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“芪香”气雾剂对流感病毒小鼠免疫调控的实验研究

作 者: 戴敏
导 师: 马萍
学 校: 成都中医药大学
专 业: 中西医结合基础
关键词: “芪香”气雾剂 流行性感冒 免疫调控
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 14次
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内容摘要


目的:通过动物实验研究,探索“芪香”气雾剂对流感病毒小鼠的免疫调控作用。实验方法:1.动物分组小鼠按体重随机分成6组,分别是:空白对照组、模型组、阳性对照组(双黄连气雾剂)、“芪香”气雾剂低剂量组(L)、“芪香”气雾剂中剂量组(M)、“芪香”气雾剂高剂量组(H)。2.动物给药攻毒前动物连续雾化给药或生理盐水7天,具体步骤如下:(1)空白组,给予生理盐水0.15ml只/天;(2)模型组,给予生理盐水0.15ml只/天;(3)阳性药物组,给予双黄连气雾剂0.03ml只/天;(4)低剂量组,给予“芪香”气雾剂0.15ml只/天;(5)中剂量组,给予“芪香”气雾剂0.30ml只/天;(6)高剂量组,给予“芪香”气雾剂0.45ml只/天。3.动物造模在乙醚麻醉下,空白组给予生理盐水每只0.05ml滴鼻,模型组、阳性药物组、低剂量组、中剂量组、高剂量组分别予以每只病毒稀释液0.05ml滴鼻。4.动物攻毒及相关指标测定(1)动物攻毒后第7天,称取小鼠体重后眼眶采血分离血清,ELISA测定血清中IFN-γ和IL-10的含量;(2)摘眼球处死动物,取肺组织,测肺指数,左肺组织固定,HE染色,观察肺组织结构变化情况;(3)取脾和胸腺分别称重,测脾指数和胸腺指数,并固定脾组织,石蜡包埋切片,免疫组化染色法,测定CD4、CD8阳性细胞百分率。结果:1.模型组IFN-γ水平较空白对照组明显降低(P<0.01);“芪香”气雾剂高、中、低剂量组及阳性药物对照双黄连组能使小鼠血清IFN-γ含量升高,与病毒感染模型组比较有显著性差异(P<0.01)。2.模型组IL-10水平有增高趋势,但与空白对照组比较无明显差异(P>0.05);“芪香”气雾剂高、中、低剂量组及阳性药对照双黄连组能使小鼠血清IL-10含量进一步升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。3.模型组较空白对照组的肺指数明显增加(P<0.01);“芪香”气雾剂高、中、低剂量组肺指数均显著低于模型组(P<0.01)。4.模型组脾指数有增高趋势,与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);“芪香”气雾剂高、中、低剂量组及阳性对照组对小鼠感染流感病毒后脾指数无明显影响(P>0.05)。5.模型组较空白对照组的胸腺指数明显减少(P<0.01);“芪香”气雾剂中、低剂量组、阳性对照组对流感病毒感染小鼠胸腺缩小无明显改善(P>0.05);“芪香”气雾剂高剂量组较模型组的胸腺指数明显增加(P<0.05)。6.模型组CD4显著低于空白对照组(P<0.01),而CD8显著高于空白对照组(P<0.01),CD4/CD8则明显低于空白对照组(P<0.01);“芪香”气雾剂高、中、低剂量组及阳性药物双黄组连升高CD4,降低CD8,提高CD4/CD8比值;与模型组比较,有统计学意义(P<0.01)。7.“芪香”气雾剂高、中、低剂量组与模型组比较肺部病变均有不同程度的减轻。结论:1.“芪香”气雾剂预先给药可减轻流行性感冒小鼠病毒性肺炎的肺部病理损伤,并可调节小鼠免疫应答,提高细胞免疫应答水平。2.“芪香”气雾剂对流感病毒感染小鼠所致病毒性肺炎有较好的治疗和预防作用。

全文目录


中文摘要  3-5
Abstract  5-7
缩略词  7-10
引言  10-13
一、甲型流感病毒A/PR/8/34株半数致死量(LD_(50))和死亡率的测定  13-15
  1.实验材料及主要设备  13
    1.1 病毒  13
    1.2 实验动物  13
    1.3 主要设备  13
  2.实验方法  13-15
    2.1 病毒半数致死量(LD_(50))测定  13-15
二、"芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠呼吸器病理学变化的影响  15-20
  1.实验材料及主要设备  15
    1.1 病毒  15
    1.2 实验动物  15
    1.3 主要药物及试剂  15
    1.4 主要仪器和设备  15
  2.实验方法  15-16
    2.1 复制病毒感染动物模型  15-16
    2.2 实验分组与给药  16
    2.3 病理学观察  16
    2.4 统计方法  16
  3.实验结果  16-20
    3.1 "芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠肺脏大体病变的影响  16-17
    2.2 "芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠肺脏病理组织学变化的影响  17-20
三、"芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠肺指数的影响  20-23
  1.实验材料及主要设备  20
    1.1 病毒  20
    1.2 实验动物  20
    1.3 主要药物及试剂  20
    1.4 主要仪器和设备  20
  2.实验方法  20-21
    2.1 复制病毒感染动物模型  20-21
    2.2 实验分组与给药  21
    2.3 检测指标与方法  21
  3.实验结果  21-23
四、"芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠胸腺、脾指数的影响  23-26
  1.实验材料及主要设备  23
    1.1 病毒  23
    1.2 实验动物  23
    1.3 主要药物及试剂  23
    1.4 主要仪器和设备  23
  2.实验方法  23-24
    2.1 复制病毒感染动物模型  23
    2.2 实验分组与给药  23-24
    2.3 检测指标与方法  24
  3.实验结果  24-26
五、"芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠血清IFN-γ及IL-10含量的影响  26-29
  1.实验材料及主要设备  26
    1.1 病毒  26
    1.2 实验动物  26
    1.3 主要药物及试剂  26
    1.4 主要仪器和设备  26
  2.实验方法  26-27
    2.1 复制病毒感染动物模型  26-27
    2.2 实验分组与给药  27
    2.3 观察指标和方法  27
  3.实验结果  27-29
    3.1 "芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠血清IFN-γ含量的影响  27
    3.2 "芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠血清IL-10含量的影响  27-29
六、"芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠脾组织(CD_4/CD_8)的影响  29-33
  1.实验材料及主要设备  29-30
    1.1 病毒  29
    1.2 实验动物  29
    1.3 主要药物及试剂  29
    1.4 主要仪器和设备  29-30
  2.实验方法  30-31
    2.1 复制病毒感染动物模型  30
    2.2 实验分组与给药  30
    2.3 观察指标和方法  30-31
  3.实验结果  31-33
讨论  33-44
  1.祖国医学对流行性感冒的认识及治疗原则  33-37
    1.1 源流考证  33-34
    1.2 病因病机  34-35
    1.3 防治原则  35-36
    1.4 方药分析  36
    1.5 现代药理研究  36-37
  2."芪香"气雾剂对流感病毒感染动物的研究  37-44
    2.1 "芪香"气雾剂对流行性感冒病毒小鼠肺组织病理学的影响  37-38
    2.2 "芪香"气雾剂对流行性感冒病毒小鼠肺指数的影响  38-39
    2.2 "芪香"气雾剂对流感病毒感染小鼠胸腺、脾指数的影响  39
    2.4 "芪香"气雾剂对流感病毒小鼠细胞因子IL-10及IFN-γ的影响  39-42
    2.5 "芪香"气雾剂对流感病毒小鼠T淋巴细胞亚群(CD_4/CD_8)的影响  42-44
结论  44-45
问题与展望  45-46
参考文献  46-48
致谢  48-49
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  49

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