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阿托伐他汀对氯化锂诱导人脐静脉内皮细胞Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达的影响

作 者: 申玉超
导 师: 于晓玲
学 校: 辽宁医学院
专 业: 内科学
关键词: 内皮细胞功能 Wnt/β-catenin信号通路 人脐静脉内皮细胞 阿托伐他汀
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 6次
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内容摘要


目的研究阿托伐他汀对氯化锂(lithium chloride, Licl)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)Wnt/β-catenin信号通路的相关因子Wnt1、β-catenin及蓬乱蛋白1(Disheveled1, dvl1)表达的影响,并探讨其保护内皮细胞功能的可能机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,传代后取生长状态良好的用于实验。实验分为四组,空白对照组、激活剂组(Licl终浓度20mmol/L)、阻断剂组(Licl终浓度20mmol/L和rhDkk1终浓度10ng/mL)及阿托伐他汀组(Licl终浓度20mmol/L和阿托伐他汀终浓度10μmol/L)。应用倒置显微镜观察HUVECs病理形态的变化;应用硝酸还原酶法检测HUVECs分泌NO量;应用免疫组化法检测HUVECs中Wnt/β-catenin信号通路的相关因子(Wnt1、β-catenin及dvl1)的定位表达情况;用Western blot法检测HUVECs中Wnt/β-catenin信号通路的相关因子(Wnt1、β-catenin及dvl1)的定量表达情况。结果(1)HUVECs的病理形态学变化:空白对照组细胞为梭形且多角,呈单层鹅卵石样紧密排列;激活剂组内皮细胞收缩变圆,稀疏排列,部分细胞脱落坏死;阻断剂组和阿托伐他汀组内皮细胞变为椭圆形,细胞间隙较激活剂组明显缩小,并有少量细胞脱落坏死。(2)硝酸还原酶法检测各组HUVECs的功能:与空白对照组比较,激活剂组、阻断剂组及阿托伐他汀组细胞培养的上清液中NO含量显著减少(P<0.01);与激活剂组比较,阻断剂组及阿托伐他汀组细胞培养的上清液中NO含量(P<0.01)。(3)免疫组化法检测各组HUVECs中Wnt1、β-catenin及dvl1定位表达:空白对照组细胞质内Wnt1、β-catenin及dvl1极少量表达;激活剂组细胞质内Wnt1、β-catenin及dvl1大量表达;阻断剂组及阿托伐他汀组细胞质内Wnt1、β-catenin及dvl1表达量介于空白对照组与激活剂组之间。(4)Western blot法检测各组HUVECs中Wnt1、β-catenin及dvl1定量表达:与空白对照组比较,激活剂组、阻断剂组及阿托伐他汀组Wnt1、β-catenin及dvl1表达量显著升高(P<0.01);与激活剂组比较,阻断剂组及阿托伐他汀组Wnt1、β-catenin及dvl1表达量显著降低(P<0.01)。结论(1)激活Wnt/β-catenin信号通路对HUVECs功能有损伤作用,抑制此通路对HUVECs功能有保护作用;(2)阿托伐他汀对Wnt/β-catenin信号通路有抑制作用;(3)阿托伐他汀抑制Wnt/β-catenin信号通路,可能是其保护内皮细胞功能的机制之一。

全文目录


中文论著摘要  4-6
英文论著摘要  6-9
英文缩略语表  9-10
前言  10-11
实验材料与方法  11-15
结果  15-19
讨论  19-22
结论  22-23
本研究创新性的自我评价  23-24
参考文献  24-28
附图  28-31
附录  31-45
  综述  31-42
    参考文献  36-42
  在校期间科研成果  42-43
  致谢  43-44
  个人简历  44-45

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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