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腺病毒介导的PKCδ基因对皮肤鳞癌细胞抑制作用的实验研究

作 者: 高昆
导 师: 朴永君
学 校: 大连医科大学
专 业: 皮肤病与性病学
关键词: 腺病毒载体 皮肤鳞状细胞癌 PKCδ基因
分类号: R739.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 8次
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内容摘要


目的:本实验研究通过应用腺病毒载体将PKCδ(protein kinase Cδ,蛋白激酶Cδ)感染到鳞癌细胞系SCC13细胞,观察PKCδ对SCC13细胞增殖的影响,并利用NOD/SCID小鼠评价其体内成瘤能力,探讨PKCδ在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制及意义。方法:1.以腺病毒载体介导PKCδ感染到SCC13细胞中,通过Western blot检测PKCδ的表达情况;用~3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测PKCδ对SCC13细胞增殖的抑制作用。2.将NOD/SCID小鼠随机分为腺病毒载体介导PKCδ感染的SCC13组和LacZ感染的SCC13对照组2组,将2组细胞分别植入NOD/SCID小鼠皮下,对比观察小鼠体内成瘤能力及直径大小,行HE染色光镜下观察瘤体的组织形态。结果:1.成功感染Ad-PKCδ的SCC13细胞增殖明显抑制,与LacZ对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。2.腺病毒介导PKCδ感染的SCC13细胞组和LacZ对照组中的小鼠均有体内瘤形成,接种成功,成瘤率为100%。定期测量各组小鼠肿瘤直径,Ad-PKCδ组的小鼠成瘤直径小于LacZ对照组的瘤体直径(P<0.05)。结论:通过腺病毒介导的PKCδ感染到SCC13细胞后,发现SCC13细胞的增殖受到抑制,移植到NOD/SCID小鼠后,可在小鼠体内成瘤,对肿瘤细胞生长增殖有抑制作用,为PKCδ基因治疗人皮肤鳞癌提供可能的治疗思路和手段。

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-10
材料和方法  10-18
  1.材料  10
  2.主要试剂  10
  3.主要仪器  10-11
  4.实验方法  11-18
    4.1 试剂的配制  11
    4.2 细胞培养  11
    4.3 细胞感染  11-12
    4.4 免疫印迹(Western-blot)  12-15
    4.5 3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法  15-16
    4.6 NOD/SCID 小鼠的饲养  16
    4.7 小鼠体内成瘤  16
    4.8 小鼠体内瘤体的组织学观察  16-17
    4.9 统计学处理  17-18
    4.10 制图软件处理  18
结果  18-21
  1.细胞感染后外源性 PKCδ基因的表达  18
  2.Ad-PKCδ感染后肿瘤细胞增殖的变化  18-19
  3.PKCδ对 NOD/SCID 小鼠体内成瘤的观察  19-21
讨论  21-25
结论  25-26
参考文献  26-29
综述  29-42
  参考文献  35-42
附录  42-43
致谢  43-44

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 皮肤肿瘤
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