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临床常见革兰阴性菌的耐药性检测及耐药基因和耐消毒剂基因的分析

作　者: 刘芳
导　师: 郝晓柯；何晓峰
学　校: 第四军医大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 革兰阴性菌耐药性多重耐药超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 耐消毒剂聚合酶联链反应(PCR) 基因
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的了解临床常见革兰阴性菌的抗菌药物耐药性和分布状况以及多重耐药菌的构成及分布情况。同时对临床常见耐药性革兰阴性菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV和CTX—M以及耐消毒剂基因qacE△1-sul1的存在状况加以分析。方法(1)用纸片扩散Kirby-bauer(KB)法测定空军总医院2008至2009年在住院病人中分离出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌共1374株的抗菌药物耐药性,并对其耐药性进行了分析。(2)用聚合酶联链反应(PCR)法检测155株临床常见的多重耐药细菌:产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌TEM、SHV、和CTX—M三种β-内酰胺酶基因以及耐消毒剂基因qacE△1-sul1。结果(1)两年内从住院患者各种标本中共分离获得1374株目的病原菌。大肠埃希菌384株,肺炎克雷伯菌263株,二者对氨苄西林的耐药率比较一致,均在90%以上,对亚胺培南和美洛培南等碳青霉烯类和含酶抑制剂的抗菌药物敏感;对其它抗菌药物大肠埃希菌的耐药性明显高于肺炎克雷伯菌。铜绿假单胞菌530株,较为敏感的有含酶抑制剂抗菌药物以及阿米卡星,头孢他啶和头孢吡肟,耐药率均在30%以下;对头孢哌酮、左氧氟沙星和亚胺培南耐药性较强,耐药率均在40%以上。鲍曼不动杆菌197株,较敏感的抗菌药物有碳青霉烯类和阿米卡星,耐药率分别为30%以下,碳青霉烯类则不到20%,对于三代和四代头孢菌素类抗菌药物则敏感性较低。分离出产ESBLs的大肠埃希菌、产ESBLs的肺炎克雷伯菌、多重耐药铜绿假单胞菌和多重耐药鲍曼不动杆菌共计230株,总检出率为16.7%。主要分布在神经外科、重症监护科、内分泌科等八个科室。(2)50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX—M基因阳性(32.0%)。21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX—M基因阳性(11.1%)。16株菌两种以上基因型同时阳性。在50株多重耐药的铜绿假单胞菌中37株TEM基因阳性(74.0%)未检出SHV和CTX—M基因。28株多重耐药的鲍曼不动杆菌中25株TEM基因阳性(89.3%),2株SHV阳性(7.1%),未检出CTX—M基因。耐消毒剂基因qacE△1-sul1在上述四种菌中分别检出37、24、46、28株,检出率依次为74.0%、88.9%、92.0和100%,总的检出率为87.1%。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类以及含酶抑制剂的复合抗菌药物比较敏感。铜绿假单胞菌对含酶抑制剂的复合抗菌药物敏感,而对亚胺培南耐药性较强。分离出的多重耐药主要分布于高龄、介入性治疗或有严重基础性疾病患者的科室。在四种多重耐药的革兰阴性菌中β-内酰胺酶基因的检出率均较高,说明随着广谱抗菌药物在临床上的广泛应用,细菌的多重耐药现象日趋严重。应该重视病原菌的分布和耐药性的定期监测,从而指导临床合理应用抗菌药物,有效控制感染并减少耐药菌的出现。耐消毒剂基因qacE△1-sul1的高检出率,对如何科学、有效的使用消毒剂提出了新的要求。

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-9
英文摘要  9-13
前言  13-15
文献回顾  15-22
正文临床常见革兰阴性菌的耐药性检测及其耐药菌的耐药基因和耐消毒剂基因分析  22-42
  第一部分临床常见革兰阴性菌的耐药性检测  22-31
    1 材料  22-23
    2 方法  23-24
    3 结果  24-28
    4 讨论  28-31
  第二部分多重耐药的革兰阴性杆菌的耐药基因和耐消毒剂基因分析  31-42
    1 材料  31-32
    2 方法  32-33
    3 结果  33-39
    4 讨论  39-42
小结  42-43
参考文献  43-48
附录  48-50
个人简历和研究成果  50-51
致谢  51

临床常见革兰阴性菌的耐药性检测及耐药基因和耐消毒剂基因的分析

内容摘要

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