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芝麻子叶不定芽诱导及其植株再生的研究

作　者: 安建伟
导　师: 张海洋
学　校: 南京农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 芝麻子叶不定芽细胞学观察
分类号: S565.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 33次
引　用: 2次
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内容摘要

芝麻(Sesamum indicum L.,2n=26),属于胡麻科胡麻属,是世界上最古老的油料作物之一。芝麻是目前公认的不易进行组织培养的几种作物之一,组织培养中的分化问题较难解决,因此建立稳定的组织培养体系是芝麻现代生物技术发展和应用的主要任务之一。20世纪80年代,前人对芝麻组织培养进行了初步研究,国内外关于芝麻不定芽诱导及植株再生的研究的报道已有不少,但是至今芝麻离体培养植株再生率仍很低。为此,笔者以芝麻成熟胚种子子叶为外植体,进行了不定芽诱导及植株再生的研究,并对不定芽发生进行了细胞学观察研究。具体结果如下：1.芝麻子叶不定芽诱导及其植株再生体系的优化以10个不同基因型芝麻品种的子叶为外植体,开展了培养基中激素种类、浓度、蔗糖及AgNO3添加与否等因素对不定芽诱导及植株再生影响的研究。结果表明：芝麻成熟胚子叶不定芽诱导的最佳培养基配方为：MS+IAA 2.0 mg/L+6-BA 5.0 mg/L+ ABA 0.5 mg/L；培养基MS+IAA 1.0 mg/L有利于丛生芽的生长和伸长,而培养基MS+6-BA2.0 mg/L则有利于丛生芽的进一步分化；适宜的再生植株生根培养基配方为：1/2 MS+2.0 mg/L IAA.ABA是不定芽成功诱导的关键因子之一,子叶不定芽的分化以及诱导率的高低不仅与ABA的浓度有关,还与其特定的添加时间有关；在子叶不定芽诱导的过程中宜用蔗糖作碳源,且最佳浓度为30 g／L,pH为6.2；不定芽的诱导以先在黑暗条件下培养8d为宜,之后的生长分化则须在光下进行；添加适量浓度的AgNO3和琼脂均有利于芝麻不定芽的诱导；另外,不同基因型芝麻诱导不定芽的能力差别较大,其中最佳的基因型是冀黑芝1号；子叶外植体以种子黑暗震荡培养24 h最为灵敏。2.芝麻子叶不定芽诱导的细胞学观察试验中利用石蜡切片法,对不同处理的芝麻子叶外植体不定芽的发生进程及发育状况进行了观察。结果表明：加ABA的处理子叶切口膨大,子叶上表皮细胞分生组织化,其细胞核体积增大,细胞质浓厚；随着表皮细胞的平周或垂周分裂,在子叶上表皮出现分生组织突起,随着分生组织突起的增大,突起两侧逐渐发育出叶原基,分生组织突起和叶原基组成芽原基,芽原基进一步发育形成肉眼可见的不定芽。然而,不加ABA的处理只是表皮细胞的分裂(细胞数量和体积的增加),没有分生组织突起及不定芽原基的形成,所以也就没有不定芽的分化。细胞学观察结果表明,在芝麻子叶不定芽诱导的过程中,ABA的作用至关重要。

芝麻子叶不定芽诱导及其植株再生的研究

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