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葡萄籽原花青素对肺癌SPC-A-1细胞放射增敏作用的实验研究

作　者: 张小芳
导　师: 赵健雄
学　校: 兰州大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 葡萄籽原花青素肺癌SPC-A-1细胞放疗增敏 MTT 集落形成流式细胞术 CyclinDl
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究葡萄籽原花青素对肺腺癌SPC-A-1细胞X射线放疗的增敏作用。方法：1.应用MTT法和集落形成法研究原花青素的放疗增敏效应,单因素方差分析确定增敏剂量和增敏作用,单击多靶曲线拟合计算增敏比及相关参数。2.流式细胞仪检测空白对照组(0Gy),单独X射线照射组(1Gy,5Gy)和药物增敏X射线组(100μg·mL-1原花青素1Gy,5Gy)细胞周期变化与凋亡3.荧光定量PCR检测单独X射线照射组(1Gy)和不同浓度药物增敏组(50μg·mL-1,100μg·mL-1,1Gy)对细胞周期调控因子cyclin D1表达的影响。结果：1.MTT检测结果表明,单独应用原花青素对SPC-A-1的抑制作用较弱,IC50大于400 ug/ml;细胞药物处理后对X射线的敏感性增加,单因素方差分析表明药物和X射线有协同作用,50 ug/ml时表现出增敏效应；集落形成结果表明,100 ug/ml药物对X射线增敏作用明显,增敏比为2.56。2.流式细胞术检测发现试验组细胞出现了明显的凋亡峰提示亚二倍体DNA含量的细胞数量明显增加,细胞凋亡率(28.4%)显著高于单独照射组(14.9%)及空白对照组(5.3%)。处理组与相应对照组分别比较差异有非常显著性意义(p<0.01)。实验结果说明,原花青素可以诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于G1期。3.荧光定量PCR结果发现,原花青素50、100μg·mL-1作用于细胞48 h较对照组CyclinD1mRNA的表达分别下降0.189和0.426倍,表明原花青素可下调细胞CyclinD1mRNA的转录表达。结论：葡萄籽原花青素对肺腺癌SPC-A-1细胞有显著的放疗增敏作用。其机制可能是通过抑制细胞的增殖,G1期阻滞,诱导细胞凋亡,下调CyclinD1基因表达等而发挥抗肿瘤作用。

全文目录

中文摘要  7-8
Abstract  8-10
缩略语  10-11
前言  11-15
第一部分 GSPE对SPC-A-1细胞生长的影响研究  15-22
  第一节 MTT法检测GSPE对X射线增敏作用  15-18
    1 材料与仪器  15
    2 实验方法  15-16
    3 结果与分析  16-17
    4 讨论  17-18
  第二节集落形成法检测GSPE对X射线照射后细胞增殖的抑制作用  18-22
    1 材料与仪器  18
    2 实验方法  18-19
    3 结果与分析  19-21
    4 讨论  21-22
第二部分流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡和细胞周期分布  22-25
  1 材料与仪器  22
  2 实验方法  22-23
  3 结果与分析  23-24
  4 讨论  24-25
第三部分荧光定量PCR检测细胞周期调控因子cyclin D1的表达  25-29
  1 研究目的  25
  2 材料与仪器  25
  3 实验方法  25-26
  4 结果与分析  26-27
  5 讨论  27-29
结论  29-30
展望  30-31
参考文献  31-34
综述  34-42
  参考文献  39-42
攻读硕士学位期间论文发表情况  42-43
攻读硕士学位期间科研情况  43-44
致谢  44

葡萄籽原花青素对肺癌SPC-A-1细胞放射增敏作用的实验研究

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