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惊厥损伤对发育期大鼠大脑皮层神经细胞糖皮质激素受体表达的影响

作　者: 易璐
导　师: 薄涛
学　校: 中南大学
专　业: 儿科学
关键词: 惊厥糖皮质激素受体脑发育
分类号: R748
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的研究围生期惊厥损伤对发育中大鼠大脑皮层神经细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)表达的影响。方法将48只生后(postnatal, PN)7d的Sprague-Dawley大鼠随机分成惊厥组和对照组，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30min,连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于生后(postnatal, PN)第13d、19d和2m每组各处死8只大鼠,用免疫组织化学法观察大鼠大脑皮层GR表达的变化。以原代培养的大鼠大脑皮层神经元无镁诱导的反复惊厥样放电为模型,根据对体外原代培养6天皮层神经元的不同处理分为正常细胞外液组和无镁细胞外液组。神经元在上述2种液体中孵育3小时,然后恢复正常DMEM培养液继续培养,在无镁损害后1、7及12天时应用免疫细胞化学技术及实时荧光定量PCR测定发育中大鼠皮层神经元无镁细胞外液处理后GR表达的变化。结果与对照组相比较,在PN-13d时,惊厥组大鼠顶叶区GR免疫化学累计光密度(AOD)明显低于正常对照组(P<0.05),而在PN-19d和PN-2m时,惊厥组大鼠额叶、顶叶、颞叶区GR免疫化学AOD均明显低于正常对照组(P<0.05)。体外培养的皮层神经元发现无镁损伤后12d惊厥组GR蛋白免疫化学累积光密度较对照组显著下降(P<0.01)；而应用实时定量PCR发现,无镁损伤后1d、7d惊厥组mRNA表达较对照组显著增高(P<0.05)。结论惊厥损伤可使发育期大鼠大脑皮层神经细胞GR的表达发生改变,这种改变可能独立于HPA轴。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-10
前言  10-13
第一章材料与方法  13-22
  1.1 实验材料  13-16
  1.2 实验方法与步骤  16-21
  1.3 统计学分析  21-22
第二章结果  22-29
  2.1 三氟乙醚诱导惊厥大鼠的行为特点  22
  2.2 新生大鼠反复惊厥对大脑皮层GR表达的影响  22-23
  2.3 无镁对体外培养皮层神经元MTT代谢率的影响  23-24
  2.4 无镁对体外培养皮层神经元中GR蛋白表达影响  24-25
  2.5 无镁对体外培养皮层神经元中GR mRNA表达影响  25-29
第三章讨论  29-32
第四章结论  32-33
参考文献  33-36
综述  36-45
致谢  45

惊厥损伤对发育期大鼠大脑皮层神经细胞糖皮质激素受体表达的影响

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