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Ras蛋白在兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型中的作用

作　者: 江锋
导　师: 张方成
学　校: 华中科技大学
专　业: 神经外科学
关键词: 蛛网膜下腔出血脑血管痉挛 Ras蛋白
分类号: R743.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 22次
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内容摘要

目的制作蛛网膜下腔出血后的兔脑血管痉挛模型,研究兔模型的行为评分变化、脑血管痉挛的程度、脑血管壁内GTP-Ras和磷酸化ERK1/2的表达、血管内皮细胞的凋亡情况;探讨Ras蛋白与脑血管痉挛的关系。方法采用枕大池两次注血的方法,建立兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型。实验分组:第一大组分为对照组、SAH组、SAH+DMSO组、SAH+FTI-277组;第二大组分为对照组、SAH后3天组、SAH后5天组、SAH后7天组。研究①用评分表衡量第一大组兔模型前三天行为的变化、②用计算机软件测量第一大组兔模型脑血管横截面积、③用免疫组化检测第一大组兔模型磷酸化ERK1/2程度、④用WESTERN BLOT分别检测两个大组兔模型脑血管壁内Ras-GTP和磷酸化ERK1/2的表达水平、⑤用TUNEL法检测第一大组兔模型脑血管内皮细胞凋亡情况。结果①SAH组、SAH+DMSO组比SAH+FTI-277组行为评分较差,统计学差异显著。②S AH组、SAH+DMSO组与SAH+FTI-277组比较脑血管横截面积较小且有统计学意义,SAH+FTI-277组与对照组比较无明显统计学意义。③S AH组和SAH+DMSO组免疫组化显示磷酸化ERK1/2表达水平较高,SAH+FTI-277组和对照组磷酸化ERK1/2水平较低。④第一大组中,SAH组和SAH+DMSO组的GTP-Ras、磷酸化ERK1/2水平明显上调,与对照组和SAH+FTI-277组比较有统计学差异;第二大组中,SAH后3天组和SAH后5天组的GTP-Ras、磷酸化ERK1/2水平明显增高,SAH后7天组明显下降。⑤SAH组和SAH+DMSO组脑血管内皮细胞凋亡增多,对照组和SAH+FTI-277组凋亡细胞少见。结论实验中制作的兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型较为满意。兔SAH后,GTP-Ras表达明显增多,以及其对下游磷酸化ERK1/2的激活亦明显增加,其活化水平在时间上与脑血管痉挛的病理生理变化相对应,这提示Ras蛋白在兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型的病理过程中起到重要作用。另外,蛛网膜下腔出血后Ras蛋白的激活增加了血管内皮细胞的凋亡。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
前言  7-9
实验材料与实验方法  9-16
  1 实验材料  9-10
  2 实验方法  10-15
  3 统计分析  15-16
实验结果  16-29
  1 行为评分分析和脑血管痉挛程度观察  16-19
  2 免疫组化分析ERK1/2 的活化  19-20
  3. 蛛网膜下腔出血后基底动脉中Ras 和ERK1/2 的激活  20-24
  4.Ras 抑制剂在Ras 和ERK1/2 活化上的效应  24-26
  5.Ras 对蛛网膜下腔出血后血管内皮细胞出现凋亡的现象的影响  26-29
讨论  29-31
工作展望  31-32
致谢  32-33
参考文献  33-37
附录  37

Ras蛋白在兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型中的作用

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