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褪黑素及其受体激动剂对脂肪细胞胰岛素抵抗相关因子影响的研究

作　者: 许欢妮
导　师: 尹卫东
学　校: 南华大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 3T3-L1脂肪细胞游离脂肪酸褪黑素褪黑素受体激动剂(Neu-P11) 胰岛素抵抗脂联素
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:研究Mel及其受体激动剂Neu-P11对FFA诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗相关因子AMPK、P-AMPK、ACC、P-ACC、瘦素、脂联素、脂联素受体1的表达及葡萄糖摄取能力和甘油三酯含量的影响。方法:实验分为三个部分,第一部分是细胞的诱导分化,用经典的“鸡尾酒”法即IBMX、地塞米松和胰岛素三联培养诱导3T3-L1成纤维细胞分化成脂肪细胞,并用油红O染色鉴定脂肪细胞形态。第二部分是利用FFA诱导脂肪细胞的胰岛素抵抗,葡萄糖氧化酶法检测细胞摄取葡萄糖的能力。第三部分是检测Mel及其受体激动剂NEU-P11对FFA处理的3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取能力及其相关蛋白瘦素、脂联素、脂联素受体1、AMPK、P-AMPK、ACC、P-ACC表达的影响,并采用甘油三酯试剂盒检测甘油三酯的表达情况。结果:用“鸡尾酒”法诱导3T3-L1成纤维细胞10～12天以后,90%分化为成熟的脂肪细胞,油红O染色可见圆形、脂滴很多呈典型的“戒环样”形态。用棕榈酸诱导脂肪细胞发生胰岛素抵抗,结果显示:300uM的棕榈酸处理12小时后,细胞摄取葡萄糖的能力明显降低,细胞内甘油三酯的含量增加,脂联素及脂联素受体1、瘦素、AMPK及磷酸化AMPK、ACC及磷酸化ACC的表达水平下降,Mel/Neu-P11于FFA处理结束前6小时加入一起孵育,结果显示:细胞摄取葡萄糖的能力随着胰岛素浓度的增加而显著增加,甘油三酯的含量则随着Mel/Neu-P11的干预处理而降低,接近正常水平,同时我们还发现:脂联素及脂联素受体1、AMPK及磷酸化AMPK、ACC及磷酸化ACC的表达水平随着Mel/Neu-P11的干预处理呈现上调的趋势,接近正常水平,瘦素在Mel/Neu-P11干预处理6小时后变化不明显,无统计学意义。结论:1.Mel/Neu-P11可以增加棕榈酸处理的脂肪细胞在胰岛素刺激下的葡萄糖摄取能力;2. Mel/Neu-P11能够上调棕榈酸处理的脂肪细胞脂联素及脂联素受体1的表达,进一步激活AMPK,导致其下游蛋白ACC磷酸化失去活性,促进细胞内脂肪酸的氧化代谢,降低脂肪细胞内甘油三酯的含量,从而改善胰岛素抵抗。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-12
实验材料  12-14
实验方法  14-16
实验结果  16-27
讨论  27-35
结论  35-36
参考文献  36-41
综述  41-51
成果目录  51-52
致谢  52

褪黑素及其受体激动剂对脂肪细胞胰岛素抵抗相关因子影响的研究

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