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炎症介质白三烯D4在慢性乙型肝炎和原发性肝癌发生发展中的作用

作　者: 周艳
导　师: 揭盛华
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 慢性乙型肝炎(CHB) 原发性肝癌(HCC) 乙型肝炎病毒(HBV) 白三烯D4(LTD4) 人肝癌细胞系SMMC-7721细胞 LTD4 MK-571
分类号: R512.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:研究Leukotriene D4(LTD4)在慢性乙型肝炎(CHB)和原发性肝癌(HCC)患者血清中的表达水平,并分析其与血清ALT、AST、γ-GT、HBV-DNA和AFP间的相关性,进而探讨LTD4在CHB和HCC发生发展中的作用。方法:选取CHB患者21例(男16例,女5例,平均年龄37.6±12.7岁),其中慢性肝炎14例、慢性重型肝炎7例;HCC患者71例(男64例,女7例,平均年龄48.9±11.1岁),其中合并HBV者62例;及健康体检者(对照组)20例为研究对象。应用酶联免疫法(ELISA)检测血清中LTD4水平,全自动生化仪检测ALT、AST、γ-GT水平,化学发光仪和基因扩增仪分别检测AFP和HBV-DNA。结果:CHB和HCC患者血清LTD4水平均明显高于对照组(P<0.01),且其水平在CHB组、HCC合并HBV组、单独HCC组及对照组中逐渐下降。在CHB中,慢性肝炎与重型肝炎比较,LTD4水平差异无统计学意义(P>0.05);且LTD4水平与ALT、AST、γ-GT及HBV-DNA含量间无相关性(P>0.05)。在HCC中,合并HBV组与单独HCC组相比,LTD4水平有显著性差异(P<0.01);分别比较转移组与无转移组、治疗组与未治疗组,结果差异均无统计学意义(P>0.05);LTD4水平仅与ALT呈正相关(P<0.05),而与AST、γ-GT、AFP无相关性(P>0.05)。结论:LTD4作为重要的炎症介质,可能参与了CHB的发生发展,并在促进CHB向HCC进展的过程中起着一定的作用,而且对肝癌细胞自身的肿瘤生物学产生影响。目的:研究LTD4对肝癌细胞的增殖、周期、凋亡及迁移的影响,探讨其在HCC发生发展机制方面的作用。方法:培养人肝癌细胞系SMMC-7721细胞进行实验,不同浓度LTD4处理细胞24h、48h、72h后,采用CCK-8法测定SMMC-7721细胞的增殖活性及LTD4拮抗剂对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期变化;Annexin V/PI双标法检测细胞凋亡变化;8μm Transwell法检测肝癌细胞的迁移作用。结果:在1nmol/L处LTD4作用48h时促进SMMC-7721细胞的增殖作用最强(P < 0.01),可达59%;抑制剂MK571浓度在10-8-10-6mol/L时可部分拮抗LTD4,而在10-5mol/L处能明显抑制细胞生长(P < 0.05);LTD4在有效浓度内作用SMMC-7721细胞后,M1/M2期细胞的比例明显下降(P < 0.05),促进细胞周期从M1期向M2期分化,呈剂量依赖性;其次,它可明显抑制细胞凋亡(P<0.05),以早期凋亡为主,呈剂量依赖性;此外,LTD4还诱导癌细胞的迁移(P<0.05),其促进作用亦呈剂量依赖性。结论:LTD4作为一种重要的炎症介质在肝癌的发生发展中发挥了一定的作用,有可能作为一个新的指标来辅助肝癌的诊断及预后的判断,其拮抗剂也可能成为化学预防慢性肝炎向肝癌发展的潜在的新药物。

炎症介质白三烯D4在慢性乙型肝炎和原发性肝癌发生发展中的作用

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