指藻进行培养,单因子方差分析表明藻细胞密度随着硅浓度的增加而增加,在硅浓度为96μmol/L时藻细胞密度达到最大值,其后反而下降。将此硅浓度下的三角褐指藻培养至指数生长期,硅胁迫时间设置6个时间段,分别为0、2h、6h、12h、24h和48h,结果显示,在6h、48h时EPA含量有所降低,而在限制2h,12h,24h有所增加,并在限制时间24h时达到最高值。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-11
前言 综述—海洋微藻EPA和DHA的研究进展与前景  11-29
  1 EPA、DHA的结构与代谢  11-13
  2 EPA和DHA生理功能  13-14
    2.1 促进胆固醇代谢、防止脂质在肝脏和动脉壁积累  13
    2.2 提高血清中高密度脂质蛋白含量,降低血脂  13
    2.3 降低血小板的凝集能力,减少血栓的产生  13
    2.4 降低炎症反应  13-14
    2.5 提高免疫力  14
    2.6 健脑名目  14
  3 EPA和DHA的来源  14-16
    3.1 鱼类  14-15
    3.2 细菌  15
    3.3 真菌  15
    3.4 酵母  15
    3.5 海洋藻类  15-16
  4 培养海洋微藻生产PUFA的研究背景  16-17
  5 培养海洋微藻生产PUFA的现状  17-18
  6 影响微藻脂肪酸组成和含量的因素  18-24
    6.1 微藻的种类和品系  18-19
    6.2 培养液的组成成分对脂肪酸组成的影响  19-21
    6.3 生长时期对微藻脂肪酸的影响  21-22
    6.4 温度对脂肪酸组成的影响  22
    6.5 盐度对脂肪酸组成的影响  22-23
    6.6 PH对脂肪酸组成的影响  23
    6.7 通气、培养密度和超声波对微藻脂肪酸的影响  23-24
    6.8 培养方式对微藻脂肪酸的影响  24
    6.9 影响脂肪酸组成的其他因素  24
  7 EPA、DHA的开发利用及需要解决的关键问题  24-26
    7.1 开发利用  24-25
    7.2 需要解决的关键问题  25-26
  8 培养海洋微藻生产EPA、DHA的前景  26-29
第一章 三角褐指藻的藻种培养、分离鉴定及不同生长时期脂肪酸合成情况  29-40
  1 三角褐指藻的藻种的分离纯化与鉴定  29-34
    1.1 分类地位  29
    1.2 形态特征  29
    1.3 藻种来源  29
    1.4 藻种培养  29-30
    1.5 藻种分离纯化与鉴定  30-33
    1.6 试验结果  33-34
  2 三角褐指藻不同生长阶段脂肪酸组成含量比较  34-40
    2.1 研究方法  34-36
    2.3 试验结果  36-38
    2.4 分析与讨论  38-40
第二章 温度对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步研究  40-47
  1 材料与方法  40-42
    1.1 藻种  40
    1.2 培养基与培养条件  40-41
    1.3 细胞生长速率的测定  41
    1.4 脂肪酸成分分析  41
    1.5 温度实验及统计方法  41-42
    1.6 数据分析  42
  2 结果  42-45
    2.1 温度对三角褐指藻生长的影响  42-43
    2.2 温度对脂肪酸成分的影响  43-45
  3 讨论  45-47
    3.1 关于温度对三角褐指藻生长的影响  45-46
    3.2 关于温度对三角褐指藻脂肪酸组成的影响  46-47
第三章 硅胁迫对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步研究  47-53
  1 引言  47-48
  2 材料与方法  48-49
    2.1 藻种培养  48
    2.2 藻细胞生长的测定  48
    2.3 脂肪酸组成的气相色谱分析  48-49
    2.4 统计分析  49
  3 结果分析  49-51
    3.1 生长曲线  49-50
    3.2 三角褐指藻脂肪酸分析  50-51
  4 讨论  51-53
第四章 工作总结与展望  53-55
  1 总结  53
    1.1 实验创新点  53
    1.2 实验不足之处  53
  2 工作展望  53-55
参考文献  55-65
附录Ⅰ 常见的脂肪酸  65-66
附录Ⅱ EPA和DHA的重要生理功能  66-68
附录Ⅲ F/2微藻通用营养盐母液配制  68-70
附录Ⅳ 人工海水配方  70-71
致谢  71-73
个人简历  73
发表的学术论文  73

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