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三个意蜂种群MRJP3的基因表达及其蛋白含量的比较分析

作　者: 刘建
导　师: 余林生
学　校: 安徽农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 意大利蜜蜂 MRJP3 荧光定量PCR 凝胶渗透色谱-激光光散射 SDS-PAGE
分类号: S892
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

蜂王浆中的蛋白主要分为水溶性蛋白和水不溶性蛋白,其中水溶性蛋白占总蛋白含量的46%-89%,为王浆中的主要蛋白成分,即MRJPs(Major Royal Jelly Proteins)。研究表明,MRJPs为一组同源蛋白组成的蛋白系列,共有九种蛋白组成;且蜂王浆很多生物学活性功能,都与MRJPs密切相关。MRJP3作为MRJPs系列中的一种重要蛋白,近年来被证明具有多种生理功能,如参与抗过敏反应等,是王浆活性功能的重要体现之一。本研究选取平湖浆蜂、苏王1号、美意三个产浆性能完全不同的种群为研究对象,首次利用荧光定量PCR技术比较mrjp3基因在三个种群的表达情况,并首次利用凝胶渗透色谱-激光光散射联用技术检测三种群工蜂生产蜂王浆中MRJP3的相对含量,并比较MRJP3在不同生产性能种群所产王浆中的差异,分析MRJP3的相对含量与蜂王浆产量之间的关系。同时利用SDS-PAGE电泳的方法分析当新鲜蜂王浆中MRJP3含量一致时,在一定温度下,MRJP3含量随贮存时间变化的规律。本研究主要结果如下:1荧光定量PCR结果显示三种群间mrjp3基因实时表达无明显差异,存在基因表达的一致性。表明mrjp3基因表达在王浆生产性能明显不同的种群间没有差异,王浆高产基因表达对mrjp3基因没有影响。当蜂群群势一致时,蜂王浆中的MRJP3的绝对量可能保持一致。2通过凝胶渗透色谱-激光光散射技术检测三种群蜂王浆中MRJP3相对含量结果显示三种群所产王浆MRJP3相对含量差异极显著,蜂王浆低产的美意种群MRJP3相对含量最高,高产的平湖浆蜂种群MRJP3相对含量最低,表明随着蜂王浆产量的不断上升,蜂王浆的品质呈现一定程度的降低。通过对蜂王浆产量与MRJP3相对含量的相关关系分析表明蜂王浆中MRJP3相对含量与蜂王浆生产性能回归公式:y=-0.8196x+231.41,单因素方差检验结果(P<0.05)表明MRJP3相对含量与其蜂王浆产量之间存在着显著的负相关。。3首次利用SDS-PAGE电泳方法分析MRJP3在一定温度下随贮存时间的变化规律,结果表明,蜂王浆中主要蛋白主要由分子量在40kd-80kd之间的蛋白质组成,随贮存时间的延长,MRJP3发生不同程度的降解,相对含量不断降低。通过对蜂王浆贮存时间与MRJP3相对含量的相关分析表明蜂王浆中MRJP3相对含量与蜂王浆贮存时间回归公式y=-0.6446x+12.037,检验结果表明两者存着显著的负相关(P<0.05)。

全文目录

中文摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
符号说明  9-10
文献综述  10-20
  1 蜂王浆概述  10-11
  2 蜂王浆主蛋白的研究进展  11-15
  3 蜂王浆主蛋白基因的研究进展  15-16
  4 荧光定量PCR 技术及在蜜蜂研究中的应用  16-20
1 引言  20-21
2 材料与方法  21-31
  2.1 试验材料  21-22
  2.2 三个种群MRJP3 基因表达量的比较  22-27
  2.3 三个意蜂种群蜂王浆中MRJP3 相对含量比较  27-28
  2.4 MRJP3 与温度相关性的SDS-PAGE 电泳分析  28-31
3 结果与分析  31-43
  3.1 实时荧光PCR 比较三个种群MRJP3 基因的表达  31-35
  3.2 GPC-MALLS 比较三个意蜂种群王浆中MRJP3 相对含量  35-40
  3.3 MRJP3 与温度相关性的SDS-PAGE 电泳分析  40-43
4 讨论  43-49
  4.1 实时荧光 PCR 比较三个种群 MRJP3 基因的表达  43-45
  4.2 GPC-MALLS 比较三个意蜂种群王浆中 MRJP3 相对含量  45-47
  4.3 MRJP3 与温度相关性的 SDS-PAGE 电泳分析  47-49
全文结论  49-50
参考文献  50-57
致谢  57-58
作者简介  58-59
在读期间发表论文  59

三个意蜂种群MRJP3的基因表达及其蛋白含量的比较分析

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