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大白菜游离小孢子培养技术研究

作　者: 张亚丽
导　师: 张鲁刚
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 园艺植物种质资源学
关键词: 大白菜游离小孢子培养胚状体植株再生倍性鉴定
分类号: S634.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 40次
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内容摘要

为建立高效的大白菜游离小孢子培养技术体系,以12种基因型的大白菜为试材,进行游离小孢子培养,对影响小孢子胚状体诱导的因素、提高小孢子植株获得率的方法、以及小孢子植株的倍性鉴定方法进行了研究,取得的主要结果如下:1.不同基因型大白菜小孢子的成胚能力存在很大的差异。在供试的12种基因型大白菜中,共有9种基因型大白菜获得了胚状体,反应范围为75.0%。其中‘陕秋白’产胚量最高,每花蕾产胚54.8个;其次是‘05杂42’,每花蕾产胚38.2个;产胚量最少的是‘06S96’,每花蕾仅产生0.7个胚。2.供体植株的发育状态对小孢子的胚胎发生关系密切。盛花期花蕾的小孢子产胚量最高,分别是初花期和末花期的4.38和15.44倍。3. 4℃低温预处理花蕾1 d能提高‘06杂48’和‘JC-9’的小孢子胚诱导率,但随着处理时间的延长,胚产量下降。4.热激处理对小孢子胚胎发生起关键作用。胚状体的诱导以33℃热激1 d为最佳,随着热激时间的延长,胚诱导率下降。5.激素对大白菜小孢子胚胎发生及发育有一定的影响。培养基中添加0.2 mg/L 6-BA能显著提高小孢子胚的诱导率,而NAA对提高小孢子胚诱导率的作用不明显。6.成苗率与胚胎发育时期密切相关。越接近成熟的胚成苗率越高。子叶型胚及萌发胚成苗率最高,可达62.3%;鱼雷型胚成苗率较低,只有9.2%;心型胚和球型则不成苗。7.培养基琼脂浓度为1.2%时最有利于胚状体成苗。培养基中添加200 mg/L活性炭有利于小孢子胚成苗。8.培养中激素配比对小孢子胚芽分化有一定的影响。胚状体接种于添加0.1 mg/L GA3的B5培养基中胚芽的分化速度最快,出芽率高。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
第一章文献综述  10-27
  1.1 植物单倍体培养  10-14
    1.1.1 单倍体的涵义及诱导途径  10
    1.1.2 单倍体植株的应用价值  10
    1.1.3 花药培养及研究概况  10-12
    1.1.4 游离小孢子培养  12-14
  1.2 大白菜游离小孢子培养研究进展  14-25
    1.2.1 发展进程  14-15
    1.2.2 影响小孢子培养的因素  15-21
    1.2.3 胚状体发生及植株再生  21-22
    1.2.4 花粉植株的倍性、倍性鉴定  22-23
    1.2.5 花粉植株染色体加倍技术  23-25
  1.3 立题的目的和意义  25-27
第二章影响大白菜游离小孢子培养胚胎发生因素的研究  27-36
  2.1 材料与方法  27-29
    2.1.1 材料及试材的准备  27
    2.1.2 试验方法  27-29
    2.1.3 统计与分析方法  29
  2.2 结果与分析  29-33
    2.2.1 基因型对大白菜游离小孢子培养胚状体发生的影响  29-30
    2.2.2 株龄和采花期对小孢子胚胎发生的影响  30-31
    2.2.3 花蕾低温预处理对小孢子胚胎发生的影响  31
    2.2.4 热激预处理对小孢子胚胎发生的影响  31-32
    2.2.5 激素对小孢子胚胎发生的影响  32
    2.2.6 活性炭对小孢子胚胎发生的影响  32-33
    2.2.7 NLN-13 培养基中直接添加秋水仙素的试验  33
  2.3 讨论  33-36
    2.3.1 基因型对大白菜小孢子胚胎发生的影响  33-34
    2.3.2 株龄和花期对小孢子胚胎发生的影响  34
    2.3.3 花蕾低温预处理对小孢子胚胎发生的影响  34
    2.3.4 热激预处理对小孢子胚胎发生的影响  34
    2.3.5 激素对小孢子胚胎发生的影响  34-35
    2.3.6 活性炭对小孢子胚胎发生的影响  35
    2.3.7 NLN-13 培养基中直接添加秋水仙素的试验  35-36
第三章影响大白菜小孢子胚成苗因素的研究  36-40
  3.1 材料与方法  36
    3.1.1 试验的材料  36
    3.1.2 试验方法  36
  3.2 结果与分析  36-38
    3.2.1 培养基中水分含量对小孢子植株获得率的研究  36-37
    3.2.2 胚状体的发育程度对小孢子植株获得率的影响  37-38
    3.2.3 基本培养中激素配比对小孢子胚芽分化的影响  38
    3.2.4 培养基中活性炭含量对小孢子植株获得率的影响  38
    3.2.5 大白菜小孢子植株的继代、生根和移栽  38
  3.3 讨论  38-40
第四章大白菜小孢子植株倍性鉴定方法研究  40-43
  4.1 材料与方法  40
    4.1.1 试验材料  40
    4.1.2 试验方法  40
  4.2 结果与分析  40-42
    4.2.1 不同倍性小孢子植株的形态学特征  40-41
    4.2.2 气孔密度，气孔保卫细胞长度和宽度、保卫细胞中叶绿体数目观测  41
    4.2.3 用花粉母细胞染色体数目进行倍性鉴定  41-42
  4.3 讨论  42-43
第五章结论  43-45
参考文献  45-52
附录  52-53
图版  53-56
缩略词  56-57
致谢  57-58
作者简介  58

大白菜游离小孢子培养技术研究

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