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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人子宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞Syk基因异常甲基化和表达的影响

作 者: 徐淑云
导 师: 赵淑萍
学 校: 青岛大学
专 业: 妇产科学
关键词: Syk基因 HeLa细胞系 SiHa细胞系 甲基化 5-氮杂-2’-脱氧胞苷
分类号: R737.33
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 38次
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内容摘要


目的研究不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人子宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞Syk基因启动子区异常甲基化和表达的影响。方法MSP方法检测宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞启动子区Syk基因甲基化情况;MTT检测不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预后HeLa细胞的增殖情况;MSP法检测不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预前后HeLa及SiHa细胞的Syk基因启动子区的甲基化状态的改变;RT-PCR法检测用药前后HeLa及SiHa细胞中SykmRNA表达水平的变化。结果HeLa细胞Syk基因启动子区存在甲基化,SiHa细胞Syk基因启动子区无甲基化;5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞的生长有抑制作用,5-氮杂-2’-脱氧胞苷浓度为1μM时对HeLa细胞生长的抑制作用最佳;5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞启动子区甲基化有逆转作用,药物浓度为1μM时去甲基化效果最好:可使HeLa细胞SykmRNA的表达水平明显增高。结论HeLa细胞Syk基因启动子区存在甲基化,5-氮杂-2’-脱氧胞苷干预能使其Syk甲基化的基因重新表达并抑制细胞生长。

全文目录


中文摘要  2-3
Abstract  3-6
引言  6-8
第一章 材料与方法  8-20
  1 实验材料  8-11
    1.1 主要细胞系  8
    1.2 主要试剂  8
    1.3 试剂配制  8-9
    1.4 引物设计及合成  9-10
    1.5 主要仪器及用品  10-11
  2 实验方法  11-20
    2.1 HeLa细胞SiHa细胞的培养及药物处理  11-12
    2.2 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性  12
    2.3 细胞系Syk基因启动子区甲基化特异性检测  12-16
    2.4 细胞系Syk基因启动子区mRNA的表达分析  16-19
    2.5 统计学分析  19-20
第二章 结果  20-25
  1 宫颈癌细胞系甲基化情况  20
  2 不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞增殖的影响  20-22
  3 MSP法检测宫颈癌细胞系在用药前、后的Syk基因甲基化改变  22
  4 不同药物浓度对HeLa与SiHa细胞Syk mRNA表达的情况  22-23
  5 不同药物浓度对HeLa细胞SykmRNA表达的影响(药物影响程度)  23-25
第三章 讨论  25-29
结论  29-30
参考文献  30-32
文献综述  32-45
  参考文献  40-45
攻读学位期间的研究成果  45-46
致谢  46-48

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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