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富血小板血浆促进组织工程皮肤创面修复的实验研究

作　者: 潘思璇
导　师: 亓发芝；杨震；施越冬
学　校: 复旦大学
专　业: 外科学
关键词: 富血小板血浆生长因子皮肤缺损
分类号: R318.0
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

研究目的构建裸鼠背部创面模型,在此基础上研究富血小板血浆促进组织工程皮肤创面修复的情况。实验方法采集24位志愿者抗凝静脉血,利用密度梯度法,制备富血小板血浆,用全血细胞分析仪检测其血小板含量,并经激活剂激活后,用ELISA测定其中的生长因子浓度。利用裸鼠背部创面的模型,通过人工真皮组(A组)、组织工程皮肤组(B组)、碱性成纤维细胞生长因子组织工程皮肤组(C组)、表皮细胞生长因子组织工程皮肤组(D组)、富生长因子组织工程皮肤组(E组)的不同处理干预,观察实验第3、7、14、21天分别取材活检,行HE染色、PAS染色,PAN-CK、Vimentin、CK15、CD29免疫组化学检查等,比较其修复效果。研究结果制备的富血小板血浆中的血小板浓度是静脉血的4.5倍。PRP中的生长因子浓度高于全血中的生长因子浓度。不同处理干预方法对裸鼠背部创面的修复效果,E组大体观察创面感染率最低,肉芽组织生长较快,新生表皮较厚,愈合率最高。HE染色示E组创面中血管分布密度、胶原排列及新生表皮各层结构排列优于其他4组。PAN-CK免疫组化染色示E组表皮细胞排列整齐,分化成度优于D组。Vimentin免疫组化染色见C组真皮层成纤维细胞排列规律并优于E组。CK15、CD29免疫组化染色除人工真皮组皆有阳性细胞表达,提示有表皮干细胞生长。结论应用梯度离心法可成功制备富血小板血浆,其含有多种高浓度生长因子。富生长因子组织工程皮肤组的修复效果最好,碱性成纤维细胞生长因子组织工程皮肤组和表皮生长因子组织工程皮肤组次之,组织工程皮肤组优于人工真皮组。多种生长因子和组织工程皮肤共同使用可以更好的修复皮肤创面。

全文目录

目录  3-5
全文英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
引言  10-12
第一部分:富血小板血浆的制备及相关生长因子的测定  12-18
  1. 材料与方法  12-15
    1.1 实验相关材料  12-13
    1.2 富血小板血浆的制备方法  13-14
    1.3 生长因子浓度的检测方法  14-15
    1.4 结果分析和统计学处理  15
  2. 实验结果  15-17
    2.1 数据分析  15-16
    2.2 生长因子浓度的检测  16-17
  3. 结论  17-18
第二部分:组织工程皮肤修复裸鼠创面的实验研究  18-41
  1. 材料与方法  18-24
    1.1 实验动物与相关材料  18-19
    1.2 实验方法  19-20
    1.3 实验分组  20
    1.4 实验步骤  20-22
    1.5 标本采集  22-24
  2. 实验结果  24-41
    2.1 大体观察结果  24-26
    2.2 创面愈合分析和统计学处理  26-27
    2.3 组织学观察结果  27-41
讨论  41-46
全文总结  46-47
参考文献  47-51
综述  51-57
  参考文献  54-57
致谢  57-58

富血小板血浆促进组织工程皮肤创面修复的实验研究

内容摘要

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