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番茄花药培养体系的优化

作　者: 蒋青青
导　师: 陈火英；刘杨
学　校: 上海交通大学
专　业: 园艺
关键词: 番茄 花药培养 水解酪蛋白 水解乳蛋白 愈伤组织增殖
分类号: S641.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


以4个番茄F1杂交种(C1,C2,C8,C10)和1个番茄纯系（2052）为试验材料进行番茄花药培养,研究了花蕾外部形态与小孢子发育时期的相关性;对花药愈伤组织诱导的影响因素如花药长度、花药消毒方法、基因型、基本培养基、激素组合配比和预处理;花药愈伤增殖影响因素如基本培养基、激素组合配比、水解酪蛋白浓度（Casein Hydrolysate）、水解乳蛋白浓度（Lactoalbumin Hydrolysate）、硝酸银和活性炭浓度;花药愈伤分化影响因素如基因型和激素等进行了试验研究,以期建立并优化得到一个高效的番茄花药培养体系。全文试验结果如下:1.当番茄花蕾长度为7.3-10.2mm,花药长度为4.2-7.1mm时,花冠和花药呈绿色、黄绿色或淡黄色,多数小孢子处于单核中晚期时,为番茄花药培养的适宜时段。2.番茄花药消毒较适的消毒方法为70%酒精消毒30s或者紫外线照射花蕾表面30s后,再用15%NaClO并加入2滴吐温-20消毒l0min。3.参试5个基因型花药愈伤组织诱导率不同,其中C10的诱导率最高,为34.22%,与其他4个基因型存在极显著的差异;番茄花药愈伤组织诱导的较适宜两个激素组合是0.5mg.L-1IAA+1.0mg.L-16-BA（MS2）和0.5NAA mg.L-1 +1.0mg.L-16-BA（MS5）;诱导培养基中附加蔗糖40g.L-1能显著的提高愈伤诱导率;低温预处理2d时,花药的诱导率为7.78%,是未经低温预处理的2倍左右,0.6 mol.L-1甘露醇预处理2d,花药愈伤诱导率为8.14%,是对照组的2倍。4.番茄花药愈伤增殖的最适培养基为1.0 mg.L-1IAA+1.0 mg.L-1 6-BA（M2）和0.5 mg.L-1NAA+ 0.5mg.L-1KT（M3）,其中C8在M2增殖培养基中,愈伤增殖系数高达0.61;在M2和M3较适增殖培养基中添加5g.L-1CH或0.5g.L-1LH,愈伤增殖系数进一步增大,最大可达1.0;添加10μmol.L-1硝酸银或0.2-0.5 g.L-1的活性炭可以有效地减轻愈伤组织的褐化状况,增强愈伤的活力。5.番茄花药培养的较适分化培养基是MS培养基附加2mg.L-1ZT和0.2mg.L-1NAA（M7）或单独添加2mg.L-1ZT（M8）;基因型也显著影响愈伤组织的分化,供试材料中只有C2的愈伤组织分化得到1个不定芽,C1的愈伤分化得到1个单叶,2052愈伤分化得到10个不定根。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-12
第一章 绪论  12-29
  1.1 引言  12-13
  1.2 番茄单倍体创制途径  13-14
  1.3 番茄单倍体材料的应用  14-15
  1.4 番茄花药培养研究概况  15-18
    1.4.1 花药培养意义  15-16
    1.4.2 番茄花药培养研究进展  16-18
  1.5 番茄花药培养的影响因素  18-27
    1.5.1 花药培养效率  18-19
    1.5.2 供体植株基因型  19-20
    1.5.3 供体植株生长状况及生长环境  20-21
    1.5.4 花粉发育时期  21
    1.5.5 预处理  21-22
    1.5.6 培养基及添加物  22-26
    1.5.7 培养条件  26-27
  1.6 存在问题与展望  27-29
    1.6.1 存在问题  27-28
    1.6.2 展望  28-29
第二章 材料与方法  29-37
  2.1 试验材料  29
  2.2 试验方法  29-37
    2.2.1 取材  29
    2.2.2 外植体消毒和接种  29
    2.2.3 不同消毒试剂的处理方法  29-30
    2.2.4 番茄花蕾外部形态与小孢子发育时期的观察  30
    2.2.5 番茄花药长度对花药愈伤组织诱导率影响的研究  30-31
    2.2.6 花药愈伤组织诱导影响因素的研究  31-33
    2.2.7 花药愈伤组织增殖影响因素的研究  33-34
    2.2.8 花药愈伤组织分化影响因素的研究  34-35
    2.2.9 培养条件  35-36
    2.2.10 培养基更换频率  36
    2.2.11 统计方法  36-37
第三章 结果与分析  37-54
  3.1 花蕾外部形态与小孢子发育时期的相关性  37-40
  3.2 花药长度对愈伤组织诱导影响的研究  40-41
  3.3 番茄花药消毒方法的筛选  41-42
  3.4 基因型和基本培养基对花药愈伤组织诱导的影响  42-43
  3.5 不同激素组合对愈伤组织诱导的影响  43-44
  3.6 碳源种类和浓度对愈伤组织诱导的影响  44-46
  3.7 接种密度对愈伤组织诱导的影响  46-47
  3.8 预处理对花药愈伤组织诱导的影响  47-48
  3.10 不同基本培养基与激素组合对愈伤组织增殖的影响  48-49
  3.11 水解酪蛋白对愈伤增殖的影响  49-50
  3.12 水解乳蛋白对愈伤增殖的影响  50
  3.13 不同硝酸银浓度花药愈伤组织褐化率及愈伤增殖系数的影响  50-51
  3.14 不同活性炭浓度对花药愈伤组织褐化率及愈伤增殖系数的影响  51-52
  3.15 基因型和培养基对花药愈伤组织分化的影响  52-54
第四章 讨论与结论  54-62
  4.1 花蕾外部形态及小孢子发育时期与花药愈伤组织诱导率的相关性  54-55
  4.2 基因型对花药愈伤组织诱导的影响  55
  4.3 不同激素组合对愈伤组织诱导的影响  55-56
  4.4 碳源种类和浓度对愈伤诱导的影响  56-57
  4.5 预处理对花药愈伤组织诱导的影响  57-58
  4.6 不同基本培养基与激素组合对愈伤组织增殖的影响  58
  4.7 水解酪蛋白和水解乳蛋白对愈伤组织增殖的影响  58-59
  4.8 花药愈伤组织褐化影响因素的研究  59-60
    4.8.1 硝酸银对愈伤组织褐化的影响  59
    4.8.2 活性炭对愈伤组织褐化的影响  59-60
  4.9 基因型对花药愈伤组织分化的影响  60-61
  4.10 激素种类和浓度对花药愈伤组织分化的影响  61-62
全文结论  62-63
参考文献  63-68
附录  68-70
图版1  70-71
图版2  71-73
致谢  73-74
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文  74

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 茄果类 > 番茄（西红柿）
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