学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

低氧预处理通过Akt/FKHR信号传导通路对成年大鼠短暂性全脑缺血保护作用的研究

作　者: 詹丽璇
导　师: 徐恩
学　校: 广州医学院
专　业: 神经病学
关键词: 低氧预处理 缺血耐受 全脑缺血 Akt FKHR
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 45次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


背景与目的:不同预处理形式可以诱导实验动物对缺血产生耐受。我们先前的研究发现,在成年wistar大鼠全脑缺血10min前2天给予30-60min浓度为8%的低氧预处理,可以使后续发生的短暂性全脑缺血后海马CA1区神经元死亡减少。Akt/FKHR信号转导通路对缺血后神经元的存活发挥重要作用,但成年雄性Wistar大鼠低氧预处理（8% O2）全脑缺血模型的缺血耐受机制中是否有该信号通路的参与目前未见报道。本研究在原来已建立的成年雄性Wistar大鼠低氧预处理（8% O2）全脑缺血模型的基础上,分别选择不同的低氧预处理时间及不同的低氧预处理与后续全脑缺血间隔时间,确定最佳的低氧预处理条件;观察低氧预处理介导的Akt及FKHR活性的改变;进一步应用PI3-K选择性抑制剂LY294002,观察Akt、FKHR活性的改变及探讨低氧预处理对成年大鼠全脑缺血神经保护作用,进一步阐明Akt/FKHR信号传导通路对成年大鼠低氧预处理全脑缺血后神经存活的影响及低氧预处理对成年大鼠短暂全脑缺血神经保护作用的潜在机制。材料与方法:选取年龄20-25周,体重200-300g的雄性Wistar大鼠。低氧预处理采用在密闭防潮箱内持续通入8%O2+92%N2混合气体。全脑缺血模型采用Pulsinelli经典的四血管阻塞模型。选择不同的低氧预处理时间及不同的低氧预处理与后续全脑缺血间隔时间,尼氏染色评估海马CA1神经元损伤情况,确定最佳的低氧预处理条件。通过Western blot、免疫组化方法观察缺血组、预处理-缺血组的不同再灌注时间点海马CA1区Akt与FKHR蛋白及磷酸化水平的变化,并进一步应用PI3-K选择性抑制剂LY294002,尼氏染色证实低氧预处理对成年大鼠全脑缺血神经保护作用的变化及Western blot观察Akt、FKHR磷酸化水平的改变。结果:（1）在成年大鼠全脑缺血10min前的2d给予30-120min浓度为8%的低氧预处理,可以使后续发生的短暂性全脑缺血后海马CA1区神经元死亡减少;（2）低氧预处理与全脑缺血间隔1-4d能产生缺血耐受;（3）最大的神经保护作用是在全脑缺血10min前1d给予30min浓度为8%的低氧预处理;（4）在单纯缺血组,与Sham比较,短暂全脑缺血再灌注0小时,P-Akt（Ser473）和P-FKHR（Ser256）出现显著下降,到再灌注4小时,两者短暂地显著上升,到再灌注24小时以及48小时,其磷酸化水平持续下降。在低氧预处理组:再灌注0小时,P-Akt（Ser473）和P-FKHR（Ser256）的变化与单纯缺血组相同,出现显著的下降,但预处理组的Akt、FKHR磷酸化水平下降趋势比单纯缺血组持续时间更长（持续至再灌注4小时）。到再灌注24小时以及48小时,其磷酸化水平持续升高。单纯缺氧组在单纯低氧后24h P-Akt（Ser473）和P-FHKR（Ser256）显著上升。Akt、FKHR蛋白水平在各组均未见明显变化（P>0.05）。（5）低氧预处理前30min脑室注射LY294002使低氧预处理-缺血组在再灌注24h P-Akt（Ser473）和P-FKHR（Ser256）明显减少,海马CA1区神经元损伤明显。结论:（1）在成年大鼠全脑缺血10min前1-4d给予30-120min浓度为8%的低氧预处理,可以使后续发生的短暂性全脑缺血后海马CA1区神经元死亡减少,其中低氧30min间隔1d神经保护最明显;（2）Akt/FKHR信号传导通路参与了低氧预处理对成年大鼠短暂全脑缺血的神经保护作用机制,低氧预处理通过激活Akt,使FKHR失活,从而对成年大鼠短暂性全脑缺血起神经保护作用。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-8
前言  8-10
材料方法  10-17
  1. 实验动物  10-11
  2. 主要实验仪器  11
  3. 主要实验试剂  11-12
  4. 实验方法及操作  12-17
结果  17-20
  1. 低氧预处理对大鼠海马神经元形态学的影响  17-18
  2. 低氧预处理-全脑缺血后 Akt 和 P-Akt(Ser473)的变化  18
  3. 低氧预处理-全脑缺血后 FKHR 和 P-FKHR(Ser256)的变化  18-19
  4. LY294002 对Akt、FKHR 活性及对低氧预处理全脑缺血后神经保护的影响  19-20
讨论  20-24
结论  24-25
参考文献  25-28
附图  28-39
在读期间参与的研究及参加的会议  39-40
综述 Akt/PKB 信号传导通路与脑缺血  40-48
  参考文献  45-48
致谢  48

相似论文

  1. 牛膝总皂甙对兔早期骨关节炎及PI3K/AKT通路的影响,R285.5
  2. CEF/TE方案新辅助化疗与乳腺癌MAPK/PI3K通路及Ki67关系的研究,R737.9
  3. PI3K/AKT与凋亡相关调控因子在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其关系,R737.31
  4. bFGF对鼠脑缺血/再灌注皮质区p-Akt（Ser473）、Fractalkine表达的影响,R743.3
  5. 大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛病理变化与细胞凋亡相关因子AKT、JNK的表达研究,R743.34
  6. EGFR及下游信号分子在卵巢癌中的表达及临床意义,R737.31
  7. 抑制GL15细胞中LRIG1基因的表达对p-EGFR,p-AKT和p-ERK的影响,R739.4
  8. 亮氨酸对原代培养大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响及mTOR介导的相关机制研究,R151
  9. 多发性骨髓瘤来源微泡：高效促肿瘤细胞增殖新信号途径,R733.3
  10. HBX在卵圆细胞中上调AKT信号对c-Jun表达的影响,R735.7
  11. TGFβ对人肺腺癌细胞株A549增殖和侵袭能力的影响,R734.2
  12. Gas6经PI3K/Akt存活通路保护缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡,R363
  13. 新型蛋白激酶B小分子抑制剂的设计、合成和活性研究,R914
  14. miR-22在舌癌细胞对平阳霉素药物敏感性中的作用及分子机制,R739.86
  15. 血链球菌和/或牙龈卟啉单胞菌对血小板聚集作用的研究,R781.4
  16. AKT、p27Kip1与Cyclin E在胃癌中表达及意义,R735.2
  17. 兔颈总动脉狭窄后脑缺血再灌损伤对VEGF及AKt表达的影响及意义,R543.4
  18. 乙醛脱氢酶2在心脏早期代偿性肥厚中的作用及机制,R541.6
  19. 1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶抑制PI3K/Akt途径调节热休克蛋白70的机制研究,R96
  20. 前列腺素E_2对HuH7细胞Survivin表达影响的研究,R730.2
  21. 醋酸甲羟孕酮体外诱导卵巢上皮癌SKOV-3细胞凋亡的研究,R737.31

中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学
© 2012 www.xueweilunwen.com