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陕西苹果炭疽病病原及采后发病规律初探

作　者: 王素芳
导　师: 张荣
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 植物病理学
关键词: 苹果炭疽病尖孢炭疽菌 rDNA ITS序列采后发病规律
分类号: S436.611
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 33次
引　用: 1次
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内容摘要

苹果炭疽病又称苦腐病(Bitter rot),是苹果果实主要病害之一,引起苹果采前大量落果和采后贮藏中果腐。我国大部分苹果产区均有发生,一般年份病果率达30%左右,严重时可达50～60%。引起苹果炭疽病的病原有多种,但我国目前还没有开展此项工作。不同种类病原菌生物学特性不同,对不同的杀菌剂的敏感程度也不同,相应的防治措施可能也不同。本研究于2007年9月～2008年6月对陕西苹果炭疽病病果进行了采集、分离、鉴定,并对影响其采后发病因素进行了初步研究。结果如下:在陕西省杨凌、武功、延长、陇县、眉县、宝鸡、乾县、千阳、礼泉、绥德10个地区,共采集苹果炭疽病病果标本169份。通过对病原菌进行分离、纯化、致病性测定、形态学鉴定以及对核糖体DNA的ITS(内转录间隔区)序列分析和ITS区特异引物CaInt2/ITS4扩增,鉴定出引起陕西省苹果炭疽病的病原菌有两种:胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc.)和尖孢炭疽菌(C. acutatum J.H. Simmonds)。两种病原菌的区别主要在于分生孢子形态、菌落颜色和生长速度以及对引物CaInt2的特异性等。首次证实了中国苹果炭疽病可由尖孢炭疽菌(C. acutatum)引起。两种病原菌在陕西各地区均有分布,其中,胶孢炭疽菌(C. gloeosporioides)所占比例较高,为主要致病菌。采后苹果炭疽病的发生严重程度取决于储存温度、病原菌的接种量及侵入方式,25℃条件下,浓度为1×105个·mL-1,伤口接种为病害最适宜发生条件。三种贮藏方式中只有窑洞贮藏发病,其发病率高低因接种方法而异,伤口接种发病率高且快、发病严重,在接种一周后即开始发病,在接种后15天发病率达到100%,并在接种后30天发病最严重,病情指数为90.97,而以涂抹方式接种的苹果则在接种20天以后开始发病,发病率很低。冷库及MA条件下贮藏的苹果无论何种接种方式均不发病,说明冷库低温贮藏(0～2℃)可有效控制苹果采后炭疽病。不同接种方法试验结果表明:通过伤口接种的方式较涂抹、喷雾接种方式,接种成功率更高,接种发病快且严重。接种后5天,伤口发病率达77%,病斑直径为13mm;而涂抹、喷雾发病率分别为0、7%,病斑直径为0和6mm。说明炭疽菌更易从伤口侵入。在适宜温度下,伤口侵入更有利于苹果炭疽病的发生。不同浓度孢子悬浮液伤口接种苹果,在25℃恒温下暗光培养。结果表明:接种成功率在一定范围内随接种浓度增大而增大,病菌潜伏期和潜育期与接种浓度呈显著负相关;同时,接种体浓度在1×105个·mL-1,接种成功率为100%,病斑扩展速率在接种浓度1×10 5～1×106个·mL-1范围内最大。接种体浓度过高(1×107个·mL-1)或过低(1×104个·mL-1)都会影响病害的发生。不同贮藏温度试验表明:贮藏在0℃下不发病,10℃～15℃低温抑制苹果炭疽病的发生。高于15℃、低于40℃范围,炭疽病病斑直径和病情指数随温度升高而升高,而发病率则在25℃时最大。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-11
第一章文献综述  11-22
  1.1 苹果炭疽病的研究进展  11-21
    1.1.1 苹果炭疽病的发生与危害  11
    1.1.2 苹果炭疽病的症状  11
    1.1.3 苹果炭疽病的病原  11-12
    1.1.4 病原菌生物学特征  12-13
    1.1.5 苹果炭疽病的侵染与发病规律  13-15
    1.1.6 苹果炭疽病的防治策略  15-17
    1.1.7 炭疽菌的分子生物学检测和鉴定  17-21
  1.2 研究的目的和意义  21-22
第二章材料与方法  22-30
  2.1 试验材料和仪器  22-23
    2.1.1 供试材料  22
    2.1.2 试验所用试剂和培养基  22-23
    2.1.3 试验所用主要仪器  23
  2.2 试验方法  23-30
    2.2.1 标本的采集与保存  23
    2.2.2 病原菌的分离及保存  23
    2.2.3 致病性测定  23
    2.2.4 形态鉴定  23-24
    2.2.5 rDNA ITS 序列测定与分析  24-28
    2.2.6 苹果炭疽病采后发病规律的研究  28-30
第三章结果与分析  30-45
  3.1 病原菌的分离与培养  30
  3.2 病原菌的形态学鉴定  30-31
  3.3 致病性测定  31
  3.4 病原菌的ITS 序列分析  31-33
  3.5 尖孢炭疽菌特异性引物扩增  33-37
  3.6 苹果采后炭疽病发病规律的研究  37-45
    3.6.1 不同贮藏方式对病原菌侵染规律的影响  37-38
    3.6.2 不同接种方式对病原菌侵染规律的影响  38-40
    3.6.3 不同接种浓度对病原菌侵染规律的影响  40-42
    3.6.4 不同培养温度对病原菌侵染规律的影响  42-45
第四章讨论与结论  45-47
  4.1 讨论  45-46
  4.2 结论  46-47
参考文献  47-53
致谢  53-54
作者简介  54

陕西苹果炭疽病病原及采后发病规律初探

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