学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

SIRT6介导周期性张应变诱导的人脐静脉内皮细胞增殖

作　者: 王继尧
导　师: 严志强
学　校: 上海交通大学
专　业: 生物医学工程
关键词: 周期性张应变 HUVECs 增殖 SIRT6 IGF-1 磷酸化Akt 磷酸化NF-κB
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 56次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


内皮细胞(endothelial cells, ECs)作为血管壁主要细胞成分之一,其功能状态对于保持血管正常结构和功能的稳定极为重要。研究显示,血管内皮结构和功能失调将引发一系列级联反应,对于动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死和中风等心血管疾病的发生发展具有重要作用。ECs在血管中受到血流切应力和周期性张应变作用。血液动力学因素在血管重建中起重要作用,参与调控血管细胞分化、迁移、增殖和凋亡等功能。研究周期性张应变对ECs增殖的影响及其机制,对于探讨血管重建的力学生物学机制有重要的意义。本文应用FX-4000T细胞张应变加载系统,对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)施加10 %周期性张应变,频率为1.25 Hz,加载时间分别为12、24、48和72 h,以静态HUVECs为对照组。用CCK-8检测HUVECs增殖, Western blotting检测相关蛋白表达水平的变化;抑制剂或RNA干扰阻断可能的信号调节分子的活性或表达,观察其对HUVECs增殖的影响和SIRT6、IGF-1、p-NFκB和p-Akt等信号分子表达的变化,以探讨生理范围周期性张应变影响HUVECs增殖的分子机制。结果显示:①施加10%-1.25Hz周期性张应变12 h和24 h可以促进HUVECs增殖;②24 h周期性张应变加载降低HUVECs的SIRT6蛋白表达水平,而IGF-1、p-NFκB、p-Akt表达量上升。③SIRT6 RNA干扰促进HUVECs增殖,同时p-Akt水平上升,但IGF-1和p-NFκB的表达水平无明显差异;④IGF-1刺激上调了HUVECs增殖,同时上调其p-NFκB和p-Akt表达,而SIRT6表达无明显变化。⑤IGF-1 RNA干扰下调了HUVECs增殖以及p-NFκB和p-Akt表达,但SIRT6表达无显著变化。⑥Bay 11-7082处理HUVECs抑制其p-NFκB表达水平,结果发现SIRT6与p-Akt的表达也被下调,而IGF-1表达水平无显著差异。Wortmannin处理HUVECs后,其p-Akt表达被显著抑制,但是SIRT6、IGF-1和p-NFκB的表达未见明显差异。上述结果表明,生理范围的周期性张应变促进了HUVECs增殖,其机制可能是张应变通过促进HUVECs的IGF-1分泌,和下调SIRT6表达,而SIRT6又通过PI3K/Akt信号通路参与调控HUVECs的增殖。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-14
1 绪论  14-20
  1.1 机械应力与内皮细胞功能调节  14-16
  1.2 组蛋白去乙酰化酶  16-18
  1.3 IGF 与内皮细胞功能  18-19
  1.4 本文研究的主要内容和和意义  19-20
2 实验材料及仪器  20-23
  2.1 实验仪器  20-21
  2.2 试剂  21-22
  2.3 主要溶液成分及配制  22-23
3 实验方法  23-29
  3.1 原代 HUVECs 培养  23-24
  3.2 HUVECs 鉴定  24-25
  3.3 细胞张应变加载系统  25-26
  3.4 实验分组  26-27
  3.5 蛋白提取  27
  3.6 蛋白免疫印迹检测  27-28
  3.7 细胞增殖实验  28
  3.8 加药处理实验  28
  3.9 RNA 干扰实验  28-29
  3.10 统计学方法  29
4 结果  29-41
  4.1 HUVECs 原代培养与鉴定  29-31
  4.2 周期性张应变促进 HUVECs 增殖  31
  4.3 周期性张应变降低 HUVECs 的SIRT6 表达  31-32
  4.4 周期性张应变促进 HUVECs IGF-1 表达和 NF-κB 与 Akt 的磷酸化  32-33
  4.5 SIRT6 干扰促进 HUVECs 的增殖  33-34
  4.6 SIRT6 干扰促进 HUVECs Akt（Ser473）的磷酸化  34-35
  4.7 IGF-1 促进 HUVECs 增殖  35-36
  4.8 IGF-1 促进 HUVECs NF-κB（Ser536）与 Akt（Ser473）的磷酸化  36-37
  4.9 IGF-1 RNA 干扰降低 HUVECs 的增殖  37-38
  4.10 IGF-1 RNA 干扰降低 NF-κB（Ser536）与Akt（Ser473）的磷酸化  38-39
  4.11 抑制 HUVECs NF-κB 降低 SIRT6 的表达  39-40
  4.12 抑制 HUVECs Akt 降低 SIRT6 的表达  40-41
5 讨论  41-45
全文小结  45-46
参考文献  46-51
致谢  51-52
攻读硕士学位期间已完成或发表的学术论文  52

相似论文

  1. Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
  2. 半胱胺对瘘管手术后山羊外周血T淋巴细胞增殖的影响及其机理研究,S858.27
  3. 半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂对口腔肿瘤细胞抑制作用实验研究,R739.8
  4. 大鼠再生肝脏细胞周期的研究,Q253
  5. 罗格列酮对大鼠溃疡性结肠炎PPARγ、NF-κB和TNF-α表达的影响,R574.62
  6. OGP和IGF-Ⅰ对人牙周膜细胞生物学功能的影响,R781.4
  7. NF-κB信号通路在应力介导的人牙周膜成纤维细胞增殖中的作用及其机制,R781.4
  8. 糖尿病视网膜病变行玻切手术不同时期植入人工晶体的临床观察,R779.66
  9. 人参皂苷Rb1抗血管平滑肌细胞增殖及球囊损伤所致颈动脉内膜增生的研究,R285.5
  10. 自噬对血管平滑肌细胞增殖的影响,R363
  11. 血清IGF-1在肺癌和胃肠道恶性肿瘤诊断中的价值研究,R730.4
  12. RNA干扰沉默细胞周期蛋白依赖激酶8基因对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响,R735.35
  13. 不同方法诱导SD大鼠下颌下腺干/祖细胞增殖研究,R782
  14. 人生长激素与人催乳素在肝癌中的表达及作为肝癌治疗的可能性靶点,R735.7
  15. 高活性先导化合物衍生及生物性能研究,TQ450.1
  16. 高尿酸血症对OLETF及LETO大鼠主动脉平滑肌细胞ki-67及URAT1表达的影响,R589.7
  17. 注射用匹多莫德的免疫活性研究,R96
  18. MIR-21在周期性张应变诱导大鼠血管平滑肌细胞细胞外基质表达中的作用及其机制,R363
  19. 盐酸普鲁卡因对人结肠癌HT-29细胞Syk基因甲基化及表达的影响,R735.35
  20. 不同浓度的芬太尼对体外培养人肝癌细胞株HepG2的影响,R965

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
© 2012 www.xueweilunwen.com