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海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的研究

作　者: 周利娟
导　师: 陆兆新
学　校: 南京农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 海洋链霉菌GB-2 抗真菌物质稳定性分离纯化优化
分类号: Q93
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

海洋微生物是海洋生物的重要组成部分,它可产生大量不同于陆地生物的生物活性物质。海洋微生物所产生的生物活性物质种类包括新型抗生素、抗癌药物、不饱和脂肪酸、酶、酶抑制剂、维生素、毒素等。海洋微生物正成为海洋药研究的热点,已引起众多研究者的关注。菌株GB-2是从中国连云港海域分离筛选获得,具有广谱抗菌作用。本研究目的在于对菌株GB-2产抗真菌物质进行广谱性测定和稳定性研究,并分离纯化出该抗真菌物质,同时通过优化培养基和培养条件提高抗真菌物质的产量。论文的主要研究内容和结论如下：1.菌株GB-2产抗真菌物质的广谱性测定和稳定性研究。结果表明菌株GB-2所产抗真菌物质具有较广范围的抑菌谱,它不仅对米曲霉、点青霉等食品中常见的腐败真菌有较好的抑制作用,而且抑制棉花枯萎病菌、稻瘟病菌等植物病原真菌；该抗真菌物质在pH1.0和pH13.0条件下处理12h及100℃条件下处理30min,抗真菌活性几乎不变,紫外照射24h和不同蛋白酶处理对其抗真菌活性几乎没有影响。因此,该抗真菌物质具有良好的酸碱热、紫外和蛋白酶稳定性,具有较好的应用潜力。2.菌株GB-2发酵上清液经浓缩、有机溶剂萃取、硅胶层析和制备型HPLC分离纯化,得到了较纯抗真菌物质。分离纯化过程中得知该抗真菌物质为一种极性较大的脂溶类物质,其在紫外分光光度计上最大吸收峰处的波长为220nm,电喷雾离子化质谱结果显示该抗真菌物质的分子量为154。3.对菌株GB-2产抗真菌物质的液体发酵条件进行了研究。采用单因素试验初步确定影响菌株GB-2产抗真菌物质的各单因子的较优水平,在此基础上,利用正交试验分别对影响该菌株发酵产抗真菌物质培养基组分和培养条件进行进一步优化。优化后的发酵条件为：葡萄糖20%,黄豆粉5%,CaCl2 0.2%,MnS04 0.3%,发酵天数6天,接种量10%,发酵温度30℃,初始pH7.0。在此条件下,抑真菌活性比优化前提高了34.5%。

全文目录

图形索引  7-9
表格索引  9-10
摘要  10-11
Abstract  11-13
第一章文献综述  13-29
  前言  13
  1 海洋微生物简介  13-15
    1.1 海洋微生物及其种类  13-15
    1.2 海洋微生物特点  15
  2 海洋微生物所产活性物质  15-20
    2.1 抗肿瘤活性物质  15-16
    2.2 酶活性物质  16-17
    2.3 酶抑制剂活性物质  17
    2.4 抗菌活性物质  17-20
  3 海洋生物活性物质的分离纯化  20-23
    3.1 溶剂法  20
    3.2 沉淀法  20-21
    3.3 柱层析法  21
    3.4 高效液相(HPLC)色谱法  21-22
    3.5 反相高效(RP-HPLC)液相色谱法  22-23
  4 本研究的主要内容  23-24
  参考文献  24-29
第二章海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的抑菌谱测定和稳定性研究  29-39
  1 材料与方法  29-32
    1.1 材料  29-30
    1.2 方法  30-32
  2 结果与分析  32-35
    2.1 抗真菌谱实验结果  32-33
    2.2 抗真菌物质的pH稳定性  33-34
    2.3 抗真菌物质的温度稳定性  34
    2.4 抗真菌物质的紫外稳定性  34
    2.5 抗真菌物质的蛋白酶稳定性  34-35
  3 讨论  35-36
  4 本章小结  36-37
  参考文献  37-39
第三章海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的分离纯化研究  39-51
  1 材料和方法  39-43
    1.1 材料  39-40
    1.2 方法  40-43
  2 结果与分析  43-47
    2.1 浓缩实验  43-44
    2.2 萃取实验  44
    2.3 特征紫外吸收光谱的测定  44-45
    2.4 硅胶柱层析  45
    2.5 制备型高效液相(HPLC)检测纯化  45-46
    2.6 质谱实验  46-47
  3 讨论  47-48
  4 本章小结  48-49
  参考文献  49-51
第四章海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的发酵条件优化研究  51-67
  1 材料与方法  51-55
    1.1 材料  51-52
    1.2 方法  52-55
  2 结果与分析  55-63
    2.1 不同碳源对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  55
    2.2 不同氮源对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  55-56
    2.3 金属离子对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  56-57
    2.4 培养基用水对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  57
    2.5 培养基正交优化实验结果  57-59
    2.6 培养基初始pH对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  59
    2.7 培养时间对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  59-60
    2.8 接种量对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  60-61
    2.9 培养温度对菌株GB-2产抗真菌物质的影响  61
    2.10 发酵条件正交优化试验结果  61-63
  3 讨论  63
  4 本章小结  63-65
  参考文献  65-67
全文结论  67-69
致谢  69-71
硕士学习期间发表的论文  71

海洋链霉菌GB-2产抗真菌物质的研究

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