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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人子宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞Syk基因异常甲基化和表达的影响
作 者: 徐淑云
导 师: 赵淑萍
学 校: 青岛大学
专 业: 妇产科学
关键词: Syk基因 HeLa细胞系 SiHa细胞系 甲基化 5-氮杂-2’-脱氧胞苷
分类号: R737.33
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 38次
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内容摘要
目的研究不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人子宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞Syk基因启动子区异常甲基化和表达的影响。方法MSP方法检测宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞启动子区Syk基因甲基化情况;MTT检测不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预后HeLa细胞的增殖情况;MSP法检测不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预前后HeLa及SiHa细胞的Syk基因启动子区的甲基化状态的改变;RT-PCR法检测用药前后HeLa及SiHa细胞中SykmRNA表达水平的变化。结果HeLa细胞Syk基因启动子区存在甲基化,SiHa细胞Syk基因启动子区无甲基化;5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞的生长有抑制作用,5-氮杂-2’-脱氧胞苷浓度为1μM时对HeLa细胞生长的抑制作用最佳;5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞启动子区甲基化有逆转作用,药物浓度为1μM时去甲基化效果最好:可使HeLa细胞SykmRNA的表达水平明显增高。结论HeLa细胞Syk基因启动子区存在甲基化,5-氮杂-2’-脱氧胞苷干预能使其Syk甲基化的基因重新表达并抑制细胞生长。
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全文目录
中文摘要 2-3 Abstract 3-6 引言 6-8 第一章 材料与方法 8-20 1 实验材料 8-11 1.1 主要细胞系 8 1.2 主要试剂 8 1.3 试剂配制 8-9 1.4 引物设计及合成 9-10 1.5 主要仪器及用品 10-11 2 实验方法 11-20 2.1 HeLa细胞SiHa细胞的培养及药物处理 11-12 2.2 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性 12 2.3 细胞系Syk基因启动子区甲基化特异性检测 12-16 2.4 细胞系Syk基因启动子区mRNA的表达分析 16-19 2.5 统计学分析 19-20 第二章 结果 20-25 1 宫颈癌细胞系甲基化情况 20 2 不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HeLa细胞增殖的影响 20-22 3 MSP法检测宫颈癌细胞系在用药前、后的Syk基因甲基化改变 22 4 不同药物浓度对HeLa与SiHa细胞Syk mRNA表达的情况 22-23 5 不同药物浓度对HeLa细胞SykmRNA表达的影响(药物影响程度) 23-25 第三章 讨论 25-29 结论 29-30 参考文献 30-32 文献综述 32-45 参考文献 40-45 攻读学位期间的研究成果 45-46 致谢 46-48
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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