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番茄温敏核不育系及杂交组合花药培养研究
作 者: 张例
导 师: 韦鹏霄
学 校: 广西大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 番茄 温敏核不育系 杂交组合 花药培养 愈伤组织
分类号: S641.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
本论文以番茄温敏核不育系及杂交组合(大107、地D4、大107×牛番茄、地D4x红昆仑)为试验材料进行花药培养研究,主要包括3个方面(1)番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导试验;(2)番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化试验;(3)番茄温敏核不育系花药及愈伤组织的细胞学观察。主要研究结果如下:1番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织诱导试验结果:(1)在2,4-D配合6-BA或KT进行的双因子的激素配组愈伤组织诱导的比较试验中,以2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L组合的效果最好,番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导率最高,分别为:大107(35.80%)、大107×牛番茄(25.85%)、地D4(36.65%)、地D4×红昆仑(28.13%)。(2)在2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L的基础上,分别与CPPU、TDZ, KT、ZT进行3因子激素组合花药愈伤组织诱导比较试验,以2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT 1.5 mg/L组合效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大107(65.07%)、大107×牛番茄(43.10%)、地D4(66.20%)、地D4×红昆仑(46.76%)。(3)4℃不同时间的预处理试验结果表明:亲本以72h为最佳预处理时间,愈伤组织诱导率分别为大10770.70%、地D471.55%,此时花药出愈时间也最早;杂交组合以预处理时间96h时,愈伤组织诱导率达到最大值,分别为大107×牛番茄51.14%、地D4×红昆仑53.71%,此时花药愈伤组织的出愈时间也最早。(4)在3种基本培养基比较试验中,MS培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导效果优于N6、white培养基。花药愈伤组织诱导率分别为大10764.79%、大107×牛番茄43.66%、地D465.63%、地D4×红昆仑47.32%。(5)在不同时间的光照处理中,以全暗处理的番茄花药愈伤组织出愈率最高,且褐化率最低,愈伤组织质地松软,有光泽,生长旺盛,愈伤组织诱导率分别为:大10764.79%、大107×牛番茄43.50%、地D465.54%、地D4×红昆仑47.46%。(6)在相同激素组合的条件下,以MS+2,4-D 1.Omg/L+6-B A 1.0mg/L+KT 1.5mg/L配合蔗糖浓度为35g/L的效果最佳,愈伤组织诱导率分别为大10764.44%、大107×牛番茄43.61%、地D4 66.94%、地D4x红昆仑47.50%。(7)在番茄花药愈伤组织的防褐化试验中,以PVP浓度为1.0g/L时的防褐化效果最好。花药愈伤组织褐化率分别为:大107 23.01%、大107x牛番茄39.20%、地D4 20.74%、地D4x红昆仑37.22%;出愈率分别为:大10773.58%、大107x牛番茄52.29%、地D475.28%、地D4x红昆仑56.57%。(8)在氨基酸的比较试验中,亲本以P2处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L +KT1.5mg/L+Pro500 mg/L+GLy50mg/L)的效果最好,愈伤组织诱导率分别为:大10781.49%、地D4 83.43%;杂交组合以P3处理(2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT 1.5mg/L +Pro500 mg/L+Gly75mg/L)的效果最优,愈伤组织诱导率分别为:大107x牛番茄59.23%、地D4x红昆仑64.74%。2番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织分化试验结果:(1)通过NAA、6-BA、KT、CPPU、TDZ、ZT等激素进行不同组合的愈伤组织分化比较试验,结果表明:在S5 (MS+NAA0.1mg/L+KT1.0mg/L+6-BA2.0mg/L), V3 (MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+TDZ0.04mg/L)、W4—W5 (MS+NAA0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L+ZT (0.6—0.8))mg/L激素组合上番茄温敏核不育系4个品种能分化出芽,分化率分别为:S5(大1072.22%、地D4 4.44%);V3(大1074.44%、大107×牛番茄2.22%、地D4 2.22%);W4--W5(大1076.67%、地D4 4.44%、大107×牛番茄2.22%、地D4×红昆仑2.22%)。(2)椰汁不同浓度的分化比较试验中,以MS+NAAO.1 mg/L+6-BA2.0mg/L+椰汁10%组合分化效果最好,分化率分别为:大1078.89%、大107x牛番茄2.22%、地D46.67%、地D4x红昆仑4.44%。(3)从番茄温敏不育系及杂交组合花药愈伤组织分化中,经芽的形成与生根,获得再生完整植株。3番茄温敏核不育系花药培养途径显微观察在番茄温敏核不育系花药愈伤组织形成途径中,通过石蜡切片,可观察到单核靠边期花粉粒、二胞体、多细胞球等时期,及能见到胚性与非胚性愈伤组织。
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-14 1 前言 14-21 1.1 番茄的概述 14-15 1.2 花药培养的意义和单倍体育种的应用价值 15 1.3 植物花药培养与花粉培养研究概括 15-18 1.3.1 花药培养与花粉培养的区别 15-16 1.3.2 植物花药培养研究概况 16-17 1.3.3 植物花粉培养研究概况 17-18 1.4 番茄花药培养的研究现状 18-20 1.4.1 国外研究现状 18-19 1.4.2 国内研究现状 19-20 1.5 石蜡切片研究 20-21 2 研究的目的与意义 21 3 材料与方法 21-43 3.1 试验材料 21-22 3.1.1 诱导试验材料 21 3.1.2 分化试验材料 21-22 3.2 主要的试验设备与药品 22 3.2.1 试验设备 22 3.2.2 试验药品 22 3.3 试验方法 22-24 3.3.1 培养基的制备与灭菌 22 3.3.2 番茄温敏核不育系及杂交后代花药取材时期的确定 22 3.3.3 番茄温敏核不育系及杂交后代花蕾消毒灭菌处理 22-23 3.3.4 番茄花药接种培养方法 23 3.3.5 观察与统计 23-24 3.4 番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织诱导的试验设计 24-35 3.4.1 不同浓度的2,4-D与6-BA或KT组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 24 3.4.2 不同浓度6-BA与2,4-D组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 24-25 3.4.3 不同浓度CPPU对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 25-26 3.4.4 不同浓度TDZ对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 26-27 3.4.5 不同浓度KT对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 27 3.4.6 不同浓度ZT对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 27-28 3.4.7 4℃不同时间预处理对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 28-29 3.4.8 不同基本培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 29 3.4.9 不同光照时间对温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 29-30 3.4.10 不同浓度的蔗糖对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 30 3.4.11 不同浓度的活性炭对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 30-31 3.4.12 硝酸银不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 31-32 3.4.13 PVP不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 32-33 3.4.14 不同浓度脯氨酸对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 33 3.4.15 不同种类及浓度氨基酸对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 33-34 3.4.16 甘氨酸不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的试验设计 34-35 3.5 番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织分化的试验设计 35-40 3.5.1 6-BA+KT与NAA不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈组分化的试验设计 35 3.5.2 不同种类生长素对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 35-36 3.5.3 NAA+KT与6-BA不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 36-37 3.5.4 NAA+6-BA与KT不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 37 3.5.5 NAA+6-BA与CPPU不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 37-38 3.5.6 NAA+6-BA与TDZ不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 38-39 3.5.7 NAA+6-BA与不同浓度ZT组合对番茄温敏核不育系花药愈组分化的试验设计 39 3.5.8 不同浓度椰子汁对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的试验设计 39-40 3.6 番茄温敏核不育系及杂交组合花药与愈伤组织石蜡切片的试验设计 40-43 3.6.1 试验材料 40 3.6.2 试验方法 40-43 4 结果与分析 43-73 4.1 番茄温敏核不育系及杂交组合花药愈伤组织诱导的试验结果 43-59 4.1.1 不同浓度2,4-D与6-BA或KT组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 43-44 4.1.2 2,4-D与6-BA不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 44-45 4.1.3 不同浓度CPPU对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 45-46 4.1.4 不同浓度TDZ对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 46-48 4.1.5 不同浓度KT对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 48-49 4.1.6 不同浓度ZT对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 49-50 4.1.7 4℃不同时间预处理对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 50 4.1.8 不同基本培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 50-51 4.1.9 不同光照时间对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 51-52 4.1.10 不同蔗糖浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 52-53 4.1.11 不同活性炭浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 53-54 4.1.12 不同浓度AgN03对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 54-55 4.1.13 不同浓度PVP对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 55-56 4.1.14 不同浓度脯氨酸对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 56-57 4.1.15 不同种类氨基酸对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 57-58 4.1.16 甘氨酸不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响 58-59 4.2 番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化试验结果 59-72 4.2.1 6-BA或KT与NAA不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的影响 59-61 4.2.2 不同种类生长素对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的影响 61-63 4.2.3 NAA+KT与6-BA不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的影响 63-64 4.2.4 NAA+6-BA与KT不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的影响 64-66 4.2.5 NAA+6-BA与CPPU不同浓度组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的效应 66-68 4.2.6 NAA+6-BA与TDZ不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的影响 68-69 4.2.7 NAA+6-BA与ZT不同浓度对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的效应 69-71 4.2.8 不同浓度椰子汁对番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化的效应 71-72 4.3 番茄温敏核不育系花药愈伤组织形成的细胞学研究 72-73 4.3.1 番茄温敏核不育系花药培养的花粉粒发育及愈伤组织形成 72 4.3.2 番茄温敏核不育系花药愈伤组织的细胞组织学特征 72-73 5 讨论与结论 73-79 5.1 番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的影响因子 73-77 5.1.1 不同激素种类、浓度及组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的差异 73 5.1.2 4℃不同时间的预处理对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导具有促进作用 73-74 5.1.3 不同基本培养基对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的作用 74 5.1.4 不同光照时间对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的效应 74-75 5.1.5 不同蔗糖浓度可调节番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的渗透压 75 5.1.6 不同种类添加物对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导及防褐化方面的效应 75-76 5.1.7 不同种类氨基酸、浓度及组合对番茄温敏核不育系花药愈伤组织诱导的作用 76-77 5.2 番茄温敏核不育系花药愈伤组织分化 77 5.3 番茄温敏核不育系花药愈伤组织形态发生与建成 77-79 致谢 79-80 参考文献 80-84 附录A 84-85 附录B 85-88 附录C (版图说明) 88-91
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 茄果类 > 番茄(西红柿)
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