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枳椇子水提取液对乙醇体外诱导的脂肪变性肝细胞的影响

作　者: 李宇
导　师: 卿笃信
学　校: 中南大学
专　业: 临床医学
关键词: 乙醇 L-02细胞酒精性脂肪肝枳椇子 SREBP-1c
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的建立不同浓度乙醇体外诱导的肝细胞脂肪变性模型,并探讨不同浓度乙醇对L-02肝细胞脂肪合成及肝酶泄漏量的影响。并确定枳椇子水提取液对乙醇体外诱导的肝细胞脂肪变性及损伤是否有防治作用。方法采用MTT法筛选乙醇诱导肝细胞脂肪变性的适宜浓度(0.3%、0.6%、1.2%、2.4%),选择最适浓度的枳棋子水提取液对其进行干预,光学显微镜观察不同组别油红O染色情况,全自动生化仪检测细胞培养基中ALT、AST酶泄露量,试剂盒检测各组细胞内甘油三酯(TG)水平,采用半定量RT-PCR法检测各组SREBP-1c表达量。结果1.用MTT法筛选出当乙醇浓度为0.1%、0.2%时细胞成活率比使用正常培基稍增高,当乙醇浓度大于0.3%时,细胞存活率随浓度升高而降低,当乙醇浓度大于2.4%时,与正常组相比细胞存活率下降最明显(P<0.05)。2.肝细胞在加入乙醇的培基中培养大于或等于48小时,油红O染色可见不同组别细胞胞浆内均有大量大小不一被染成橘红色的脂滴。如同时加入枳椇子水提取液共同培养48小时,橘红色的脂滴数目变少且颜色变淡。3.用乙醇干预后ALT、AST、TG均比正常组升高(P<0.05),枳梖子水提取液共同培养48小时则均有所下降(P<0.05)。4.各浓度乙醇组肝细胞SREBP-1c表达随乙醇浓度升高而升高(P<0.05),枳椇子水提取液共同培养48小时则均有所下降(P<0.05)。结论1.在一定浓度范围内,低浓度的乙醇可能对肝细胞的生长起促进作用,超出一定范围后,乙醇浓度越高对肝细胞损伤越大。2.乙醇单独作用于肝细胞即可致肝细胞发生脂肪变性。随乙醇作用浓度增高,肝细胞会随SREBP-1cmRNA表达上调而发生不同程度的脂肪变性,且脂变程度和损伤程度均随乙醇浓度增高而加重。3.枳椇子水提取液能减低乙醇对肝细胞的损害,并通过降低SREBP-1cmRNA的表达从而降低肝细胞内脂肪含量,对酒精性脂肪肝有防治作用。

枳椇子水提取液对乙醇体外诱导的脂肪变性肝细胞的影响

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