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纳米氧化铜对SPF鸡组织铜锌沉积及肝脏铜蓝蛋白mRNA表达的影响

作　者: 隋菲菲
导　师: 朱连勤
学　校: 青岛农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: SPF鸡纳米氧化铜铜蓝蛋白 mRNA表达
分类号: S831.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 73次
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内容摘要

试验一纳米氧化铜对SPF鸡生长性能及血液生化指标的影响为了研究纳米氧化铜对SPF鸡生长性能及血液生化指标的影响,选取1日龄SPF白莱航蛋用公雏105只,随机分为7组,1组饲喂基础日粮；2～4组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜8 mg/kg; 5～7组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜175 mg/kg。结果显示,日粮中添加铜175 mg/kg和以纳米氧化铜形式添加铜8 mg/kg时,受试鸡日增重显著高于对照组(P<0.05)；试验至30 d,日粮中添加铜8 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡日增重显著高于硫酸铜和氧化铜组(P<0.05)。纳米氧化铜组受试鸡料重比明显低于硫酸铜和氧化铜组。以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜形式添加铜175 mg/kg时,受试鸡血浆CuZn-SOD、CP、MAO和CCO活性显著高于对照组和添加铜8 mg/kg时(P<0.05)；日粮添加铜8 mg/kg和175 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡CuZn-SOD、CP、MAO和CCO活性显著高于硫酸铜和氧化铜组(P<0.05)。试验表明,在饲料中添加纳米氧化铜能显著提高SPF鸡的生长性能、血浆Cu-Zn SOD、CP、MAO和CCO活性,表明纳米氧化铜比硫酸铜和氧化铜具有更好的生物学作用。试验二纳米氧化铜对SPF鸡全血和组织中铜和锌沉积的影响为了研究纳米氧化铜对SPF鸡全血和组织中铜和锌含量的影响,选取1日龄SPF白莱航蛋用公雏105只,随机分为7组,1组饲喂基础日粮；2-4组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜8 mg/kg; 5-7组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜175 mg/kg。结果显示,以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜形式添加铜175 mg/kg时,受试鸡全血、肝脏、胫骨、腺胃和十二指肠铜含量显著高于对照组和添加铜8 mg/kg时(P<0.05)；日粮添加铜8 mg/kg和175 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡全血、肝脏和胫骨铜含量显著高于硫酸铜和氧化铜组,硫酸铜组受试鸡腺胃铜和十二指肠铜含量显著高于纳米氧化铜和氧化铜组(P<0.05)。以纳米氧化铜形式添加铜175 mg/kg时,十二指肠锌含量显著高于添加硫酸铜时(P<0.05)。试验至20 d,日粮添加铜8 mg/kg和175 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡全血和肝脏锌含量高于硫酸铜组和氧化铜组(P<0.05)。试验至30 d,以硫酸铜和氧化铜形式添加铜175 mg/kg时,胫骨锌含量显著低于添加纳米氧化铜、对照组和以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜形式添加铜8 mg/kg时(P<0.05)；日粮添加铜8 mg/kg和175 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡全血锌含量高于硫酸铜组和氧化铜组(P<0.05)。试验表明,纳米氧化铜在肠道更容易被吸收,纳米氧化铜对锌的拮抗作用明显低于硫酸铜和氧化铜,纳米氧化铜是以纳米氧化铜粒子形式扩散吸收,而非以Cu2+形式主动吸收。试验三纳米氧化铜对SPF鸡肝脏铜蓝蛋白 mRNA表达的影响为了研究纳米氧化铜对SPF鸡肝脏铜蓝蛋白mRNA表达的影响，选取1日龄SPF白菜航蛋用公雏105只,随机分为7组,1组饲喂基础日粮；2-4组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜8 mg/kg;5～7组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式在基础日粮中添加铜175mg/kg。在试验的第10 d、20 d和30 d无菌采集鸡肝脏分离总RNA,并反转成cDNA。根据GenBank公布的基因序列设计引物,以β-actin为内参基因,通过引物特异性鉴定、标准曲线的绘制和重复性研究,建立了检测CP mRNA表达的基于SYBR Green I双链嵌合染料的Real-time PCR方法,进而对试验鸡肝脏中CP mRNA进行检测。结果表明,CP基因和β-actin内参基因的标准曲线符合线性要求,相关系数r均达到0.99以上；熔解曲线峰位单一,产物特异性好；检测限度达106拷贝／μl；日粮添加铜8 mg/kg时,纳米氧化铜组受试鸡肝脏CP mRNA表达量高于硫酸铜组和氧化铜组(P<0.05)。日粮添加铜175 mg/kg时,试验至10 d,纳米氧化铜组和硫酸铜组受试鸡肝脏CP mRNA表达量高于氧化铜组(P<0.05)；试验至20 d,纳米氧化铜组受试鸡肝脏CP mRNA表达量高于氧化铜组(P<0.05)；试验至30 d，纳米氧化铜组受试鸡肝脏CP mRNA表达量高于硫酸铜组和氧化铜组(P<0.05)。表明纳米氧化铜能显著提高肝脏中CP基因的表达量。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
中英文对照表  10-11
前言  11-12
第一章文献综述  12-23
第二章纳米氧化铜对SPF鸡生长性能及血液生化指标的影响  23-32
  1 材料与方法  23-25
  2 结果  25-29
  3 讨论  29-31
  4 小结  31-32
第三章纳米氧化铜对SPF鸡组织中铜和锌沉积的影响  32-40
  1 材料和方法  32-33
  2 结果  33-38
  3 讨论  38-39
  4 小结  39-40
第四章纳米氧化铜对SPF鸡肝脏铜蓝蛋白 mRNA表达的影响  40-48
  1 材料和方法  40-43
  2 结果  43-46
  3 讨论  46-47
  4 小结  47-48
结论  48-49
参考文献  49-55
致谢  55-56
导师组意见  56-57

纳米氧化铜对SPF鸡组织铜锌沉积及肝脏铜蓝蛋白mRNA表达的影响

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